【生物】微生物的培养技术及应用课件 2023-2024学年高二下学期人教版（2019）选择性必修三.pptx

第2节 微生物的培养技术及应用一 生物的基本培养技术第1章 发酵工程 向经过杀菌处理的牛奶中添加某些对人体有益的细菌，再经过发酵就可以制成酸奶，由于制作工艺并不复杂，一些人会在家里自制酸奶，自制酸奶虽然方便，但是食用自制酸奶导致肠胃不适的事件屡见不鲜，主要原因是在制作过程中有杂菌混入。那么，怎样才能保证无处不在的杂菌不混入发酵物中呢？应该先对制作用具和原料进行灭菌处理，再接应该先对制作用具和原料进行灭菌处理，再接种纯的菌种，并控制发酵条件，避免杂菌进入。种纯的菌种，并控制发酵条件，避免杂菌进入。从社会中来实验室培养微生物的条件:防止杂菌污染，获得纯净的微生物培养物是研究和应用微生物的前提，也是发酵工程的重要基础。培养基培养基无菌技术无菌技术一、要为人们需要的微生物一、要为人们需要的微生物提供合适的营养和环境条件提供合适的营养和环境条件；二、要确保二、要确保其他微生物无法混入其他微生物无法混入，并将需要的，并将需要的微生物分离微生物分离出来。出来。无细胞结构原核细胞真核细胞微生物：真菌：酵母菌、毛霉等；原生生物：草履虫、变形虫等微生物的类群病毒SARS病毒、新冠病毒等RNA病毒；噬菌体等DNA病毒细菌（大肠杆菌、乳酸菌、根瘤菌、硝化细菌）、蓝细菌、放线菌、支原体、衣原体等难以用肉眼观察的微小生物的统称。本章提及的微生物主要指用于发酵的细菌和真菌。相关信息（P9）一、培养基的配制2.培养基的作用：1.培养基的概念 培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。固体培养基液体培养基有无琼脂长有酵母菌菌落盛有液体培养基分离、计数、鉴定等扩大培养、用于工业生产凝固剂用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。3.培养基的分类：琼脂是一种琼脂是一种多糖，多糖，在在98 98 以上熔化以上熔化，在，在44 44 以下凝以下凝固固，不能不能为微生物生长提供为微生物生长提供能量能量和和碳源碳源。微生物在固体培养基表面或内部生长，可以形成肉眼可见的菌落菌落：是指由单个微生物细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成以母细胞为中心的一团肉眼可见的、有一定形态、构造等特征的子细胞集团。念珠菌霉菌酵母菌放线菌形状、大小、光泽度、颜色、透明度等。菌落是鉴定菌种的重要依据培养基的类型及用途标准培养基种类培养基特点作用物理性质固体培养基加凝固剂，如琼脂 微生物的分离与鉴定，活菌计数，保藏菌种半固体培养基加凝固剂，如琼脂。容器放倒不致流出，剧烈震动则破散观察微生物的运动、分类鉴定液体培养基不加凝固剂常用于扩大培养，工业生产功能选择培养基允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长培养、分离出特定微生物鉴别培养基在培养基中加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物鉴别不同种类微生物成分来源天然培养基含化学成分不明确的天然物质工业生产合成培养基培养基成分明确分类鉴定选择培养基鉴别培养基4.培养基的营养构成：各种培养基的配方不同，但一般都含有水、无机盐、碳源和氮源等营养物质。概念：（1）碳源种类：凡是能提供碳元素的物质，统称为碳源无机碳源有机碳源CO2、CO32-、HCO3-等含碳无机物糖类、脂质、蛋白质、有机酸、石油等含碳有机物，常用：糖类，尤其是葡萄糖。功能：主要用于构成细胞物质和一些代谢产物；有机碳既是碳源又是异养微生物的能源物质。自养微生物异养微生物【说明】含有C、H、O、N的有机物可作为异养型微生物的碳源、氮源、能源。概念：（2）氮源种类：功能：凡是能提供氮元素的物质，统称为氮源无机氮源有机氮源主要用于合成蛋白质、核酸及含氮代谢产物等NH4、NO3-、NH3等牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等牛肉膏和蛋白胨来源于动物含有糖、维生素和有机氮等营养物质。一般情况下，不添加氮源培养基可用来培养固氮微生物（3）水（4）无机盐良好的溶剂；维持生物大分子结构的稳定。提供无机营养；调节pH；维持渗透压。分析牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成组分组分含量含量提供的主要营养提供的主要营养牛肉膏牛肉膏5g蛋白胨10gNaCl5g无机盐H2O定容至1000mL水几种微生物的营养和能量来源分析微生物碳源氮源能源蓝细菌CO2NH4、NO3-等光能硝化细菌CO2NH3NH3的氧化根瘤菌糖类等有机物N2有机物大肠杆菌糖类、蛋白质等有机物蛋白质等有机物1.1.