非液基脱落细胞学 .ppt

脱落细胞学病理科脱落细胞学细胞固定的方法常见固定问题的处理体腔液样本的制备细胞固定的方法将细胞标本制作完成后，在细胞湿润时，立即放入以醇性溶液为主的固定液（95%酒精、无水酒精、甲醇、乙醚酒精液等）内，称湿固定法。这种方法是目前最好的固定方法，可以完好的保存细胞内的各种结构，对正确认识各种细胞的性质，减少细胞学的误诊有很大的帮助。细胞固定的方法此方法在痰涂片、妇科涂片、穿刺物涂片、各种刷片、食道拉网涂片、肿块印片等水分较少的标本上使用非常方便，但在胸腹水、尿、心包积液、脑脊液等含水量较高的标本制作时，需要一定的技术，才能避免细胞的脱落，这在后面各章节具体会讲。细胞固定的方法细胞经过湿固定后，应该直接从固定液内拿出放入染色液中，无需水洗或干燥，水洗容易使细胞脱落，干燥会导致细胞褪变，也就是说无论在固定前还是固定后细胞干燥都会导致细胞褪变。细胞固定的方法湿固定后的固定液，一定要过滤或更换，防止细胞的脱落和污染。在固定和染色时，最好能将痰与其他液体标本分开处理，尽可能不要使用相同的苏木素液或使用前过滤，因为痰标本很容易吸附脱落的细胞，造成人为的污染，有时会导致误诊常见固定问题的处理1、细胞褪变：通常是由于涂片在干燥过程中，细胞氧化，导致细胞褪变。解决方法，在半湿状态下立即固定。其二，也可能是由于细胞不能及时送检。解决方法：及时送检，或在送检液体内加入福尔马林（送检液体：福尔马林=9：1）。常见固定问题的处理2、细胞掉片：最常见的原因是涂片上水分福尔马林太多，导致放入酒精时有大量细胞脱落。解决方法，离心后要把试管内的液体全部吸干。其次可能是细胞量太多或玻片不干净，解决方法，把玻片洗干净，涂片要薄、均匀。体腔液样本的制备体腔液样本包括胸水、腹水、心包积液、尿、肾囊肿穿刺液等制作。当送检标本为尿液时，应该要求患者排空清晨第一次尿液，因为这时的尿液中含盐量高，非上皮性物质较多。应该选择第二次以后的中段尿为佳。体腔液样本的制备如果患者有有严重的尿道或阴道炎症，应采用导尿管插管取尿，连续三天送检。根据送检标本沉淀物量的多少，区别对待：一、制片1、取液：轻轻的把送检液体上部倒掉，取下层液体15-50ml二管，放入离心管。2、转速2000/分，5分钟。体腔液样本的制备3、观看离心管内沉淀物的量：（1）量少：离心后肉眼只能看到少许沉淀，快速倒去上清液，再加入送检标本，重复离心，反复多次。最后将上清液倒去，把试管竖直倒立于吸水纸上，用吸水纸吸干管口的水分，然后用吸管吸出沉淀物（湿固定的关键就在于如何把沉淀物上的水分去除干净，过多的水分会导致细胞脱片）。体腔液样本的制备如果沉淀物太少，又没有多余的标本可以反复离心，或多次离心后细胞量还是很少，可将上清液倒去后，把试管口向上静置几秒，试管壁上的液体会流入管底，用吸管反复抽吸这点液体，把管底的细胞全部洗刷到液体里，然后吸出，放在0.5或1ml的尖底离心管内，重新离心，离心完成后，用200微升加样枪吸取上清液，最后吸出沉淀物。此时，由于离心管较小，底较尖，细胞会非常集中，容易吸出。体腔液样本的制备（2）量多：离心后用吸管吸掉上清液，然后，用吸管吸取沉淀物上层细胞。（3）红细胞多的标本处理：离心后吸取上层沉淀物，放入酒精冰醋酸液（25%酒精95ml+5ml冰醋酸）内，打匀，再离心沉淀。然后，吸取沉淀物。体腔液样本的制备4、涂片：吸取沉淀物后，滴在载玻片上，可采用二张载玻片对拉法。吸取沉淀物涂片的关键：吸取沉淀物内不能带有水分。涂片的关键在于平整，均匀，不能太厚。当细胞太少时，涂片面积应以量为标准，范围尽可能小而集中，这样才不容易漏诊。然后立即放入95%酒精内固定。体腔液样本的制备剩下的送检液体不要立即倒去，等阅片完成后，根据诊断需要，决定是否需要再制片做免疫组化或做成组织块后再处理。（可放在冰箱内存放）谢谢！