结直肠免疫进展.ppt
四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCU结直肠癌结直肠癌免疫检查点抑制剂的现状与前景免疫检查点抑制剂的现状与前景四川大学华西医院四川大学华西医院曹丹曹丹本资料仅代表个人观点，旨在促进学术信息的沟通和交流。处方请参考国家食品药品监督管理总局批准的药品说明书。仅供医疗卫生专业人士参考。P-AVS-2018.10-090ValidUntil2020.101四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCU声 明本资料仅代表个人观点，旨在促进学术信息的沟通和交流。处方请参考国家食品药品监督管理总局批准的药品说明书。仅供医疗卫生专业人士参考。2四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCU2015ASCO:开启开启mCRC免疫治疗免疫治疗2015ASCOLBA100.NEngJMed.2015Jun25;372(26):2509-20.3四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCU2017年年FDA相继批准相继批准pembrolizumab和和nivolumab用于经治的用于经治的dMMR/MSI-H的的mCRC4四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCU2017年年NCCN首次推荐首次推荐PD-1单抗单抗用于用于dMMR/MSI-H的的mCRC二线以后治疗二线以后治疗NCCN2017v1.05四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCUCheckMate-142:Nivolumab+低剂量低剂量Ipilimumab一线治疗一线治疗dMMR/MSI-H转移性结直肠癌显示出持久的临床获益转移性结直肠癌显示出持久的临床获益7四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCUResponseandDiseaseControl8四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCUProgression-FreeandOverallSurvival在研究数据截止时82%的肿瘤应答还在持续，74%的治疗应答超过6个月。9四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCU2018年年NCCNv.3加入加入ipilimumab+nivoluzumab作为作为dMMR/MSI-H的的mCRC一种可选的免疫治疗手段一种可选的免疫治疗手段NCCN2018v3.010四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCU小结：小结：mCRC免疫治疗现状免疫治疗现状临床应用：临床应用：二线以后应用二线以后应用单药或双免疫联合单药或双免疫联合dMMROnly疗效显著疗效显著遗憾：获益仅限于遗憾：获益仅限于dMMR/MSI-H少数人群！少数人群！临床意义：临床意义：晚期肠癌治疗上突破晚期肠癌治疗上突破免疫治疗在肠癌突破免疫治疗在肠癌突破精准免疫治疗捅破精准免疫治疗捅破FDANCCN：观念突破：观念突破11四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCU晚期大肠癌晚期大肠癌dMMR人群有多少？人群有多少？约约4%是个极少数人群是个极少数人群!12四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCUmCRC的免疫治疗：未来在哪里？的免疫治疗：未来在哪里？1.pMMR人群就这样放弃免疫治疗机会人群就这样放弃免疫治疗机会?2.dMMR病人锦上添花的策略是什么？病人锦上添花的策略是什么？3.BiomarkersbeyonddMMR？4.其他其他CPIs，再，再往前一步？（辅助？新辅助？）往前一步？（辅助？新辅助？）13四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCUmCRC的免疫治疗：未来在哪里？的免疫治疗：未来在哪里？1.pMMR人群免疫治疗机会人群免疫治疗机会探索探索2.dMMR病人锦上添花的策略是什么？病人锦上添花的策略是什么？3.BiomarkersbeyonddMMR？4.其他其他CPIs，再，再往前一步？（辅助？新辅助？）往前一步？（辅助？新辅助？）