DB2110_T 0013-2022 芝麻抗蒴腐病鉴定技术规范.docx

ICS 65.020CCS  B 33DB2110辽阳市地方标准DB2110/T 00132022芝麻抗蒴腐病鉴定技术规范2022 - 11 - 11 发布2022 - 12 - 11 实施辽阳市市场监督管理局发 布DB2110/T 00132022前言本文件按照 GB/T 1.1-2020标准化工作导则 第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件由辽阳市农业农村局提出并归口。本文件起草单位：辽宁省经济作物研究所。本文件主要起草人：程洪森、那艳斌、徐婧、孙会杰、安启源、高德学、赵丹、王正军、窦淑华、荣久艳、陈雅丽、王国权、田静、孙晓莹。本文件发布实施后，任何单位和个人如有问题和意见建议，均可以通过来电和来函等方式进行反馈，我们将及时答复并认真处理，根据实际情况依法进行评估及复审。联系方式如下：辽阳市农业农村局 辽阳市文圣区北翰林路 38 号 0419-2122696辽宁省经济作物研究所 辽阳市白塔区胜利路 65 号 0419-36789311DB2110/T 00132022芝麻抗蒴腐病鉴定技术规范1  范围本文件规定了芝麻抗蒴腐病鉴定技术的术语和定义、病原接种物制备、田间抗性鉴定、病情调查、抗性评价和鉴定记载方法。本文件适用于芝麻品种、杂交种及种质资源对蒴腐病抗性的田间鉴定及评价。2  术语和定义2.1  抗病性植物体与病原物在长期进化和相互作用的复杂过程中，逐渐形成和表现出抵御有害病原物的特征和能力。2.2  致病性病原物所具有的破坏寄主并诱发病害的特性，是一种病原物固有的特性。2.3  抗性评价根据采用的技术标准判别寄主植物对特定病害反应程度和抵抗水平的描述。2.4  抗病性鉴定通过适宜技术方法鉴别植物对其特定侵染性病害的抵抗水平。2.5  人工接种在适宜条件下，通过人工操作将病原菌接种体直接或间接接种到植物体适当部位，并使植物发病的过程。2.6  病情级别植物个体或群体发病程度的量化描述。2.7  病原分离物采用人工方法从植物发病部位分离获得的病原体的纯培养物。2.8  培养基可以使病原物生长的自然或人工配制的营养基质。2DB2110/T 001320222.9  接种体用于接种以引起病害的病原物或病原物的一部分。2.10 接种悬浮液用于接种的含有定量接种体的液体。2.11  芝麻蒴腐病由链格孢菌（Alternaria alternata）侵染引发芝麻蒴果腐烂的病害，主要危害芝麻蒴果，发病初期蒴果表面出现褐色或深褐色斑点，随着病情的发展，斑点渐变成不规则病斑，呈黑色或深褐色，后期病斑包裹整个蒴果，蒴果表皮变硬，并伴随果实开裂，蒴果不实或籽粒瘪小，产量损失严重。3  病原接种体制备3.1  病菌分离采用常规组织分离法从感病蒴果的典型病斑上分离病原物。取芝麻蒴腐病典型症状的病果，切成12 cm 的小块，于 2%次氯酸钠（NaOCl）表面消毒 2 分钟，再用无菌水漂洗 3 次，置于水琼脂培养基（WA）上，25°C 培养，待病原菌产生分生孢子后，用接种针挑取分生孢子于 WA 培养基上划线稀释，在高倍体视镜挑取单孢，接种到 PDA 培养基上培养，获得纯化菌株，-40低温长期保存、备用。3. 2 接种体繁殖与保存用 PDA 培养基进行病原菌繁殖。病原菌转接到 PDA 平板上，25培养 57 天，待菌落上产生大量分生孢子后，将病原菌分生孢子用无菌水洗下，2 层纱布过滤，加入 0.3%吐温 20，制成孢子悬浮液（浓度 1.0×106 个孢子/mL），供接种用。如孢子悬浮液不能立即接种，可置 4冰箱保存，以不超过 3天为宜。4  田间抗性鉴定4.1  抗性鉴定圃选择抗病鉴定圃设置在具备良好的自然发病环境条件和灌溉条件，地势平坦、地力均匀的地块。4.2  鉴定设计鉴定材料按品种生育期早晚分组，同组材料按顺序排列，行长5 m，2行区，行距0.55 m，小区保苗80株左右。每50份鉴定材料各设1组抗、感病对照，抗病对照品种辽芝9号，感病对照品种辽芝8号。