胃癌组织蛋白表达 进展期胃癌组织中EGFR和PI3K的表达及相关性.docx
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1、胃癌组织蛋白表达 进展期胃癌组织中EGFR和PI3K的表达及相关性 【摘要】 目的 探讨EGFR和PI3K表达的相关性,以及与进展期胃癌临床病理的关系。方法 采纳免疫组织化学法检测68例进展期胃癌组织EGFR和PI3K的表达状况,并分析其与胃癌临床病理的关系。结果 EGFR表达阳性率为5882%(40/68),与淋巴结转移、远处转移及临床TNM分期有关(P60岁21例。男45例,女23例,男女比例196 1。按WHO分类标准高分化腺癌19例,中低分化腺癌49例。有淋巴结转移46例,无淋巴结转移22例。根据AJCC(第7版)胃癌分期系统,期22例,期30例,期16例。并选择同期胃溃疡病例正常胃切
2、除标本15例作为比照组。标本取材大小05 cm10 cm05 cm,组织标本用10%甲醛固定。全部患者术前均未接受放化疗。12 试剂与方法 EGFR鼠源性人单克隆抗体和PI3K鼠源性人单克隆抗体由福州迈新生物技术公司供应。采纳免疫组织化学SABC法,详细操作步骤如下:石蜡切片逐级脱蜡至水,3%H2O2封闭内源性过氧化物酶10 min,高温高压热修复,2%牛血清封闭20 min,滴加一抗(EGFR稀释浓度为1 101;PI3K稀释浓度为1 50),湿盒内4冰箱孵育过夜后滴加二抗,室温20 min,滴加辣根酶标记的链霉素,DAB显色,脱水,透亮,封片。结果判定后再进行苏木素复染细胞核。以磷酸盐缓冲
3、液(PBS)替代第一抗体作为阴性比照。13 评定标准 由两位有临床阅历的病理科医生对免疫组化结果进行判读。EGFR和PI3K阳性染色均为淡黄色、棕黄色或棕褐色,定位于细胞质或细胞膜。采纳二级计分法,依据细胞染色程度分类:无着色为0分,淡黄色为1分,黄或棕黄色为2分,棕褐色为3分;依据阳性细胞所占5个以上高倍视野比例计数分为5类:5%以下为0分,6%25%为1分,26%50%为2分,51%75%为3分,76%以上为4分。依据二者乘积推断阳性等级:0分为阴性(),14分为弱阳性(+),58分为中度阳性(+),912分为强阳性(+)。14 统计学方法 全部数据均采纳SPSS 130统计软件处理,样本
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