抗核抗体检测及临床意义ppt课件.ppt

《抗核抗体检测及临床意义ppt课件.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《抗核抗体检测及临床意义ppt课件.ppt（25页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、自身抗体定义自身抗体定义 自身抗体自身抗体是指针对自身组织，器官、细胞及细胞成分的抗体。正常的免疫反应有保护性防御作用，对自身组织、成分不发生反应。旦自身耐受的完整性遭到破坏，则机体视自身组织、成分为“异物”，而发生自身免疫反应，产生自身抗体。正常人体血液中可以有低滴度的自身抗体，但不会发生疾病，但如果自身抗体的滴度超过某水平，就可能对身体产生损伤，诱发疾病。自身免疫性疾病相关自身抗体自身免疫性疾病相关自身抗体抗核抗体谱（抗核抗体谱（ANAsANAs）类风湿关节炎相关抗体类风湿关节炎相关抗体(RF, (RF, 抗抗CCPCCP等等) )抗中性粒细胞胞浆抗体（抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCAANC

2、A）抗自身免疫性肌炎谱抗自身免疫性肌炎谱自身免疫性肝病相关抗体谱自身免疫性肝病相关抗体谱抗磷脂抗体谱抗磷脂抗体谱抗核抗体谱（抗核抗体谱（ANAs）ANAsANAs抗核不溶成分抗核不溶成分抗核可溶成分抗核可溶成分（抗（抗ENA）抗染色体抗染色体DNADNA蛋白蛋白抗核仁抗体抗核仁抗体 抗抗DNADNA抗体抗体 抗核小体抗体抗核小体抗体 抗组蛋白抗组蛋白 H1,H2A, H2B, H3,H4 抗抗Sm,USm,U1 1RNP,SSA,SSBRNP,SSA,SSB抗抗Scl-70,Jo-1Scl-70,Jo-1,PM-1,PM-1抗抗rRNPrRNP,PCNA,PCNA. .dsDNAdsDNAss

3、DNAssDNA抗着丝点抗体抗着丝点抗体（ACA)ACA)抗抗5sRNA5sRNA ANA是一类能与多种细胞核抗原反应的自身抗体，许多自身免疫性疾病都可以出现阳性。如系统性红斑性狼疮(SLE)、混合结缔组织病（MTCD）、干燥症(SS）、全身性硬皮症(PSS）。ANA测定在许多胶原病病人均可呈阳性，需进一步作抗DNA抗体和抗ENA抗体测定鉴别。抗核抗体(ANA)抗双链DNA抗体（抗ds-DNA抗体） 脱氧核糖核酸分为双链DNA（dsDNA）和单链DNA（ssDNA）两种。 针对前者的自身抗体为系统性红斑狼疮的标记性抗体，而后者则见于多种风湿性疾病。 抗核提取物抗体，是抗小分子细胞核核糖核蛋白（

4、snRNPs）和小分子细胞浆核糖核蛋白（scRNPs）的自身抗体，不含组蛋白。包括：抗nRNP抗体、抗Sm抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体、抗Scl-70抗体、抗Jo-1抗体等。对诊断和鉴别诊断有重要意义，与疾病严重程度和活动性无明显相关。 抗ENA抗体抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA） 靶抗原为丝氨酸蛋白酶PR3、MPO等，是系统性血管炎的血清标记物。ANCA主要表现两种核型：胞浆型（c-ANCA）：主要与韦格氏肉芽肿血管炎有关；核周型（p-ANCA）主要见于血管炎、Churg-Strass综合症和少免疫沉积型节段坏死性肾小球肾炎和新月体肾炎。ANAANA检测方法检测方法-IIF-IIF法法A

5、NAANA滴度滴度ANAANA核型核型荧光显微镜下荧光显微镜下ANAANA的染色型别的染色型别 均质型均质型 颗粒型颗粒型核膜型核膜型核仁型核仁型着丝点型着丝点型胞浆型胞浆型混合型等混合型等核均质型核粗颗粒型HEp-2：间期细胞核呈：间期细胞核呈颗粒样荧光，核仁阴性；颗粒样荧光，核仁阴性；分裂期细胞浓缩染色体分裂期细胞浓缩染色体阴性，染色体周围呈颗阴性，染色体周围呈颗粒样荧光粒样荧光肝片：肝细胞核呈颗粒样肝片：肝细胞核呈颗粒样荧光。核仁阴性；荧光强荧光。核仁阴性；荧光强度与度与HEp-2基本一致基本一致靶抗原：靶抗原：nRNP、Sm核膜型抗抗dsDNA检测方法检测方法以以短膜虫短膜虫或或马疫锥