14四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCU单臂单臂主要终点：主要终点：PFS30例（例（dMMR=3，pMMR=22，MMR不明不明=5）CR=1,PR=15,14=SDPFS尚未达到尚未达到SafiShahda，2017ASCOAbs3541#2017ASCO:Pembrolizumab联合联合mFOLFOX6治疗进展期治疗进展期CRC的的II期临床研究期临床研究pMMR病人病人联合免疫化疗可能联合免疫化疗可能OK？15四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCU2017ASCO:PD-L1+CEA-TCB：增强：增强T细胞杀伤细胞杀伤2017ASCO:#300216四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCU结果：结果：PD-L1+CEA-TCB：2017ASCO:#300217四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCUMSSmCRC患者影像学评估患者影像学评估SegalNH,etal.2017ESMOAbstract403P.#403P18四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCUCombinedPD-1andCCR5（趋化因子受体）（趋化因子受体）InhibitionfortheTreatmentofRefractoryMSSmCRC(PICCASSO)https:/www.clinicaltrials.gov/CancerCell.2016Apr11;29(4):587-601.19四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCUmCRC的免疫治疗：未来在哪里？的免疫治疗：未来在哪里？1.pMMR人群就这样放弃免疫治疗机会人群就这样放弃免疫治疗机会?2.dMMR病人锦上添花的策略病人锦上添花的策略3.BiomarkersbeyonddMMR？4.其他其他CPIs，再，再往前一步？（辅助？新辅助？）往前一步？（辅助？新辅助？）20四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCUWallinJJ,etal.AACR,2016.VEGF-A诱导免疫抑制诱导免疫抑制NatRevClinoncol.2018May;15(5):325-340.抗抗VEGF：免疫抑制转化为免疫支持免疫抑制转化为免疫支持联合治疗：联合抗血管生成联合治疗：联合抗血管生成（2016AACR）21四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCU2017年美国胃肠道肿瘤研讨会：PD-L1单抗+贝伐单抗治疗MSI-H结直肠癌 l有效率达到有效率达到40%l疾病控制率达到疾病控制率达到90%l平均随访平均随访14.8个月，还未得到个月，还未得到PFS22四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCU在在clinicaltrials网站上搜索网站上搜索仅仅atezolizumabANDbevacizumab，一共，一共34项研究项研究23四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCU2018ASCO：更多免疫联合治疗尝试：更多免疫联合治疗尝试实体瘤（数十项，几乎不包含实体瘤（数十项，几乎不包含CRC）结直肠癌和卵巢癌结直肠癌和卵巢癌结果：卵巢癌有效，肠癌获益差结果：卵巢癌有效，肠癌获益差24四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCUmCRC的免疫治疗：未来在哪里？的免疫治疗：未来在哪里？1.pMMR人群就这样放弃免疫治疗机会人群就这样放弃免疫治疗机会?2.dMMR病人锦上添花的策略是什么？病人锦上添花的策略是什么？3.BiomarkersbeyonddMMR4.其他其他CPIs，再，再往前一步？（辅助？新辅助？）往前一步？（辅助？新辅助？）25四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCUPD-1/PD-L1表达？表达？肿瘤突变负荷肿瘤突变负荷(TMB)？POLE突变？突变？肿瘤局部免疫状态？肿瘤局部免疫状态？其它：其它：CMS分型？分型？IL-8？肠道菌群？肠道菌群？