自养型微生物与异养型微生物培养基的主要差别在于 ；自养型微生物所需的碳源来自 碳源，异养型微生物所需的碳源来自 碳源2.无机氮源不但能给自养型微生物提供 ，也能作为 ，3.含有C、H、O、N的有机物可作为 微生物的碳源、氮源、能源；碳源无机有机氮源能源物质异养型在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对_、_ 以及_的需求；pH特殊营养物质O2微生物例子培养基需要的特殊物质或条件 乳酸杆菌霉菌细菌厌氧微生物添加维生素调至酸性调至中性或弱碱性提供无氧的条件5.培养基的特殊需求具体处理原理目的选择培养基加入青霉素青霉素能抑制细菌生长，对真菌无作用不加氮源固氮微生物能利用空气中的氮气不加有机碳源自养型微生物能利用无机碳源鉴别培养基加入酚红培养基尿素被分解产生氨，培养基呈碱性，酚红指示剂变红。加入刚果红刚果红与纤维素能形成红色复合物，当纤维素被分解后，复合物就无法形成，培养基中会出现以菌落为中心的透明圈。分离酵母菌、霉菌等真菌分离固氮菌分离自养微生物鉴别分解尿素的细菌鉴别纤维素分解菌 P20二、无菌技术无菌技术的具体内容（1）对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和 。（2）将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行 。（3）实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与 接触。（4）为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在 并在 附近进行。消毒灭菌周围的物品酒精灯火焰超净工作台上u获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌污染。1.概念：指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。2.常用的消毒方法：（1）煮沸消毒法：100煮沸56min，可以杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢。（2）巴氏消毒法：6265下消毒30 min或8090处理30s1min，适合一些不耐高温的液体，如牛奶。可以杀死牛奶中的绝大多数微生物，并且不破坏牛奶的营养成分。（3）化学药剂消毒法：用70%酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等。（4）紫外线消毒法：接种室、接种箱或超净工作台在使用前可用紫外线照射30min。在照射前，适量喷洒石碳酸或煤酚皂溶液等消毒液，可以加强消毒效果。消毒消毒常用的消毒和灭菌方法消 毒煮沸消毒法煮沸消毒法巴氏消毒法巴氏消毒法化学药剂化学药剂紫外线紫外线02生物消毒法生物消毒法:指利用指利用微生物或微生物或其代谢物其代谢物除去除去环环境中的境中的部分微生部分微生物物的方法。例如，的方法。例如，有的微生物能够有的微生物能够寄生于多种细菌寄生于多种细菌体内，使细菌裂体内，使细菌裂解，因此可以用解，因此可以用它们来净化污水、它们来净化污水、污泥。污泥。指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。芽孢：芽孢：有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体孢子：孢子：某些生物的繁殖体细菌、原生动物、真菌和植物等产生的一种有繁殖作用的无性生殖细胞。能直接发育成新个体。芽孢壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸3小时以后才死亡。灭菌灭菌1.概念：常用的消毒和灭菌方法根霉湿热灭菌实验室常用高压蒸汽灭菌锅，在压力100kPa、温度121 条件下，维持15-30min利用沸水、流通蒸汽或高压蒸汽进行灭菌原理：对象：优点：高温蒸汽破坏蛋白质、核酸等结构使其变性操作简便，效果可靠，可以杀灭所有的生物，包括最耐热的某些微生物的休眠体。基本保持培养基的营养成分不被破坏。培养基及多种器材和物品等使用后的培养基必须灭菌后才能丢弃，以免污染环境。