DB34_T 4206-2022 饲料中癸氧喹酯的测定 高效液相色谱法.docx

ICS 65.120CCS B 4634安徽省地方标准DB34/T 42062022饲料中癸氧喹酯的测定高效液相色谱法Determination of decoxyquine in feeds  high performance liquidchromatography method2022 - 06 - 29 发布2022 - 07 - 29 实施安徽省市场监督管理局发 布DB34/T 42062022前言本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则  第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由安徽省兽药饲料监察所提出。本文件由安徽省农业农村厅归口。本文件起草单位：安徽省兽药饲料监察所、安徽赛如分析检测科技有限公司、上海衡威生物技术长丰有限公司、安徽省饲料与健康养殖行业协会、岳西县农业农村局、阜阳市动物疫病预防与控制中心、萧县丁里畜牧站、安徽农业大学、安徽省农业科学院畜牧兽医研究所。本文件起草人：宋亚伟、丁在亮、王文风、訾振义、吴信礼、程莹、李保章、束玲玲、袁琪、刘发全、吴昊、许世富、汤春莲、陈凤敏、邵颖、潘孝成、祁钊、赵瑞宏、李珲、李佳庆。IDB34/T 42062022饲料中癸氧喹酯的测定高效液相色谱法1范围本文件规定了饲料中癸氧喹酯含量的高效液相色谱法测定方法。本文件适用于饲料中癸氧喹酯含量的测定。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T 20195动物饲料试样的制备3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4原理试样中的癸氧喹酯经氯化钙甲醇溶液超声提取过滤后，高效液相色谱分离，用紫外检测器测定，外标法定量。5试剂和材料除另有说明外，所用试剂均为分析纯，实验用水应符合 GB/T 6682 中一级水的规定。甲醇：色谱纯。无水氯化钙。1氯化钙甲醇溶液：称取氯化钙 2.0 g，加甲醇 200 mL，超声溶解。微孔滤膜：0.45 µm 有机膜。标准品：癸氧喹酯标准品（CAS 号：18507-89-6），纯度  99.7。标准溶液的配制如下：a)  标准储备液（100 µg/mL）：精确称取 20 mg 癸氧喹酯标准品（精确至 0.01 mg ）于 200 mL容量瓶中，用氯化钙甲醇溶液（5.4）超声溶解，冷却，此溶液浓度为 100 µg/mL。置于 4冰箱中保存，有效期 2 个月；b)  标准工作液：分别吸取储备液 1 mL、2 mL、5 mL、10 mL、20 mL 于 100 mL 容量瓶中，用氯化钙甲醇溶液（5.4）定容，标准工作溶液系列浓度分别为 1 µg/mL、2 µg/mL、5 µg/mL、10µg/mL、20 µg/mL，现配现用。6仪器和设备1DB34/T 42062022高效液相色谱仪：配有紫外检测器。超声波仪。分析天平：感量 0.1 g、0.1 mg、0.01 mg。离心机：转速  3000 r/min。7测定试样的制备按照 GB/T 20195 的规定进行制样。提取称取适量饲料样品（预混合饲料 1 g，浓缩饲料 3 g，配合饲料 5 g），精确至 0.01 g，置于 50mL 容量瓶中，用氯化钙甲醇溶液（5.4）准确定容，置于超声波仪超声提取 30 min。将试样提取液转移至离心管，3000 r/min，离心 10 min。取离心上清液，用 0.45 µm 滤膜过滤，滤液作为试样溶液，供高效液相色谱仪测定。色谱条件如下：a)  色谱柱：C18 柱，长 250 mm，内径 4.6 mm，粒径 5 µm （或相当者）；b)  检测波长：265 nm；c)  流动相：氯化钙甲醇溶液+甲醇，按体积比 1585（V/V）；d)  流速：1.0 mL/min；e)  柱温：25；f)  进样体积：20 µL。上机测定取试样溶液和标准工作溶液分别进样，得到色谱峰面积响应值，在线性范围内，用外标法作单点或多点校准，以保留时间定性，峰面积定量。癸氧喹酯标准色谱图见附录A中图A.1。空白试验取空白试样，除不加标准溶液外，采用相同的测定步骤进行平行操作。8结果计算公式结果按式（1）计算：𝑋 = 𝐶×𝑉×1000𝑚×1000·········································································· (1)式中：X  试样中癸氧喹酯含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；C  试液色谱峰对应的癸氧喹酯浓度，单位为微克每毫升（µg/mL）；m  试样质量，单位为克（g）；2DB34/T 42062022V  定容体积，单位为毫升（mL）。结果表示计算结果需扣除空白试样，平行测定结果用算术平均值表示，保留至小数点后1位有效数字。灵敏度本标准定量限为 1.0 mg/kg。允许差本方法的批内、批间相对标准偏差均  10。3DB34/T 42062022附录A（资料性）癸氧喹酯标准图谱见图A.1。图A.1 癸氧喹酯标准溶液的液相色谱图4