26四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCUPD-L1表达：不能筛选抗表达：不能筛选抗PD-1治疗治疗mCRC的获益人群的获益人群探索探索pembrolizumab在经所有标准治疗在经所有标准治疗失败的、肿瘤组织失败的、肿瘤组织PD-L1阳性表达阳性表达（1%细胞染色）的晚期实体肿瘤中的细胞染色）的晚期实体肿瘤中的疗效疗效33例难治性例难治性CRC病人中，疾病进展比例病人中，疾病进展比例高达高达69.6%仅仅1例对治疗有反应，但达到完全缓解，例对治疗有反应，但达到完全缓解，并且持续并且持续3年，年，这例唯一有反应的病人是这例唯一有反应的病人是dMMRKEYNOTE-028研究：研究：PD-L1表达探索表达探索2017Dec28;12(12):e0189848.BertH.ONeil，PLOSONE，December28,201727四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCUNEnglJMed.2017Dec21;377(25):2500-2501.大肠癌大肠癌dMMR病人病人TMB高，缓解率高高，缓解率高dMMR？TMB？谁是疗效标志物？谁是疗效标志物？SeminCancerBiol.2018Mar1.关于关于TMB28四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCUReliableDetectionofMismatchRepairDeficiencyinColorectalCancersUsingMutationalLoadinNext-GenerationSequencingPanels224例结直肠癌，二代测序方法：检测肿瘤组织例结直肠癌，二代测序方法：检测肿瘤组织MMR结果：结果：突变数突变数20的的193例，例，全部为全部为pMMR突变数突变数20的的31例，例，其中其中28例为例为dMMR剩余剩余3例患者：突变数均例患者：突变数均150与与dMMR不同，是不同，是POLE突变的肿瘤突变的肿瘤JClinOncol.2016Jun20;34(18):2141-7.dMMR？TMB？谁是疗效标志物？谁是疗效标志物？29四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCU在在6517名结直肠癌患者名结直肠癌患者中，有中，有66名（名（1.0%）患）患者为体细胞者为体细胞POLE突变突变POLE突变的结直肠癌表突变的结直肠癌表现出现出CD8+淋巴细胞浸润淋巴细胞浸润增加，增加，T细胞毒素标志物细胞毒素标志物表达增加表达增加LancetGastroenterolhepatol.2016Nov;1(3):207-216.关于关于POLE突变结直肠癌：免疫治疗疗效如何？突变结直肠癌：免疫治疗疗效如何？30四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCU81岁男性，右半结肠岁男性，右半结肠术后术后pT3N0M0术后术后3年复发，基因检年复发，基因检测：测：MSS化疗后化疗后PD再次基因检测：为高再次基因检测：为高突变肿瘤类型，突变突变肿瘤类型，突变负荷达到负荷达到122/Mb，同，同时发现了时发现了POLE突变。突变。pembrolizumab治疗，治疗，CT显示肿瘤明显缩小。显示肿瘤明显缩小。并表现出持续临床获并表现出持续临床获益益JNatlComprCancNetw.2017Feb;15(2):142-147.CASEREPORT：POLE突变的结直肠癌对突变的结直肠癌对CPI疗效疗效Pembrolizumab治疗前治疗前3周期后周期后6周期后周期后31四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCU研究者对该患者复发的肿瘤进行了免疫组化分析研究者对该患者复发的肿瘤进行了免疫组化分析结果：大比例的结果：大比例的CD8+肿瘤浸润淋巴细胞，其中超过肿瘤浸润淋巴细胞，其中超过90%为为PD-1+。另外超过另外超过99%的的PD-L1表达出现在非肿瘤细胞里，尤其是与表达出现在非肿瘤细胞里，尤其是与CD8+淋淋巴浸润细胞邻近的肿瘤微环境中。巴浸润细胞邻近的肿瘤微环境中。JNatlComprCancNetw.2017Feb;15(2):142-147.红色：红色：CD8+TILs蓝绿色：蓝绿色：PD-1表达表达绿色：绿色：PD-L1表达表达高突变负荷！高突变负荷！大量免疫细胞大量免疫细胞浸润！浸润！PDL1高表达！高表达！关系错综复杂关系错综复杂谁是标志物？谁是标志物？组合拳？组合拳？CASEREPORT：POLE突变的结直肠癌对突变的结直肠癌对CPI疗效疗效32四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCU小结：小结：疗效预测标志物探索在路上疗效预测标志物探索在路上-TMB似乎更是疗效预测标志物！？似乎更是疗效预测标志物！？检测技术检测技术、检测平台检测平台规范，规范，截断值截断值不明确不明确组织获取问题组织获取问题临床应用受限临床应用受限TMB困境困境外周血检（外周血检（bTMB)是否可行？是否可行？33四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCUSlide22PresentedByKurtSchalperat2018ASCOAnnualMeeting2018ASCO肺癌：外周血检（肺癌：外周血检（bTMB)34四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCU免疫评分（免疫评分（Immunoscore,IS）Prof.Galon基于肿瘤中心（基于肿瘤中心（CT）和侵袭边缘（）和侵袭边缘（IM）中，）中，CD8+和和CD45RO+细胞密度建立了细胞密度建立了IS，5个等级个等级（04）JTranslMed.2012Oct3;10:205.35四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCUComphrehensiveIntrametastaticImmuneQuantificationandMajorImpactofImmunoscoreonSurvivalJNatlCancerInst.2018Jan1;110(1).接受根治术的接受根治术的mCRC患者，转移灶患者，转移灶IS和和T/B细胞评分与细胞评分与DFS和和OS的关系的关系36四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCUJNatlCancerInst.2018Jan1;110(1).结果：结果：免疫评分与免疫评分与mCRC预后相关预后相关一项在免疫评分高一项在免疫评分高mCRC中中评价化疗联合评价化疗联合pembrolizumab疗效的研究即将开展疗效的研究即将开展（POCHI研究）研究）ComphrehensiveIntrametastaticImmuneQuantificationandMajorImpactofImmunoscoreonSurvival37四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCU肠癌肠癌CMS分型分型免疫表型免疫表型修饰修饰肿瘤微环肿瘤微环境构成境构成蓝色：蓝色：TILs红色：成纤维细胞红色：成纤维细胞功能导向功能导向免疫浸润免疫浸润CMS1型：免疫治疗潜在获型：免疫治疗潜在获益人群益人群CMS2型和型和CMS3型：缺乏型：缺乏免疫源性免疫源性CMS4型：塑造型：塑造TME，使，使其转变为其转变为CMS1-like免疫微免疫微环境环境IntJMolSci.2017Oct24;18(10).pii:E2229.38四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCUSlide24PresentedByKurtSchalperat2018ASCOabstract3025IL-8水平水平：可能是免疫治疗疗效标志物：可能是免疫治疗疗效标志物2018ASCO探索：尽管非肠癌，提示探索方向探索：尽管非肠癌，提示探索方向39四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCUSlide25PresentedByKurtSchalperat2018ASCOAnnualMeeting40四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCU肠道菌群：影响上皮性肿瘤对肠道菌群：影响上皮性肿瘤对PD-1治疗的疗效治疗的疗效在上皮性肿瘤患者（在上皮性肿瘤患者（n=249，其中非小细，其中非小细胞肺癌胞肺癌140例，肾癌例，肾癌67例，泌尿道上皮肿瘤例，泌尿道上皮肿瘤42例）中，联合应用抗生素和免疫治疗缩例）中，联合应用抗生素和免疫治疗缩短短OS和和PFS！Science.2018Jan5;359(6371):91-97.41四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCUScience.2018Jan5;359(6371):97-103.研究来自研究来自MD.Anderson癌症中心癌症中心分析了接受抗分析了接受抗PD-1治疗的恶性黑色素治疗的恶性黑色素瘤患者的粪便和口腔拭子样品。瘤患者的粪便和口腔拭子样品。其中其中30例患者对免疫治疗有反应，另外例患者对免疫治疗有反应，另外13例患者无反应。例患者无反应。结果发现：结果发现：具有中度肠道细菌多样性的患者和那些具有中度肠道细菌多样性的患者和那些具有较低肠道细菌多样性的患者都已达具有较低肠道细菌多样性的患者都已达到中位无进展生存期，分别为到中位无进展生存期，分别为232天和天和188天；天；而具有更高的肠道细菌多样性的患者并而具有更高的肠道细菌多样性的患者并未达到中位无进展生存期。未达到中位无进展生存期。