6、虫马疫锥虫为底物的间接免疫荧光法为底物的间接免疫荧光法(IIF) 短膜虫或马疫锥虫的动基体短膜虫或马疫锥虫的动基体 内含有内含有天然纯天然纯dsDNA，未经，未经 人工处理，不含人工处理，不含组蛋白与组蛋白与 ssDNA，抗原性纯一特异。抗原性纯一特异。优点：优点：特异性好特异性好 抗抗dsDNAdsDNA抗体临床意义抗体临床意义SLE 的血清特异性抗体的血清特异性抗体多有致病性（多有致病性（IgG型），与亲和力（高）有关型），与亲和力（高）有关与与LN（狼疮肾炎）和（狼疮肾炎）和SLE疾病活动性相关，活动期达疾病活动性相关，活动期达90 可用于可用于SLE 疾病活动期判断药物疗效观察疾病活动

7、期判断药物疗效观察与与SLE急性皮疹急性皮疹、血管炎、浆膜腔炎、白细胞减少等有关、血管炎、浆膜腔炎、白细胞减少等有关抗抗ENAENA抗体抗体 extractable nuclear antigen 可提取性核抗原可提取性核抗原成分：成分：核酸与核蛋白，不含染色质成分核酸与核蛋白，不含染色质成分功能：参与细胞内功能：参与细胞内DNA复制、复制、RNA转录、蛋白翻译转录、蛋白翻译 合成合成来源：无种属差异，有组织不均一性来源：无种属差异，有组织不均一性理化特性：对理化特性：对温度温度和和RNA酶酶敏感敏感（U1RNP、SS-A）意义：抗意义：抗ENA抗体是抗体是ANAs中中范围最广范围最广、最为重

8、要最为重要的的 一簇抗体，与一簇抗体，与疾病活动性大多无相关疾病活动性大多无相关 抗抗ENAENA抗体检测方法抗体检测方法免疫双扩散法免疫双扩散法(ID)对流免疫电泳法对流免疫电泳法( CIE)免疫印迹法免疫印迹法(IBT)酶联免疫吸附法酶联免疫吸附法(ELISA)蛋白芯片（蛋白芯片（Protein chip）38KD29KD28KD16.5KD15KD13.5KD无 风 湿 病 相 关 抗 体SmR id、抗 体 阳 性红 斑 狼 疮 病 人 血 清86KD73KD60KD52KD45KD38KD32KD29KD28KD17.5KD16.5KD15KD13.5KD抗抗RNPRNP抗体抗体 高

9、达50%的SLE病人和95%的MCTD病人血清中可检测到此抗体，典型的MCTD病人血清中可检测到高滴度的针对Sm/RNP免疫复合物的抗-RNP抗体，而往往检测不到抗-Sm抗体。抗抗SmSm抗体抗体 30%的SLE病人可检测到抗-Sm抗体，在肾炎病人和某些中枢神经严重损伤的病人也可检测到。抗抗SSASSA抗体抗体 在SLE、风湿性关节炎（RA）、干燥综合症病人血清中常常可以检测到SS-A抗体，此外在硬皮病、新生儿红斑性狼疮（NLE）病人也可检测到。抗抗SSBSSB抗体抗体 在SLE、风湿性关节炎(RA）、干燥综合症病人血清中常常可以检测到SS-B抗体，在硬皮病、新生儿红斑性狼疮（NLE）病人也可

10、检测到。SS-B抗体一般与SS-A抗体同时出现。若病人血清中可检测到SS-A抗体而不伴有SS-B抗体的出现，此病人继发肾炎的风险较大。抗抗Jo-1Jo-1抗体抗体 20-30%的多发性肌炎/皮肌炎，30-40%的多发性肌炎患者和高达60%的多发性肌炎伴有间质性肺疾病患者血清中可检测到抗-Jo-1抗体。其它胶原性疾病中很少检出此抗体。抗抗ScL-70ScL-70抗体抗体靶抗原：靶抗原：DNADNA拓朴异构酶拓朴异构酶I I的降解产物的降解产物 主要存在主要存在核仁核仁中中40%40%的硬皮病和的硬皮病和20-3020-30%的全身性硬皮病患者的全身性硬皮病患者中可检测到此抗体，很少在其它自身风湿性中可检测到此抗体，很少在其它自身风湿性疾病中出现。疾病中出现。