综合创新开放实验室课题申请表.docx
综合创新开放实验室课题申请表题 目基于镀膜实验的抑菌性及毒性研究姓,名徐殂学.院竺可桢学院 专.业医学试验班八年制学 号指导教师陈水桥 浙江大学生物实验教学中心2016年9月一、基本信息课题名称基于镀膜实验的抑菌性及毒性研究课题组长徐现学号专业医学实验班八年制Email电话手机586171小 组 成 员姓名陆晨学号专业求是科学班（生物）姓名陈晟学号专业医学实验班八年制姓名谢燕萍学号专业求是科学班（生物医学）姓名王梵锦学号专业高分子材料与工程姓名邢航笛学号专业数学与应用数学指导教师姓名陈水桥单位手机摘要金属材料的热效应一直是物理及材料研究的关注点。本实验通过研究不同镀膜 材料作为保温杯内壁材料，对金属材料热效应的实际应用进行进一步探索。因为金 属离子可以通过多种机理影响生物的正常代谢与功能，故镀膜材料的安全性也是研 究的重点。木实验通过研究镀膜基质对菌落生长状况（主要是抑菌环的面积）的影 响，衡量不同的镀膜表面的抑菌性和生物毒性。因直接在圆柱状保温杯实际形态下， 进行试验存在一定的困难。故本实验通过改变承接膜材料基质形态，直接以玻片承 接膜材料进行试验。通过此方法来判断不同的保温杯内壁材料的安全与可使用性。关键词（用分号分开，最多5个）镀膜材料；抑菌性；生物毒性参加课题人数6本科生6硕士生博士生其他预期成果BA研究论文B研究报告C结题报告字数千字申请资助金额（单位：万元）课题完成时间2016年10月26 日2016年11月10日申请人（课题组长）签字指导老师同意签字二、立题依据与研究内容1、课题的立题依据。（研究意义、国内外研究现状及其应用前景。附主要参考文献目录）将物理实验的镀膜与生物研究联系在一起，探究保温杯镀膜的抗菌性及毒性2、课题的研究内容、研究目标，以及拟解决的关键问题。（此部分为重点阐述内容）（1）研究内容：基于镀膜的抑菌性及毒性分析（2）研究目标：探究保温杯镀膜除热效应外的生物方面的可行性（3）拟解决关键问题：保温杯镀膜的实用性3、拟采取的研究方案及可行性分析。（包括有关方法、技术路线、实验手段、关键 技术等说明）（1）有关方法通过研究镀膜材料直接作用于固体培养基的抑菌环大小和镀膜材料对液体培养 基中微生物的生长状况的影响，分别衡量镀膜的抑菌性和毒性。（2）技术路线应器毒相仪消应器毒相仪消养配 培基置悬制 菌液备菌测 抑性试性试 毒测（3）实验手段抑菌性测试将镀膜玻片和空白玻片分别放置于同一接种过的培养基表面，通过 比较抑菌环的大小，判断镀膜材料的抑菌性。毒性测试将镀膜玻片放入培养液中，培养一段时间后对实验组和对照组进行 梯度稀释，比较菌落数量和生长状况。（4）关键技术菌落培养梯度稀释4、课题的特色与创新之处。将生物自主实验与物理小课题有机地结合起来。进行对金属材料的实际应用的 进一步探究。5、研究计划。（1）培养基成分细菌培养基1000ml细菌培养基1000ml（固体培养基另加14. 00g琼脂）牛肉膏3. 00g蛋白陈10. 00g 氯化钠5. 00g加糖培养基1000ml（固体培养基另加14. 00g琼脂）牛肉膏3. 00g蛋白陈10. 00g 氯化钠5. 00g无水葡萄糖20. 00g（2）试验流程-制备菌悬液酵母菌准备已灭菌的斜面（加糖培养基2支）接种环灼烧灭菌后,在实验室保存的菌种斜面的管壁上冷却片刻,伸入斜面内刮 取半环菌,接入已灭菌的斜面上。斜面在30c的生化培养箱中培养48ho取出斜面,将接种环灼烧灭菌后,在管壁上冷却片刻，伸入斜面内刮取半环菌,接 入装有50ml已灭过菌的加糖培养基100ml三角瓶中，在全温振荡培养箱中培养48h, 温度 30,转速 100r/mino大肠杆菌准备已灭菌的斜面（细菌培养基2支）接种环灼烧灭菌后,在实验室保存的菌种斜面的管壁上冷却片刻,伸入斜面内刮 取半环菌,接入已灭菌的斜面上。斜面在37的生化培养箱中培养24ho取出斜面,将接种环灼烧灭菌后,在管壁上冷却片刻，伸入斜面内刮取半环菌,接 入装有50ml己灭过菌的细菌培养基的100ml三角瓶中，在全温振荡培养箱中培养 24h,温度 37,转速 120r/mino-抑菌性测试准备灭菌的固体加糖培养基和固体细菌培养基各3个，对每一个培养基进行如 下操作：吸取100 UL菌悬液，分散在900 uL灭菌后的生理盐水中，震荡摇匀取20u L菌悬液滴在固体培养基上，均匀涂覆至固体培养基表面干燥将镒子灭菌后，取灭菌的镀膜样品和空白玻片放于基两边。将固体细菌培养基 至于37恒温培养箱中培养24h以上，并于培养箱内放置少量水，控制湿度；将 固体加糖培养基至于30恒温培养箱中培养24h以上，并于培养箱内放置少量水, 控制湿度观察镀膜样品形成的抑菌环的大小，依次判断镀膜样品的抑菌性-毒性测试将镀膜样品放入装有50ml已灭过菌的加糖培养基100ml三角瓶中（3瓶）。接种 入50uL酵母菌后，至于30恒温摇床培养48h。将镀膜样品放入装有50ml已灭过菌的细菌培养基100ml三角瓶中（3瓶）。接种入50 R L细菌后，至于37恒温 摇床培养48ho梯度稀释大肠杆菌培养液（取100 PL培养后的细菌加入900 uL无菌生理盐 水，依次类推），取稀释倍数为10, 10工io"菌悬液20uL于固体细菌培养基上， 均匀涂覆至固体细菌培养基表面干燥，将固体细菌培养基至于37恒温培养箱中 培养24ho取出固体培养基观察菌落数。梯度稀释大肠杆菌培养液（取100 PL培养后的细菌加入900 uL无菌生理盐 水，依次类推），取稀释倍数为lO'lOKiov菌悬液20PL于固体加糖培养基上， 均匀涂覆至固体加糖培养基表面干燥，将固体加糖培养基至于30恒温培养箱中 培养24ho取出固体培养基观察菌落数。三、实验条件申请表（1）实验药品、试剂需量申请表（见表1）（2）实验玻璃器皿需求申领表（见表2）（3）实验器材需量申请/领表（见表3）（4）实验耗材需求申领表（见表4）（5）细胞培养实验耗材需求申领表（见表5）（6）实验仪器需求表（见表6）四、经费预算及意见经费开支科目经费预算金 额（元）材料、试剂费单价不超过500元耗材费单价不超过500元资料费单价不超过500元其他单价不超过500元合计单价不超过500元指 导 教 师 意 见创新开放实验室意见指导教师签字：年 月 日负责人签字：年 月 日生 物 实 验 中 心 意 见负责人签字:
