【同济医科大学】优质课《医学微生物学》第13章-结核分枝杆菌和麻风分支杆菌属.ppt

【同济医科大学】优质课全国特级教师 江新欢 博士教授医学微生物学医学微生物学第第1313章章 分枝杆菌属分枝杆菌属 结核分枝杆菌结核分枝杆菌 形态、染色、培养特性和抵抗力形态、染色、培养特性和抵抗力 结核分枝杆菌感染的免疫特点结核分枝杆菌感染的免疫特点 结核菌素实验的原理、结果判断和应用结核菌素实验的原理、结果判断和应用 微生物学检查和防治原则微生物学检查和防治原则 麻风分枝杆菌麻风分枝杆菌 形态、染色和致病性形态、染色和致病性结核分枝杆菌感染的免疫特点结核分枝杆菌感染的免疫特点重点重点重点与难点重点与难点难点难点*胞壁中含有大量脂质胞壁中含有大量脂质抗酸杆菌抗酸杆菌 *大多生长缓慢大多生长缓慢*致致病病物物质质为为菌菌体体成成分分，无无内内外外毒毒素素，无无芽芽孢孢、无鞭毛无鞭毛*致病多为慢性致病多为慢性分枝杆菌属特点分枝杆菌属特点分枝杆菌分类分枝杆菌分类*结核分枝杆菌结核分枝杆菌*牛分枝杆菌牛分枝杆菌*麻风分枝杆菌麻风分枝杆菌*非结核分枝杆菌非结核分枝杆菌 部分为部分为条件致病菌条件致病菌致病菌致病菌第一节第一节 结核分枝杆菌结核分枝杆菌 （Mycobacterium tuberculosis）全球全球感染感染约约20亿亿现患现患2000万万死亡死亡300万万/年年我国我国活动性肺结核患者活动性肺结核患者500万万死亡死亡13万万/年年结核病流行现状结核病流行现状一、生物学性状一、生物学性状*细长略弯（细长略弯（14）m0.4 m，有时呈分枝状，有时呈分枝状*有微荚膜、无芽胞、无鞭毛有微荚膜、无芽胞、无鞭毛*齐齐-尼抗酸染色阳性尼抗酸染色阳性1.形态与染色形态与染色菌膜菌膜2.培养特性培养特性专性需氧专性需氧*营养要求高营养要求高改良罗氏培养基改良罗氏培养基*生长缓慢生长缓慢34周形成可见菌落周形成可见菌落*兼性胞内菌兼性胞内菌巨噬细胞巨噬细胞不活泼不活泼糖发酵糖发酵触酶试验触酶试验(H2O2)热触酶热触酶试验试验结核分枝杆菌结核分枝杆菌-+-非结核分枝杆菌非结核分枝杆菌-+3.生化反应生化反应较强，与脂质有关较强，与脂质有关 四怕四怕 怕湿热怕湿热 怕酒精怕酒精 怕紫外线怕紫外线 怕抗痨药物怕抗痨药物四抗四抗 抗干燥抗干燥 抗酸碱抗酸碱 抗碱性染料抗碱性染料 抗青霉素等抗青霉素等4.抵抗力抵抗力*形态结构形态结构*耐药性耐药性*毒力毒力卡介苗卡介苗5.变异性变异性巴斯德研究所的巴斯德研究所的Calmette和和Guerin强毒的、致病性的强毒的、致病性的牛牛分枝杆菌分枝杆菌13年年230代代（BCG，BacilleCalmette-Guerin)弱毒的、失去致病性的弱毒的、失去致病性的牛牛分枝杆菌减毒株分枝杆菌减毒株卡介苗的研制卡介苗的研制二、致病性二、致病性致病物质多，主要为菌体成分致病物质多，主要为菌体成分*荚膜：有助于黏附、入侵、抗吞噬等。荚膜：有助于黏附、入侵、抗吞噬等。*脂质：占脂质：占60%60%，磷脂、脂肪酸、蜡质，磷脂、脂肪酸、蜡质D D、硫酸脑苷脂。、硫酸脑苷脂。*蛋白质：与蛋白质：与蜡质蜡质D D结合后能引起迟发型超敏反应，参与结合后能引起迟发型超敏反应，参与结核结节的形成。结核结节的形成。*多糖：多糖：使中性粒细胞增多，引起局部病灶细胞浸润。使中性粒细胞增多，引起局部病灶细胞浸润。*核酸核酸1.致病物质致病物质*磷脂：刺激单核细胞增生，抑制蛋白酶活性，使磷脂：刺激单核细胞增生，抑制蛋白酶活性，使病灶组织不分解，并使病灶中的巨噬细胞转变为病灶组织不分解，并使病灶中的巨噬细胞转变为类上皮细胞，从而形成结核结节和干酪样坏死。类上皮细胞，从而形成结核结节和干酪样坏死。*脂肪酸脂肪酸（分枝菌酸）：（分枝菌酸）：与抗酸性有关与抗酸性有关索状因子：索状因子：破坏线粒体膜及酶类，破坏线粒体膜及酶类，抑制白细胞游走，引起慢性肉芽肿。