外泌体参考幻灯片.pptx

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1、,什么是外泌体,外,泌,体,Exosome,外泌体,(,Exosomes,),是细胞经过,内吞-融合-外排,等一系列调控过程而形成的直径在30100,nm,的,圆形单层膜结构的细胞外小囊泡。,可以改变细胞微环境、诱导、转染靶细胞。,怎么形成的：,看图,2020-08-26,2,Microvesicles,CCV,Exosomes,Early,MVE,2020-08-2,6,2,MVE,Lysosome,联川生物,Endosome,为什么研究外泌体,外泌体包含什么:,胞内蛋白、多种,mRNA,、,酶等，由于,来源不同有,其,特异性,。,这些内含物有什么作用：,RNA,是,遗传物质,!,酶,促,进

2、,代谢反应,!,蛋,白,多了去了、,外泌体特性：,外泌体囊泡上也有特异的细胞结合位点，可以,与细胞膜相融合将囊泡,内的物质转运进靶细胞。,2020-08-26,3,外泌体的应用方向,诊断：,肿瘤诊断：,不同器官,的外泌体中的,mRNA,可以辨别,癌症信息。,不需要创伤做组织切片、比较早期等。,婴儿性别鉴别：男/女,内脏疾病诊断：不同器官的不同疾病一半都,会有,特异的外泌体分泌，外,泌体内会含有不同浓度的,蛋白。可以通过判断蛋白的有无、多少来辨别疾,病。,2020-08-26,4,外泌体的应用方向,治疗：,靶向疫苗：改变细胞的,遗传物质，,引发凋,亡等。,定向药物释放：可以通过外泌体将,大分子,

3、直接融入细胞。,微环境改变：改变细胞的微环境,2020-08-26,5,谁在研究,肿瘤：,免疫：,干细胞：,细,胞,通,讯,：,以前研究微泡体的：,心血管类的：,内,分,泌,：,医学!,天津有什么医学相关实验室和大学?,2020-08-26,6,由此可见、目前主要,的分离方法还是离心,分离。另外就是免疫,沉淀试剂盒。,离心法主要是三种：,1、超速离心法,2、密度梯度离心法,3、离心过滤,多选投票(最多可选2项),共,有54人参与投票,1.,超速离心法,2,.,8,2%,(2),6,.,SBI,沉淀试剂盒,外泌体分离方法,沉淀试剂盒,bio,试剂盒,7,.,Life,8,.101,2020-08

4、-26,1,8,.31%(13),7,分离方法比较,超速离心法：,通,过不同离心力，使组分按照先后顺序分,离出来。,费时间、回收率不稳定，,2020-08-26,8,等密度梯度离心：,各密度梯度层可以将样品中的不同种类的,组分分布在不同层。外泌体一般,在1.13-,1.19g/ml,的浓度范围富集。,纯度高，但是不足繁琐、,耗时。,2020-08-26,9,2020-08-26,10,外泌体研究所需其他设备,细胞：培养、计数、电镜等。,s mRNA:PCR,、,电 泳、,测序设备,等。,蛋白：免疫学(电泳)、液相、紫外等。,通用设备：,移液器,、二碳箱、超低温、,天,平,、超,滤等。,2020-08-26,11,