【强调】灭菌灭菌高压蒸汽灭菌锅高压蒸汽灭菌锅高压蒸汽灭菌锅高压蒸汽灭菌锅干热灭菌箱内，在160-170 的热空气中维持下2-3h达到灭菌目的干热灭菌原理：使微生物细胞膜破坏、蛋白质变性和原生质干燥等对象：耐高温，需保持干燥的物品玻璃器皿（如试管、培养皿、吸管、注射器）金属器具（如针头、镊子、剪刀等）干热灭菌箱干热灭菌箱干热灭菌箱干热灭菌箱灭菌灭菌灼烧灭菌直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧效果：原理：对象：最彻底使微生物燃烧接种工具如涂布器、接种环、接种针或其他金属用具，接种过程中的试管口或瓶口等容易被污染的部位灭菌灭菌类型适用范围操作方法消毒灭菌较为温和理化方法，杀死部分微生物（不包括芽孢、孢子）强烈的理化方法，杀死所有微生物（包括芽孢、孢子）煮沸消毒法日常生活100 煮沸56 min巴氏消毒法不耐高温的液体6265 煮30 min或80-90 煮30s-1 min化学药剂生物活体、水源等擦拭等,如用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源紫外线紫外线照射30 min灼烧灭菌接种的金属工具、接种时用的试管口或瓶口等直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧干热灭菌耐高温、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿和金属用具等物品放入干热灭菌箱,160170 加热23h湿热灭菌培养基、培养皿等,生产和实验室常用高压蒸汽灭菌锅内,100 kPa,温度121,1530 min接种室、接种箱，超净工作台培养基的类型培养基的类型培养基的营养物质培养基的营养物质消毒消毒灭菌灭菌微微生生物物的的实实验验室室培培养养【课堂小结课堂小结】培养基培养基无菌技术无菌技术按物理性质划分按物理性质划分按组成成分划分按组成成分划分按功能划分按功能划分基本成分：基本成分：碳源、氮源、水、无机盐碳源、氮源、水、无机盐特殊需求：特殊需求：维生素（如乳酸杆菌）、碱基维生素（如乳酸杆菌）、碱基等等煮沸消毒煮沸消毒巴氏消毒巴氏消毒紫外线消毒紫外线消毒化学药剂消毒化学药剂消毒湿热灭菌湿热灭菌干热灭菌干热灭菌灼烧灭菌灼烧灭菌消毒和灭菌的比较及无菌技术的其他作用1.牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法，与煮沸消毒法相比，这两种方法的优点是什么？在达到消毒目的的同时，营养物质损失较少。2.为什么体积分数为70%75%的酒精杀菌效果最好？若酒精浓度过高，菌体表面蛋白质变性过快而凝固成一层保护膜，酒精不能渗入其中；若酒精浓度过低，杀菌能力减弱。3.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么作用？无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。目的：防止培养物被污染；防止感染实验操作者。巩固练习一下物品所采用的灭菌或消毒方法依次是 培养基 培养皿 接种环 实验操作者的双手 实验室 牛奶 湿热灭菌（高压蒸汽灭菌）干热灭菌灼烧灭菌化学药剂消毒（酒精）紫外线消毒巴氏消毒法三、微生物的纯培养培养物：纯培养：纯培养物：在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的培养。由单一个体繁殖所获得的微生物群体。获得纯培养物的过程就是纯培养。1.相关概念相关概念2.微生物纯培养的步骤微生物纯培养的步骤配制培养基灭菌接种分离培养等酵母菌的纯培养酵母菌的纯培养1.1.实验实验原理：原理：微生物群分散或稀释成单个细胞，单个细胞繁殖成单个菌落。菌落分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体，这就是菌落。采用平板划线法和稀释涂布平板法将单个微生物分散在固体培养基上，之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物形成的纯培养物。纯培养的方法：一个菌落就是一个种群。探究 实践微生物群微生物群分散分散或或稀释稀释单个细胞单个细胞单个菌落单个菌落繁殖繁殖区别不同菌落的依据大小、形状、颜色、光泽度、透明度等。（1）配制培养基 配制培养基：称取去皮马铃薯200g，切成小块，加水1000ml，加热煮沸至马铃薯软烂，用纱布过滤。向滤液中加入20g葡萄糖、15-20g琼脂，用蒸馏水定容至1000ml。四、方法步骤（2）灭菌将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，再放入高压蒸汽灭菌锅中，在压力为100kPa、温度为121的条件下，灭菌15-30min。将5-8套培养皿包成一包，用几层牛皮纸包紧，放入干热灭菌箱内，在160-170 灭菌2h。四、方法步骤 待培养基冷却至50左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。倒平板的具体操作步骤如下：拔出锥形瓶的棉塞。将瓶口迅速通过火焰。用拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，将培养基（1020 mL）倒入培养皿，立即盖上皿盖。等待培养基冷却凝固后，将培养皿倒过来放置。仔细看图：在倒平板的过程中，为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。