生物第十一单元 现代生物科技 第1讲 基因工程 新人教版.ppt

研考点重点难点探究悟高考真题演练固考基双基体系优化目 录ONTENTSC课时作业第十一单元 现代生物科技专题第1讲基因工程固考基固考基双基体系优化双基体系优化基因治基因治疗疗基因基因诊诊断断原理原理_及基因表达及基因表达DNA分子分子_方法方法将正常基因将正常基因导导入有基因缺陷入有基因缺陷的的细细胞中，使胞中，使该该基因的基因的_发挥发挥功能，以达到治功能，以达到治疗疗的目的的目的制作特定制作特定DNA探探针针与与病人病人样样品品DNA混合，混合，分析分析_情况情况进进展展临临床床实验实验临临床床应应用用基因重组基因重组杂交杂交表达表达产物产物杂交带杂交带研考点研考点重点难点探究重点难点探究考点研析考点研析基因工程的基因工程的别别名名基因拼接技基因拼接技术术或或DNA重重组组技技术术操作操作环环境境生物体外生物体外操作操作对对象象基因基因操作水平操作水平DNA分子水平分子水平基本基本过过程程剪切剪切拼接拼接导导入入表达表达结结果果(优优点点)_生物性状，生物性状，创创造出人造出人类类需要的基因需要的基因产产物或生物物或生物类类型型定向改造定向改造条件条件目的目的稳稳定并能定并能_目的基因目的基因稳稳定存在且数量可定存在且数量可扩扩大大 有一个至多个有一个至多个_切割位点切割位点可携可携带带多个或多种外源基因多个或多种外源基因具有特殊的具有特殊的_基因基因便于重便于重组组DNA的的鉴鉴定和定和选择选择复制复制限制酶限制酶标记标记种类种类项目项目限制酶限制酶DNA连接连接酶酶DNA聚合酶聚合酶解旋酶解旋酶作用底物作用底物DNA分子分子DNA分子分子片段片段脱氧核苷酸脱氧核苷酸 DNA分子分子作用部位作用部位磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯磷酸二酯键键磷酸二酯键磷酸二酯键碱基对间碱基对间的氢键的氢键作用结果作用结果形成黏性末形成黏性末端或平末端端或平末端形成重组形成重组DNA分子分子形成新的形成新的DNA分子分子形成单链形成单链DNA分子分子DNA复制复制PCR技术技术区区别别解旋方式解旋方式解旋酶催化解旋酶催化DNA在高温作用下变在高温作用下变性解旋性解旋场所场所细胞内细胞内(主要在细胞主要在细胞核内核内)细胞外细胞外(主要在主要在PCR扩扩增仪内增仪内)酶酶DNA解旋酶、普通解旋酶、普通的的DNA聚合酶等聚合酶等耐热的耐热的DNA聚合酶聚合酶(Taq酶酶)温度条件温度条件细胞内温和条件细胞内温和条件需控制温度，在较高温需控制温度，在较高温度下进行度下进行合成的对象合成的对象DNA分子分子DNA片段或基因片段或基因DNA复制复制PCR技术技术联系联系模板：均需要脱氧核苷酸链作为模板进行物质合成模板：均需要脱氧核苷酸链作为模板进行物质合成原料：均为四种脱氧核苷酸原料：均为四种脱氧核苷酸酶：均需要酶：均需要DNA聚合酶进行催化聚合酶进行催化引物：均需要引物，使引物：均需要引物，使DNA聚合酶从引物的聚合酶从引物的3端开始端开始连接脱氧核苷酸连接脱氧核苷酸针对训练针对训练考点研析考点研析生物种生物种类类植物植物细细胞胞动动物物细细胞胞微生物微生物细细胞胞常用方法常用方法_转转化法化法_法法_法法受体受体细细胞胞_细细胞胞_原核原核细细胞胞转转化化过过程程将目的基因插将目的基因插入到入到Ti质质粒的粒的TDNA上上导导入入农农杆菌杆菌侵侵染植物染植物细细胞胞整合到受体整合到受体细细胞的染色体胞的染色体DNA上上表达表达将含有目的基将含有目的基因的表达因的表达载载体体提提纯纯取卵取卵(受受精卵精卵)显显微注微注射射受精卵受精卵发发育育获获得具有得具有新性状的新性状的动动物物Ca2处处理理细细胞胞感受感受态细态细胞胞重重组组表达表达载载体与感受体与感受态细态细胞混合胞混合感受感受态细态细胞吸收胞吸收DNA分子分子农杆菌农杆菌显微注射显微注射转化转化体体受精卵受精卵针对训练针对训练考点研析考点研析项项目目蛋白蛋白质质工程工程基因工程基因工程区区别别原理原理中心法中心法则则的逆推的逆推基因重基因重组组过过程程预预期蛋白期蛋白质质功能功能设计预设计预期的蛋白期的蛋白质结质结构构推推测应测应有的氨基酸序列有的氨基酸序列找到相找到相对应对应的脱氧核苷酸序列的脱氧核苷酸序列合成合成DNA表达出蛋白表达出蛋白质质获获取目的基因取目的基因构建基因构建基因表达表达载载体体将目的基因将目的基因导导入受体入受体细细胞胞目的基因的目的基因的检测检测与与鉴鉴定定实质实质定向改造或生定向改造或生产产人人类类所需所需的蛋白的蛋白质质定向改造生物的定向改造生物的遗传遗传特性，特性，以以获获得人得人类类所需的生物所需的生物类类型或生物型或生物产产品品(基因的异基因的异体表达体表达)结结果果生生产产自然界没有的蛋白自然界没有的蛋白质质生生产产自然界已有的蛋白自然界已有的蛋白质质项项目目蛋白蛋白质质工程工程基因工程基因工程联联系系蛋白蛋白质质工程是在基因工程基工程是在基因工程基础础上延伸出来的第二代上延伸出来的第二代基因工程基因工程基因工程中所利用的某些基因工程中所利用的某些酶酶需要通需要通过过蛋白蛋白质质工程工程进进行修行修饰饰、改造、改造针对训练针对训练考点研析考点研析加蒸馏加蒸馏水水2次次加到鸡血细胞液中，使血细胞吸水涨破；加到鸡血细胞液中，使血细胞吸水涨破；加到含加到含DNA的的2 mol/L的的NaCl溶液中，使溶液中，使NaCl溶液的物质的量溶液的物质的量浓度稀释到浓度稀释到0.14 mol/L，使，使DNA析出析出用纱布用纱布过滤过滤4次次过滤血细胞破裂液，得到含细胞核物质的滤液；过滤血细胞破裂液，得到含细胞核物质的滤液；过过滤用滤用2 mol/L的的NaCl充分溶解的充分溶解的DNA，滤去溶液中的杂，滤去溶液中的杂质；质；滤取滤取0.14 mol/L的的NaCl溶液中析出的溶液中析出的DNA(黏稠黏稠物物)；过滤溶有过滤溶有DNA的的2 mol/L的的NaCl溶液溶液用用NaCl溶液溶液4次次加加2 mol/L的的NaCl溶液，溶解提取的细胞核物质；溶液，溶解提取的细胞核物质；用用0.14 mol/L的的NaCl溶液使溶液使DNA析出；析出；用用2 mol/L的的NaCl溶液，溶解滤取的溶液，溶解滤取的DNA黏稠物；黏稠物；用用2 mol/L的的NaCl溶液，溶解丝状物用于鉴定溶液，溶解丝状物用于鉴定DNA针对训练针对训练试试管管序号序号AB1加加2 mol/L的的NaCl溶液溶液5 mL加加2 mol/L的的NaCl溶液溶液5 mL2不加不加加入提取的加入提取的DNA丝丝状物并状物并搅搅拌拌3加加4 mL二苯胺，混匀二苯胺，混匀加加4 mL二苯胺，混匀二苯胺，混匀4沸水浴沸水浴5分分钟钟沸水浴沸水浴5分分钟钟实现现实现现象象实验结论实验结论悟高考悟高考真题演练真题演练