抑制白细胞游走，引起慢性肉芽肿。*蜡质蜡质D：有佐剂作用，可激发机体产生迟发型：有佐剂作用，可激发机体产生迟发型超敏反应，引起慢性肉芽肿。超敏反应，引起慢性肉芽肿。*硫酸脑苷脂：硫酸脑苷脂：抑制巨噬细胞内吞噬体与溶酶体抑制巨噬细胞内吞噬体与溶酶体融合，使该菌成为兼性胞内寄生菌。融合，使该菌成为兼性胞内寄生菌。结核病结核病*传播途径：呼吸道、消化道、皮肤损伤部位等传播途径：呼吸道、消化道、皮肤损伤部位等*多组织器多组织器 官结核病官结核病肺外感染肺外感染肺部感染肺部感染原发感染原发感染原发后感染原发后感染*基本病变：结核结节基本病变：结核结节2.所致疾病所致疾病原发综合征：原发综合征：原发病灶一淋巴管炎一淋巴结炎哑铃状双极现象原发病灶一淋巴管炎一淋巴结炎哑铃状双极现象 原发感染原发感染（结结核核结结节节）局局部部炎炎症症结核性脑膜炎结核性脑膜炎内源性感染内源性感染巨噬细胞吞噬巨噬细胞吞噬呼呼吸吸道道肺肺细菌繁殖细菌繁殖菌体成分菌体成分代谢产物代谢产物渗出性炎症渗出性炎症增生性炎症增生性炎症变质性炎症变质性炎症好好转转吸收钙化吸收钙化扩扩散散粟粒性结核粟粒性结核内源性（内源性（原发感染残留菌原发感染残留菌）外源性（外源性（外来结核菌侵入外来结核菌侵入）肺肺干酪样坏死干酪样坏死结核结节结核结节局部病变发生快局部病变发生快不易扩散不易扩散继发感染继发感染原发感染原发感染原发后感染原发后感染 易发人群易发人群儿童儿童成年人成年人 是否感染过是否感染过否否是是 免疫力和超敏反应免疫力和超敏反应无无有有 病变特点病变特点反应轻、短暂反应轻、短暂病灶反应强烈病灶反应强烈 播散（淋巴、血行）播散（淋巴、血行）易播散易播散不播散不播散原发感染与原发后感染特点比较原发感染与原发后感染特点比较三、免疫性与超敏反应三、免疫性与超敏反应*有菌免疫：或称传染性免疫（有菌免疫：或称传染性免疫（infectionimmunity）*细胞免疫：致敏细胞免疫：致敏T淋巴细胞、激活的巨噬细胞淋巴细胞、激活的巨噬细胞*郭霍现象（郭霍现象（Kochsphenomemon）*结核菌素试验：结核菌素试验：型迟发型超敏反应型迟发型超敏反应1.免疫性免疫性2.细胞免疫与超敏反应同时存在细胞免疫与超敏反应同时存在结核分枝杆菌结核分枝杆菌注入健康豚鼠注入健康豚鼠皮下皮下1014天天注射部位缓慢发生溃烂，病注射部位缓慢发生溃烂，病灶深而不易愈合，附近淋巴灶深而不易愈合，附近淋巴结肿大，细菌扩散至全身结肿大，细菌扩散至全身同量结核杆菌同量结核杆菌注入康复结核注入康复结核的豚鼠皮下的豚鼠皮下12天天注射局部迅速出现溃烂，浅注射局部迅速出现溃烂，浅而易愈合，附近淋巴结不肿而易愈合，附近淋巴结不肿大，细菌也很少扩散大，细菌也很少扩散大量结核杆菌注大量结核杆菌注入康复的豚鼠皮入康复的豚鼠皮下下局部及全身严重的超敏反应局部及全身严重的超敏反应甚至死亡甚至死亡第第二二次次初初次次第第三三次次郭霍现象郭霍现象*原理：皮肤迟发型超敏反应原理：皮肤迟发型超敏反应*结核菌素试剂：旧结核菌素（结核菌素试剂：旧结核菌素（OT）、纯蛋白衍生物）、纯蛋白衍生物（PPD）两种两种PPD：PPD-C；BCG-PPD*方法：取方法：取PPD-C和和BCG-PPD各各5单位分别注入两前单位分别注入两前臂皮内，臂皮内，4872h后观察结果后观察结果结核菌素试验结核菌素试验u5mm，阳性阳性PPD-CBCG-PPD，感染，感染PPD-CBCG-PPD，卡介苗接种，卡介苗接种u15mm，强阳性强阳性活动性结核活动性结核u5mm，阴性阴性l未感染未感染l感染的初期感染的初期l老年人老年人l患严重传染病的患者患严重传染病的患者*结果分析结果分析红肿硬结红肿硬结*应用应用1）卡介苗接种对象及免疫效果的测定）卡介苗接种对象及免疫效果的测定2）婴幼儿结核病诊断）婴幼儿结核病诊断3）测定细胞