生物 5 课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片断教学（公开课） 新人教版选修1.ppt

课题2 DNA多聚酶链式反应扩增DNA片断DNADNA化学组成化学组成P脱氧核糖脱氧核糖含氮碱基含氮碱基组成元素：组成元素：C、H、O、N、P基本单位：脱氧基本单位：脱氧核糖核糖核糖核糖核苷酸核苷酸鸟嘌呤（鸟嘌呤（鸟嘌呤（鸟嘌呤（G G G G）腺嘌呤（腺嘌呤（腺嘌呤（腺嘌呤（A A A A）胞嘧啶（胞嘧啶（胞嘧啶（胞嘧啶（C C C C）胸腺嘧啶（胸腺嘧啶（胸腺嘧啶（胸腺嘧啶（T T T T）DNADNA全称：脱氧核糖核酸全称：脱氧核糖核酸全称：脱氧核糖核酸全称：脱氧核糖核酸（1 1 1 1）DNADNADNADNA分子是由分子是由分子是由分子是由两条反两条反两条反两条反向平行向平行向平行向平行的脱氧核苷酸长链的脱氧核苷酸长链的脱氧核苷酸长链的脱氧核苷酸长链盘旋而成的。盘旋而成的。盘旋而成的。盘旋而成的。（2 2 2 2）DNADNADNADNA分子中的分子中的分子中的分子中的脱氧核脱氧核脱氧核脱氧核糖和磷酸糖和磷酸糖和磷酸糖和磷酸交替连接，排列交替连接，排列交替连接，排列交替连接，排列在外侧在外侧在外侧在外侧，构成基本骨架；，构成基本骨架；，构成基本骨架；，构成基本骨架；碱基在内侧碱基在内侧碱基在内侧碱基在内侧。（3 3 3 3）两条链上的碱基通）两条链上的碱基通）两条链上的碱基通）两条链上的碱基通过过过过氢键氢键氢键氢键连结起来，形成碱连结起来，形成碱连结起来，形成碱连结起来，形成碱基对，且基对，且基对，且基对，且遵循碱基互补配遵循碱基互补配遵循碱基互补配遵循碱基互补配对对对对原则。原则。原则。原则。AT、GCDNADNA双螺旋结构双螺旋结构的主要特点的主要特点AAAAAAT TT TT TGGGGGGGGCCCCCCAAT TCCDNADNA的复制的复制边解旋边复制边解旋边复制半保留复制半保留复制遵循遵循 碱基互补配对原则碱基互补配对原则第一代第一代第二代第二代第三代第三代第四代第四代OOPOHO碱基碱基OOHOOPOHOOH碱基碱基5335碱基碱基碱基碱基脱氧核糖脱氧核糖脱氧核糖脱氧核糖磷酸基团磷酸基团磷酸基团磷酸基团碱基碱基碱基碱基脱氧核糖脱氧核糖脱氧核糖脱氧核糖碱基碱基碱基碱基脱氧核糖脱氧核糖脱氧核糖脱氧核糖53多脱氧核苷酸链结构简图多脱氧核苷酸链结构简图完成三维完成三维设计设计49页页基本知识。基本知识。1、DNA体内复制与PCR的相同点和不同点？2、PCR的过程有几步？5/3/GGTC3/5/GACC5/3/AG引物引物5/3/GG引物引物二、PCR原理5/3/GGTC3/5/GACC5/3/AG引物引物5/3/GG引物引物二、PCR原理变性变性复性复性延伸延伸5/3/GGTC5/3/GGTC5/3/GA引物引物5/3/GA引物引物5/3/GG引物引物5/3/GA引物引物3/3/5/GACC3/5/GACC5/3/GG引物引物5/3/GG引物引物5/3/GG引物引物3/5/3/GA引物引物实验操作步骤：实验操作步骤：（1）按配方将所需试剂摆放在实验桌上）按配方将所需试剂摆放在实验桌上（准备准备）（2）用）用微量移液器微量移液器按配方在微量离心管中按配方在微量离心管中依次加入各组分（依次加入各组分（移液移液）（3）盖严）盖严离心管离心管口的盖子，用手指轻轻弹口的盖子，用手指轻轻弹击管壁（击管壁（混合混合）（4）将微量离心管放在）将微量离心管放在离心机离心机上（上（离心）离心）（5）将离心管放入）将离心管放入PCR仪仪上，设置好上，设置好PCR仪的循环程序（仪的循环程序（反应反应）4下图表示以鸡血为实验材料进行DNA的粗提取与鉴定的操作程序，请分析回答下列问题：(1)步骤一中，向鸡血细胞液中加入_并搅拌，可使鸡血细胞破裂。(2)步骤二中，过滤后收集含有DNA的_。(3)步骤三、四的操作原理是_；步骤四中，通过向溶液中加入_调节NaCl溶液的物质的量浓度至_mol/L时，DNA将会析出，过滤去除溶液中的杂质。(4)步骤七：向步骤六过滤后的_中加入等体积的冷却的_，静置23 min，溶液中会出现_色丝状物，这就是粗提取的DNA。(5)步骤七：DNA遇_试剂，沸水浴5 min，冷却后，溶液呈_色。