（3）倒平板四、方法步骤33 琼脂是一种多糖，在98 以上熔化，在44以下凝固，倒平板时，高于50 则会烫手，若低于50不及时操作，琼脂会凝固。3.为什么倒平板时，将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，不能完全打开？防止杂菌污染培养基实验注意事项、分析、思考1.培养基灭菌后为什么要冷却到50左右时开始倒平板？2.培养基灭菌后，需要冷却到50左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉温度下降到刚刚不烫手即可。4.为什么倒平板和接种整个过程要在酒精灯火焰旁进行？避免杂菌污染5.倒平板时为什么要使锥形瓶的瓶口通过火焰？通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。6.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？最好不要用这个平板培养微生物。防止空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。7.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。8.怎么确定所倒平板未被杂菌污染？将所倒平板放入37的恒温箱中培养12h24h，观察是否有菌落存在以确定是否被污染或灭菌是否彻底。接种：指在无菌条件下将微生物或含菌材料转移到合适其生长繁殖的培养基中的过程。接种工具：u接种针用于穿刺接种；u接种环用于斜面接种或平板划线接种；u涂布器用于涂布平板接种；（4）接种和分离接种的方法：稀释涂布平板法、穿刺接种法、斜面接种法、平板划线法平板划线法通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。经过数次划线后培养，可以分离得到单菌落。单个细胞微生物群单个菌落连续划线稀释分散生长繁殖连续划线法分区划线法微生物的纯培养将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环的金属丝烧红。在火焰旁冷却接种环，并拔出装有酵母菌培养液的试管的棉塞 将试管口通过火焰 将已冷却的接种环伸入菌液中，蘸取一环菌液 将试管口通过火焰，并塞上棉塞 在火焰附近将皿盖打开一条缝隙，用接种环在培养基表面迅速划三至五条平行线，盖上皿盖。注意不要划破培养基灼烧接种环，待其冷却后，从第一次划线的末端开始作第二次划线。重复以上操作，作第三、四、五次划线。注意不要将最后一次的划线与第一次划线相连。平板划线法的操作步骤：微生物的纯培养第1次划线灼烧接种环灭菌第2次划线灼烧接种环灭菌第3次划线灼烧接种环灭菌灼烧接种环灭菌12345【平板划线法注意事项】接种环只蘸一次菌液，但要在培养基不同位置连续划线多次；划线首尾不能相接；每次划线前灼烧接种环进行灭菌；在5个区域划线，接种环灼烧灭菌共6次。划线操作结束后，仍需灼烧接种环，培养皿倒置培养。分区划线法培养：完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入 28 左右（培养温度因酵母菌种类的不同而稍有差异）的恒温培养箱中培养 24 48h。微生物的纯培养（5）培养酵母菌警示：在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止被微生物感染。使用后的培养基在丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境。酵母菌的纯培养接种和分离酵母菌培养酵母菌灭菌倒平板配制培养基制备培养基1.在未接种的培养基表面是否有菌落生长？如果有，说明了什么？2.在接种酵母菌的培养基上，你是否观察到了单菌落？这些菌落的颜色、大小是否一致？如果你观察到了不同形态的菌落，你能分析出可能是由哪些原因引起的吗？1.在未接种的培养基表面应该没有菌落生长，如果有，说明培养基被杂菌污染。2.提示 如果观察到了不同形态的菌落，可能是接种的菌种不纯或者无菌操作不规范等原因引起的。微生物的纯培养5.结果分析与评价 1.为什么在操作第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗？为什么？灼烧时期目的取菌种前每次划线前接种结束后杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。杀死上次划线时残留菌种，使下一次划线的菌种直接来源上次划线的末端，从而使每次划线时菌种数目逐渐减少，直至得到单个细胞。杀死接种环上原有微生物6.实验注意事项、分析、思考2.在灼烧接种环之后，要等其冷却再进行划线，目的是什么？