免疫功能状况）测定细胞免疫功能状况4）流行病学调查）流行病学调查四、微生物学检查法四、微生物学检查法*标本采集：痰、尿、粪、脑脊液及胸、腹水、血等标本采集：痰、尿、粪、脑脊液及胸、腹水、血等*直接镜检：抗酸染色法或荧光抗体染色法直接镜检：抗酸染色法或荧光抗体染色法*分离培养：罗氏培养基培养分离培养：罗氏培养基培养34周周*实验动物：豚鼠实验动物：豚鼠*快速诊断：快速诊断：PCR、ELISA五、防治原则五、防治原则*发现和治疗痰菌阳性者发现和治疗痰菌阳性者*新生儿接种卡介苗新生儿接种卡介苗 1.预预防防直接面视下的督导化疗直接面视下的督导化疗（DirectlyObservedTreatmentStrategy，DOTS）*标准化短程化疗方案：联合使用一组特效抗结核药物标准化短程化疗方案：联合使用一组特效抗结核药物*六项原则：早期、联合、规律、适量、全程、督导六项原则：早期、联合、规律、适量、全程、督导一线一线异烟肼异烟肼利福平利福平链霉素链霉素吡嗪酰胺吡嗪酰胺乙胺丁醇乙胺丁醇二线二线阿米卡星阿米卡星卷曲霉素卷曲霉素丙硫异烟胺丙硫异烟胺氧氟沙星氧氟沙星帕星肼帕星肼2.治治疗疗第二节第二节 麻风分枝杆菌麻风分枝杆菌 （Mycobacteriu leprae）形态染色：与结核分枝杆菌相似形态染色：与结核分枝杆菌相似培养特性：典型胞内菌，不能人工培养培养特性：典型胞内菌，不能人工培养动物模型：犰狳（动物模型：犰狳（qiuyu）抵抵抗抗力：较强，耐干燥、耐低温力：较强，耐干燥、耐低温一、生物学性状一、生物学性状二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性易感人群：人易感人群：人传播途径：直接接触、体液或由飞沫传播途径：直接接触、体液或由飞沫潜潜伏伏期：一般是期：一般是6个月至个月至5年年所致疾病：麻风、麻风结节所致疾病：麻风、麻风结节瘤型麻风：多组织、脏器，严重，传染强瘤型麻风：多组织、脏器，严重，传染强结核样型麻风：皮肤结核样型麻风：皮肤三、微生物学检查法三、微生物学检查法标本：患者鼻黏膜或皮损处取材标本：患者鼻黏膜或皮损处取材检查：抗酸性染色、显微镜检查检查：抗酸性染色、显微镜检查抗酸染色结果：抗酸染色结果：瘤型麻风患者一般阳性瘤型麻风患者一般阳性 结核样型麻风患者一般阴性结核样型麻风患者一般阴性预防：无有效疫苗预防：无有效疫苗BCG有一定效果有一定效果早发现、早隔离、早治疗早发现、早隔离、早治疗治疗：砜类，如氨苯砜等治疗：砜类，如氨苯砜等利福平利福平多种药物联合治疗多种药物联合治疗四、防治原则四、防治原则复习思考题复习思考题1.结核分枝杆菌的生物学特性？结核分枝杆菌的生物学特性？2.结核分枝杆菌致病物质及感染特点？结核分枝杆菌致病物质及感染特点？3.结核菌素试验原理、结果判定与用途？结核菌素试验原理、结果判定与用途？中英文关键词中英文关键词结核分枝杆菌结核分枝杆菌Mycobacterium tuberculosis卡介苗卡介苗BCG有菌免疫有菌免疫Infectionimmunity麻风分枝杆菌麻风分枝杆菌Mycobacteriu leprae课外阅读资料目录课外阅读资料目录1.马屿马屿,朱莉贞朱莉贞,潘毓萱潘毓萱.结核病结核病，人民卫生出版社，人民卫生出版社，20062.唐神结唐神结,高文高文.临床结核病学临床结核病学.人民卫生出版社人民卫生出版社,2011专著专著文献文献1 Stephen D Lawn,Alimuddin I Zumla.Tuberculosis.2011.Lancet 378:5772.2 Pawlowski A,Jansson M,Skld M,Rottenberg ME,Kllenius G.Tuberculosis and HIV Co-Infection.2012.PLoS Pathog 8(2):e1002464.