脑红蛋白在胶质瘤中的表达及其临床意义.docx
脑红蛋白在胶质瘤中的表达及其临床意义脑红蛋（ngb）是2000年burmat发现的主要中枢神经系统的能逆性和氧分子传输的氧蛋 白。1材料和方法1.1 材料表面1. 1. 1 i-97即用型抗体的制备脑红蛋白单克隆抗体（购自中国军事医学科学院放射医学研究所）,Ki-67即用型抗体（购自 福州迈新公司），抗体稀释液（购自中杉金桥公司），免疫组化试剂盒（购自福州迈新公 司），DAB显色试剂盒（购自福州迈新公司），光学显微镜（Olympus CX41）。1. 1.2性别间明确结果2011年5月至2012年3月在中南大学湘雅医院及湘雅三医院病理科收集人脑胶质瘤标本 98例，其中男性46例，女性52例，平均年龄38. 81岁。其中星形胶质细胞瘤63例，少突细 胞胶质瘤9例（其中间变型少突细胞胶质瘤4例），少突星形细胞瘤15例,室管膜肿瘤11例。 同时，按照WHO神经系统肿瘤分级标准（2007）, I级11例，II级39例,111级29例,IV级19 例。1.2 方法1.3 . 1免疫组织化学采用SP法进行免疫组织化学检测。具体步骤为:石蜡切片常规脱蜡,蒸储水冲洗,0. 01 mol/L PBS 浸泡 5 min;3%H1.2.2 ki-97蛋白表达Ngb阳性表达定位于胞质，呈黄色或棕黄色颗粒状。Ki-67蛋白的表达在细胞核或细胞质内, 呈棕黄色染色为阳性。随机观察5个高倍视野，以阳性细胞比例的平均值计算阳性细胞的 百分比1. 3统计学分析:非参数检验、kruskal-tableis秩和检验以及 spearsman相关分析的统计方法以ph值为5.采用统计学SPSS17. 0统计软件包进行统计学分析,应用非参数检验、Kruskal-Wallis秩和 检验和Spearsman相关分析的统计方法，以P<0. 05为差异有统计学意义。2结果2. 1星形细胞肿瘤中ngb的表达胶质瘤中Ngb的总阳性率为88. 78%,少突胶质细胞肿瘤Ngb表达阴性（图2A）, 96. 83%（61/63）星形细胞肿瘤Ngb呈阳性表达,室管膜肿瘤（图2B）及少突星形细胞肿瘤 样本中Ngb均有不同程度阳性表达。尤其在胞浆丰富、含有大量线粒体的肥胖型星形胶质 细胞瘤（图2C）和胶质母细胞瘤（图2D为巨细胞型胶质母细胞瘤）呈强阳性表达。少突胶质细胞瘤和间变型少突胶质细胞瘤Ngb表达阴性,其余类型胶质瘤中除2例毛细胞 星形细胞胶质瘤为阴性外，均呈不同程度阳性表达。15例少突星形细胞肿瘤Ngb呈+程 度阳性表达,其中的少突细胞成分Ngb呈阴性表达。11例室管膜肿瘤Ngb呈+阳性表 达。63例星形细胞肿瘤中Ngb-+表达的百分率分别为3. 17%、31.75%、4L 27%和 23.81%。尤其在胞浆丰富、含有大量线粒体的胶质母细胞瘤和肥胖型星形胶质细胞瘤Ngb 呈强阳性表达。用非参数检验发现四种组织学类型胶质瘤的Ngb阳性表达程度均不同，差 异具有统计学意义（P0.05,表1） o2. 2胶质瘤ngb-+表达的表达11例WHO I级胶质瘤中，除2例毛细胞星形细胞瘤为阴性外,其余9例毛细胞星形细胞瘤和 室管膜下巨细胞星形细胞瘤均呈弱阳性表达，阳性细胞胞质显淡黄色。39例WHOH级的胶 质瘤Ng痛+表达的百分率分别为12. 82%、33. 33%、41. 03%和12. 82%。29例WHOIII级的 胶质瘤Ngb-+表达的百分率分别为13. 79%、37. 93%、37. 93%和10. 34%。19例WH0W级 的胶质瘤均为中到强阳性表达，阳性细胞胞质表现为深黄色或黄褐色颗粒状着色。用 Kruskal-Wallis秩和检验,发现WHO级别越高的胶质瘤其Ngb的阳性表达程度越高，各级别 间的Ngb表达差异均具有统计学意义（P<0. 05,表l）o2. 3 ki-97表达情况98例胶质瘤表现出不同程度的Ki-67阳性（表2,图3）。Ki-67弱阳性表达所占比例最高， 为40. 82%,强阳性表达所占比例最低，仅有7. 14%o经Spearsman相关分析发现Ngb的表达 与核增殖指数Ki-67之间存在正相关（r3其他细胞增殖产物脑红蛋白作为珠蛋白家族的一个新成员，具有高度氧亲和力,可逆性地结合氧,存储和促进 氧向线粒体扩散,对组织细胞氧代谢、氧利用有重要作用本研究发现四种不同组织学类型胶质瘤的脑红蛋白阳性表达程度均不同,且WHO级别越 高,Ngb的阳性表达程度越高,差异均具有统计学意义(P<0. 05) o此外Ngb的表达程度与细 胞核增殖指数Ki-67均存在正相关关系(r 少突胶质细胞肿瘤和少突星形细胞肿瘤中前者胞浆比较少，其内含的线粒体也相对少。而 线粒体是Ngb的氧代谢作用重要的中介Ngb在各级胶质瘤中均可见阳性表达,WHO分级越高则表达程度越高。而胶质瘤的WHO分级 与其预后密切相关，据文献报道Ki-67是细胞核内与细胞分裂增殖相关的蛋白抗原,是应用广泛的细胞增殖标志物。本研究 中,Ngb和Ki-67在脑胶质瘤中的存在正相关关系(r脑红蛋白在肿瘤细胞中的作用机制可能有:抗凋亡作用和供氧作用。2010年Raychaudhuri 等目前,胶质瘤的治疗主要还是以手术切除为主，必要时联合放疗或化疗,治疗效果各有差异， 患者身体的基本情况、肿瘤生长的位置、大小、恶性程度以及是否手术完全切除都直接影 响到患者的生存率。胶质瘤患者的治疗在一定程度上仍有待提高。而是否能够通过拮抗人 脑胶质瘤中脑红蛋白的表达,从而阻断Ngb的抗凋亡作用或使肿瘤细胞持续处于缺氧微环 境中，抑制肿瘤细胞的生长,加速肿瘤细胞的死亡,为胶质瘤的治疗和改善胶质瘤的预后提 供一种新的思路和方法,还有待于进一步研究。
