2022禽病综合实习报告.docx
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1、2022禽病综合实习报告 禽病综合实习报告1试验目的1.1熟识对禽的病理解剖1.2驾驭对病变的视察1.3鸡胚的病毒液接种1.4驾驭HA和HI试验操作过程和技术2.鸡的人工发病试验21日龄三黄鸡14只,每只鸡肌肉注射0.5mL未知病原悬液(约100EID50),每天上午9:00、下午5:00各视察一次,记录鸡的采食状况、精神状况、有无发病症状、有无死亡。如有死亡,对死亡鸡进行剖检,采肝脏、脾脏等病料,将病料暂存于-20C冰箱中。视察可知病鸡精神沉郁,鼻有分泌液,常甩头,无下痢,无死亡。3家禽解剖3.1放血、宰杀后,用消毒药进行浸泡。3.2腿内侧剪开,用力将股骨外翻,将鸡平放在解剖托盘内。3.3腹
2、腔,肝脏出血肿胀,肠道出血,胰腺、肾脏、法氏囊、盲肠扁桃体等有无病变或异样,剪开腺胃和肌胃,视察腺胃乳头和肌胃角质膜下无出血。将龙骨突用力上翻,视察肺脏、支气管等,外观没有病变,沿食道、气管剪开,发觉气管内有大量出血点。4试验原诊断4.1接种物打算4.1.1将肺脏、脾脏、肾脏、肝脏、心脏、支气管等脏器物小许,放入灭菌钵中。加入少许石英砂,进行研磨,边研磨边加入PBS进行稀释。4.1.2抽取组织液装入离心管3000r/min,离心5分钟。4.1.3用注射器抽取离心上清液,装上细菌过滤器,将组织液过滤到灭菌离心管中。4.2胚蛋接种4.2.1将胚蛋在经照蛋器照蛋,避开气室和血管,用铅笔进行标注。4.
3、2.2打孔。4.2.3每个鸡胚接种0.2mL组织液。4.2.4用蜡烛进行封口。存放2天。4.3鸡胚接种结果两天后打开鸡胚气室和尿囊膜,胚内液体清亮。5血凝(HA)试验5.1材料打算5.1.196孔V型微量反应板、微量移液器(配有滴头)5.1.2阿氏液、1%鸡红细胞悬液。5.1.3PH7.20.01mol/LPBS.5.2血凝(HA)试验5.2.1在微量反应板的1孔12孔均加入0.025mlPBS,换滴头。5.2.2吸取0.025ml病毒悬液加入第1孔,混匀。5.2.3从第1孔吸取0.025ml病毒液加入第2孔,混匀后吸取0.025ml病毒液加入第3孔,如此进行对倍稀释至第11孔,从第11孔吸取
4、0.025ml弃之,换滴头。5.2.4每孔加入0.025ml体积分数为1%鸡红细胞悬液(将鸡红细胞悬液充分摇匀后加入)5.2.5震荡混匀,在室温(2025)下静置40min后视察结果(假如温度太高,可置4环境下),比照孔红细胞将呈明显的钮扣状沉到孔底。5.3结果判定将板倾斜,视察红细胞有无呈泪滴状流淌,完全凝集(不流淌)的抗原或病毒最高稀释倍数代表一个血凝单位(HAU).5.4试验结果孔号血清稀释度结果-1:21:41:81:161:321:641:1281:2561:5121:10241:2048照123456789101112对从结果可以看出,该病毒的不能血凝。6试验结果通过血凝试验和血凝
5、抑制试验的血凝价等因素可以判定该鸡感染的病毒没有血凝效应,怀疑传染性支气管炎。7.PCR试验:7.1PCR试剂打算DNA模板、对应目的基因的特异引物、10*PCRBuffer、Tap酶、2mMdNTPmix:dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM7.2操作步骤在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。10*PCRbuffer5LdNTPmix(2mM)4L引物1(10pM)2L引物2(10pM)2LTap酶(2U/L)1LDNA模板(50ng-g/l)1L加ddH2O至50L视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,马上置PCR仪上,执
6、行扩增。一般:在93C预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93C40s58C30s72C60s,循环30-35次,最终在72C保温7min。结束反应,PCR产物放置于4C待电泳检测或-20C长期保存。PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,须要100L氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,干脆取5-10L电泳检测。7.3PCR结果PCR结果显示该病毒为传染性支气管炎病毒。8体会8.1通过本次试验,更进一步熟识并驾驭了血凝试验和血凝抑制试验的基本原理和详细操作步骤,以及对血凝和血凝抑制试验结果的判定,同时大体驾驭了如何对病死鸡所感染病毒的判定。8.2通过该综合实习,我们从攻毒到病鸡的剖
7、检,再依据剖检症状基本上判定是什么病毒或细菌的感染,继而选择各种试验室检测方法,鉴定病原。熟识了禽病学常见的病理检查和常见的血清学检测方法,在操作过程中的实际操作让自己更加的联系到了课本理论学问,达到了真正的学以致用之目的。8.3在试验过程中进一步熟识了对禽类的病理解剖和视察鉴别以及试验室常见的诊断方法要领,在试验中更紧密的联系到了理论学问,使自己在驾驭实践操作的同时更深化理解了其理论学问。8.4在本次试验中还是发觉了自己存在一些不足,操作实力和操作方法不够恰当和娴熟,在以后的实践操作中药更加的注意动手实力和分析实际问题,从而解决实际问题。9.惠州鸡场参观感受12月11日,禽病学老师组织我们去
8、惠州鸡场参观实习。参观期间场长跟我们叙述了鸡场的选址以及布局所须要留意的状况。1场址的选择选择场址应以便利生产经营、便利交通,防疫条件好,投资低为原则。1.1地理条件:养鸡场场址应选择地势高燥,排水良好且向阳背风的地方;水源水质符合要求,因其关系着生产生活用水以及建筑施工用水。1.2环境条件:供水:鸡场一般距城市较远,假如没有自来水公司供水,可以自己打井、修水塔以保证本鸡场供水,而且要考虑到供电和交通的状况;2.禽舍的布局2.1鸡场分区的原则是:各种房舍和设施的分区规划要从便于防疫和组织生产动身。首先应考虑爱护人的工作和生活环境,尽量使其不受饲料粉尘、粪便、气味等污染;其次要留意生产鸡群的防疫
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