42四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCU2018ASCOPoster#224对应用对应用CPIs治疗多种实体瘤（恶治疗多种实体瘤（恶黑、肾癌和非小细胞肺癌）的数据黑、肾癌和非小细胞肺癌）的数据进行回顾性分析进行回顾性分析发现：发现：CPIs治疗前治疗前2周或后周或后6周应用周应用抗生素的患者抗生素的患者PFS和和OS更短更短治疗前使用抗生素相对于治治疗前使用抗生素相对于治疗后使用还要更差疗后使用还要更差43四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCU可能机制研究：肠道微生物能调节可能机制研究：肠道微生物能调节T细胞迁移细胞迁移Gut.2018Feb6.pii:gutjnl-2016-313498.接种结肠癌细胞的盲肠原位移植瘤模接种结肠癌细胞的盲肠原位移植瘤模型中一些趋化因子表达量明显升高，型中一些趋化因子表达量明显升高，并且应用广谱抗生素可以降低趋化因并且应用广谱抗生素可以降低趋化因子的表达，提示肠道共生细菌是诱导子的表达，提示肠道共生细菌是诱导趋化因子产生的主要因素（图趋化因子产生的主要因素（图A）。）。将源于将源于CRC的的CD4+和和CD8+TILs过继过继转移到荷瘤小鼠体内，并评估它们对转移到荷瘤小鼠体内，并评估它们对肿瘤的归巢。结果发现肿瘤的归巢。结果发现TILs迁移至盲迁移至盲肠原位移植瘤明显多于腹腔移植瘤，肠原位移植瘤明显多于腹腔移植瘤，提示肠道微生物能够提高肿瘤对于提示肠道微生物能够提高肿瘤对于T细胞的募集（图细胞的募集（图B,C）。）。44四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCUmCRC的免疫治疗：未来在哪里？的免疫治疗：未来在哪里？1.pMMR人群就这样放弃免疫治疗机会人群就这样放弃免疫治疗机会?2.dMMR病人锦上添花的策略是什么？病人锦上添花的策略是什么？3.BiomarkersbeyonddMMR？4.其他其他CPIs，再往前一步？（辅助？新辅助？），再往前一步？（辅助？新辅助？）45四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCU激活受体激活受体T细胞抗肿瘤活性细胞抗肿瘤活性激动型单抗激动型单抗Nature.2011;480(7378):480-9.免疫检查点免疫检查点抑制受体抑制受体”免疫检查点免疫检查点”阻断型单抗阻断型单抗46四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCU目前有多项目前有多项包含多种实体瘤包含多种实体瘤期临床试验期临床试验旨在探索抗旨在探索抗TIM-3、LAG-3抗体抗体单药或单药或与与PD-1抑制剂抑制剂联合方案的有效性。联合方案的有效性。www.ClinicalTrials.gov47四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCUwww.ClinicalTrials.gov48四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCU新辅助治疗指日可待？新辅助治疗指日可待？NICHE研究：研究：Nivolumab+Ipilimumab在早期结直肠癌新辅助治疗49四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCUNICHE研究：研究：7例例dMMR患者均到缓解标准，其中患者均到缓解标准，其中4例为例为pCRpMMR患者几乎没出现病例应答，残留癌细胞患者几乎没出现病例应答，残留癌细胞85%以上以上50四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCUNICHE研究：所有患者对术前免疫治疗耐受行良好，未影响手术研究：所有患者对术前免疫治疗耐受行良好，未影响手术51四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCUNICHE研究结论研究结论1.术前短期治疗是安全的，并使7/7 dMMR肿瘤获得重大病理缓解。2.我们的数据显示：肿瘤炎症的预处理措施不能预测应答l pMMR和dMMR治疗后均导致了肿瘤中T细胞浸润增加3.我们的数据确保了新辅助免疫疗法可以独立验证在大型的dMMR肿瘤试验中。52四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCU总结与思考总结与思考1.免疫治疗在黑色素瘤、肺癌大放异彩；免疫治疗在黑色素瘤、肺癌大放异彩；2.CRC正在跟进；正在跟进；3.获益人群筛选、预测标志物寻找是困扰获益人群筛选、预测标志物寻找是困扰CRC免疫检查点治疗主要瓶颈；免疫检查点治疗主要瓶颈；4.数据愈来愈多数据愈来愈多走入一线治疗走入一线治疗、新辅助、新辅助治疗指日可待？！治疗指日可待？！53四川大学四川大学华西医院肿瘤中心华西医院肿瘤中心CancerCenter,WestChinaHospital,SCU谢谢聆听！54