3病情级别病害症状描述1蒴果无病症或病果上零星有黑色小病点，病斑面积5%；蒴果几乎无开裂。3病果上有少量黑色或褐色病斑，5%病斑面积20%；蒴果偶见轻微开裂.5病果上有较大黑色或褐色斑块，20%病斑面积40%；部分蒴果部分明显开裂。表1  芝麻蒴腐病鉴定病情级别划分标准4DB2110/T 001320224.3  种植要求鉴定材料播种时间与大田生产芝麻播种时间相同，或根据气候条件适当调整。土壤肥力水平和栽培管理与大田生产相同。4.4  接种4.4.1 接种期接种期为植株盛花期， 即50%植株开花67朵时开始接种，时间在7月下旬，早熟品种适当提早接种。4.4.2 接种方法喷雾法接种。采用高压喷雾器将孢子悬浮液均匀喷布在植株中上部叶片和蒴果上，喷液量以不流淌为宜。选择傍晚或阴天进行接种，小雨天接种更佳。4.5  接种后管理在接种后 48 小时内进行人工辅助保湿处理，晴天白天每隔 2 小时，阴天间隔 34 小时，用喷雾器在接种部位喷清水 1 次，以增加湿度，确保病害发生。5  病情调查5.1  调查时间在成熟期进行病害调查。5.2  调查方法每小区随机选取 10 株，目测每份鉴定材料总体发病状况，逐份材料调查病株中部（植株 1/2 处）以上蒴果，记载蒴果病斑面积所占蒴果总面积的百分比。5.3  病情级别病情分级及其对应的症状描述见表 1。编 号品种名称来 源调查总数病情级别抗性评价013579注 1: 鉴定地点注 2: 接种病原菌分离物编号注 3: 接种日期                                                                                    调查日期病情级别抗性1高抗 Highly resistant（HR）3抗    Resistant（R）5中抗 Moderately resistant（MR）7感 Susceptible （S）9高感 Highly susceptible（HS）7病果上有较大黑色或褐色斑块，40%病斑面积60%，大部分蒴果中度开裂；9病果上有大量黑色或褐色斑块，病斑面积60%，大量蒴果开裂.DB2110/T  001320226  抗性评价6.1  鉴定有效性判别当感病对照材料达到其相应感病程度，该批次材料抗蒴腐病鉴定视为有效。6.2 抗性评价标准依据鉴定材料的群体发病程度（病情级别），确定其对芝麻蒴腐病的抗性水平。以 50%以上发病个体（蒴果）的病情级别作为鉴定材料群体的病情级别值，确定鉴定材料的抗性，划分标准见表 2。表  2  芝麻蒴腐病抗性评价标准7  鉴定记载表格芝麻蒴腐病鉴定结果记载见表 3。表 3         年芝麻抗蒴腐病鉴定结果记载表鉴定技术负责人（签字）：5DB2110/T 00132022AA附 录 A芝麻蒴腐病症状A 病名和症状描述A.1 病害名称芝麻蒴腐病A.2 症状描述芝麻蒴腐病是近年我国芝麻生产区突发流行的一种新病害，主要危害芝麻蒴果。发病初期蒴果表面出现褐色或深褐色斑点，随着病情的发展，斑点渐变成不规则病斑，呈黑色或深褐色，后期病斑覆盖整个蒴果，使蒴果变小、表皮变硬、绒毛消失，并伴随果实开裂，或呈现黑褐色坏死，导致芝麻蒴果不实或干枯，产量损失严重。图1 芝麻蒴腐病不同感抗级别的症状描述a：病情 1 级；b：病情 3 级；c：病情 5 级；d：病情 7 级；e：病情 9 级；6DB2110/T 00132022附 录 B芝麻蒴腐病菌B 学名和形态描述B.1 学名芝麻蒴腐病病原菌为链格孢菌Alternaria alternata (Fr.:Fr.)Keissler），属链格孢属。B.2 形态描述在PDA培养基上，菌落圆形，铺展，正面橄榄色、背面黑色，菌丝初期为白色，菌丝丰富，分枝，棕色至黑色，菌丝有隔膜。分生孢子梗单生或成簇，有隔膜，浅棕色至橄榄色。分生孢子链生或单生、呈链状、暗褐色、倒卵形或倒棍棒形，喙长短不等，横隔3  8个，纵隔或斜隔1  4个，大小22  45 × 6.5 14.5 m。7