(13)--高效液相色谱固定相和流动相的选择.ppt

液相色谱固定相液相色谱固定相和流动相的选择和流动相的选择一、液相色谱的固定相一、液相色谱的固定相承受高承受高压能力压能力刚性固体刚性固体硬胶硬胶二氧化硅为基质二氧化硅为基质聚苯乙烯与二乙烯苯基交联而成聚苯乙烯与二乙烯苯基交联而成空隙空隙深度深度表面多孔微粒型表面多孔微粒型全多孔微粒型全多孔微粒型1.表面多孔微粒型表面多孔微粒型 出峰快，柱效高，常规分析，但柱容量低出峰快，柱效高，常规分析，但柱容量低出峰快，柱效高，常规分析，但柱容量低出峰快，柱效高，常规分析，但柱容量低基体：基体：实心玻璃球实心玻璃球表面：表面：多孔活性材料多孔活性材料2.全多孔微粒型全多孔微粒型 硅胶（氧化铝）硅胶（氧化铝）微粒凝聚而成微粒凝聚而成传质速率快，复杂混合物分离及痕量分析传质速率快，复杂混合物分离及痕量分析传质速率快，复杂混合物分离及痕量分析传质速率快，复杂混合物分离及痕量分析3.液液-固吸附色谱固定相固吸附色谱固定相多孔固多孔固体微粒体微粒极性极性非极性非极性硅胶、氧化铝、氧化镁、分子筛硅胶、氧化铝、氧化镁、分子筛 活性炭、高聚物微球等活性炭、高聚物微球等4.液液-液分配色谱固定相液分配色谱固定相惰性载体惰性载体固定液固定液硅胶，无机氧化物、高分子聚合物、脲醛树脂硅胶，无机氧化物、高分子聚合物、脲醛树脂-氧二丙腈、聚乙二醇、十八烷和角鲨烷氧二丙腈、聚乙二醇、十八烷和角鲨烷5.化学键合色谱固定相化学键合色谱固定相（1）正相键合相色谱固定相：）正相键合相色谱固定相：极性键合固定相极性键合固定相Si-OH与含有与含有-NH2、-CN、-O-的硅烷化试剂反应的硅烷化试剂反应（2）反相键合相色谱固定相：）反相键合相色谱固定相：非极性键合固定相非极性键合固定相Si-OH与含有烷基链或苯基的硅烷化试剂反应与含有烷基链或苯基的硅烷化试剂反应二、液相色谱的流动相二、液相色谱的流动相容易得到；容易得到；适合于所用的检测器；适合于所用的检测器；纯净，有一定的惰性；纯净，有一定的惰性；无毒，使用安全；无毒，使用安全；对所分离的样品有一定的溶解性能。对所分离的样品有一定的溶解性能。1.液液-固吸附色谱固定相固吸附色谱固定相（1）极性固定相，以）极性固定相，以弱极性的戊烷、己烷、庚烷弱极性的戊烷、己烷、庚烷做做流动相的主体流动相的主体（2）非极性固定相，以）非极性固定相，以水、甲醇，乙醇水、甲醇，乙醇做流动相的做流动相的主体主体2.液液-液分配色谱固定相液分配色谱固定相（1）正相液液色谱，以）正相液液色谱，以己烷、庚烷己烷、庚烷做流动相的主体做流动相的主体（2）反相液液色谱，以）反相液液色谱，以水水做流动相的主体做流动相的主体注意：流动相与固定相不互溶注意：流动相与固定相不互溶3.化学键合色谱固定相化学键合色谱固定相（1）正相键合相色谱流动相：）正相键合相色谱流动相：非极性或极性小的溶非极性或极性小的溶剂（如烃类）中加入适量的极性溶剂（氯仿、醇、剂（如烃类）中加入适量的极性溶剂（氯仿、醇、乙腈乙腈)等等（2）反相键合相色谱流动相：）反相键合相色谱流动相：水为主体成分水为主体成分