避免温度过高杀死菌种使细菌的数目随着划线次数的增加而逐渐减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落一旦划破，会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的；存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落，菌落会沿着划破处生长，会形成一个条状的菌落4.为什么划线时要注意不能划破培养基？3.除第一次划线外，每次划线都从上一次划线的末端开始，目的是什么？5.未接种的培养基直接培养起什么作用？做空白对照，若培养后培养基表面无菌落，则说明培养基没有污染。思维训练评估论点的可信程度 有一段时间，水果“酵素”风靡各地。水果“酵素”制作的大致过程是：将洗净、切成块状的水果放入洁净的容器，再加入糖和水，密封，置于阴凉处发酵一至两周。有人说，吃水果“酵素”可以美容、减肥、促进消化和提高免疫力。请评估这一论点是否可信。所所所所谓谓谓谓“酵酵酵酵素素素素”，就就就就是是是是“酶酶酶酶”的的的的另另另另一一一一种种种种说说说说法法法法。“酵酵酵酵素素素素”制制制制作作作作就就就就是是是是利利利利用用用用微微微微生生生生物物物物进进进进行行行行无无无无氧氧氧氧呼呼呼呼吸吸吸吸的的的的原原原原理理理理，进进进进行行行行像像像像制制制制作作作作泡泡泡泡菜菜菜菜一一一一样样样样的的的的发发发发酵酵酵酵。这这这这样样样样制制制制作作作作的的的的“酵酵酵酵素素素素”中中中中可可可可能能能能有有有有糖糖糖糖类类类类(包包包包括括括括-些些些些简简简简单单单单的的的的糖糖糖糖和和和和膳膳膳膳食食食食纤纤纤纤维维维维等等等等)、蛋蛋蛋蛋白白白白质质质质(包包包包括括括括多多多多种种种种酶酶酶酶)、有有有有机机机机酸酸酸酸等等等等成成成成分分分分，不不不不存存存存在在在在它它它它独独独独有有有有的的的的、特特特特殊殊殊殊的的的的营营营营养养养养物物物物质质质质，其其其其中中中中甚甚甚甚至至至至可可可可能能能能含含含含有有有有微微微微生生生生物物物物发发发发酵酵酵酵产产产产生生生生的的的的有有有有毒毒毒毒物物物物质质质质，食食食食用用用用后后后后可可可可能能能能会会会会危危危危害害害害人人人人体体体体健健健健康康康康。因因因因此此此此，“吃吃吃吃水水水水果果果果酵素可以美容、减肥、促进消化和提高免疫力酵素可以美容、减肥、促进消化和提高免疫力酵素可以美容、减肥、促进消化和提高免疫力酵素可以美容、减肥、促进消化和提高免疫力”的论点值得怀疑。的论点值得怀疑。的论点值得怀疑。的论点值得怀疑。课堂小结课堂小结微生微生物的物的基本基本培养培养技术技术无菌技术煮沸消毒法纯培养培养基固体培养基接种分离平板划线法稀释涂布平板法种类液体培养基营养水、碳源、氮源、无机盐消毒巴氏消毒法灭菌湿热灭菌干热灭菌灼烧灭菌 1.微生物的纯培养既需要适宜的培养基，又要防止杂菌污染。判断下列相关表述是否正确。（1）培养基中的营养物质浓度越高，对微生物的生长越有利。（）（2）消毒和灭菌的杀菌程度存在差异。（）（3）微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物。（）练习与应用一、概念检测 2.日常生活中保存食品的方法有哪些？这些方法是如何阻止或抑制微生物生长的？提示：日常生活中保存食品的方法有干制、腌制、低温储存等。干制可以降低食品的水分含量；腌制可以通过食盐、糖等制造高渗环境，从而抑制微生物的生长和繁殖；低温则是通过降低微生物的代谢速率来抑制微生物的生长和繁殖。练习与应用一、概念检测 1.某同学将5个手指尖在贴有“洗手前”标签的培养基上轻轻按一下。然后用肥皂将该手洗干净，再将5个指尖在贴有“洗手后”标签的同种培养基上轻轻按一下。将这两个培养皿放入37恒温培养箱中培养24h后，发现贴有“洗手后”标签的培养皿中菌落较少。请分析回答下列问题。（1）这个实验中需要进行灭菌处理的材料用具有 （2）“将指尖在培养基上轻轻按一下”相当于微生物培养中的哪一步操作？（3）从实验结果来看,洗手后我们就能进行无菌操作了吗？操作时，我们可以采用什么方法来避免手上微生物的污染？提示（1）：培养皿和培养基。提示（2）：接种。（3）提示：通过实验结果可以看到，洗手后手上还有一些微生物，不能直接进行无菌操作。可以通过用酒精棉球擦拭双手，或戴消过毒的手套等方法来避免手上微生物的污染。二、拓展应用练习与应用 2.某生物兴趣小组将从葡萄皮上成功分离来的野生酵母菌分别接种于3个盛有等量同种液体培养基的锥形瓶中，并放置在摇床上培养，摇床转速分别为 210 r/min，230 r/min和250 r/min。培养时间与酵母菌种群密度的关系如下图所示。请分析回答下列问题。（1）摇床转速不同,意味着培养条件有什么不同？提示：意味着培养液中02含量不同。（2）从图中数据你可以得出什么结论?其原因是什么?提示：培养液中02含量越高,酵母菌种群密度越大。（3）为什么培养8h后，其中2个锥形瓶中酵母菌的种群密度基本达到稳定?提示：这时候已经达到了环境容纳量。二、拓展应用练习与应用