第四章啤酒发酵课件.ppt
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1、第四章第四章 啤酒发酵啤酒发酵4-1啤酒酵母啤酒酵母1一、啤酒酵母的类型和种类l发酵类型:发酵类型: 上面酵母上面酵母l 下面酵母下面酵母l凝聚性:凝聚性: 凝聚性酵母凝聚性酵母l 粉状酵母。粉状酵母。2上面酵母与下面酵母主要区别上面酵母与下面酵母主要区别3凝聚性酵母与粉状酵母的区别凝聚性酵母与粉状酵母的区别4l我国几乎全部采用下面酵母发酵啤酒。我国几乎全部采用下面酵母发酵啤酒。5二、啤酒酵母的主要特性要求二、啤酒酵母的主要特性要求l对啤酒酵母的基本要求是:发酵力高,凝对啤酒酵母的基本要求是:发酵力高,凝聚力强、沉降缓慢而彻底,繁殖能力适当,生聚力强、沉降缓慢而彻底,繁殖能力适当,生理性能稳定
2、,酿制出的啤酒风味好。理性能稳定,酿制出的啤酒风味好。6啤酒酵母的主要特性要求啤酒酵母的主要特性要求l1.细胞和菌落形态细胞和菌落形态 不同菌株的啤酒酵母其形态不同。优良健壮不同菌株的啤酒酵母其形态不同。优良健壮的啤酒酵母细胞,具有均匀的形状和大小,平的啤酒酵母细胞,具有均匀的形状和大小,平滑而薄的细胞膜,细胞质透明均一。滑而薄的细胞膜,细胞质透明均一。啤酒酵母在麦芽汁固体培养基上菌落呈乳啤酒酵母在麦芽汁固体培养基上菌落呈乳白色至微黄褐色,表面光滑但无光泽,边缘整白色至微黄褐色,表面光滑但无光泽,边缘整齐或呈波状。齐或呈波状。72.主要的生理特性要求主要的生理特性要求 (1)凝聚性凝聚性不同,
3、酵母的沉降速度不同,发凝聚性凝聚性不同,酵母的沉降速度不同,发酵度也有差异。酵度也有差异。(2)发酵度反应酵母对麦芽汁中各种糖的利用情况,发酵度反应酵母对麦芽汁中各种糖的利用情况,正常的啤酒酵母能发酵葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖和正常的啤酒酵母能发酵葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖和麦芽三糖等。一般啤酒酵母的真正发酵度应为麦芽三糖等。一般啤酒酵母的真正发酵度应为5068左右。左右。(3)死灭温度是指一定时间内使酵母死灭的最低温死灭温度是指一定时间内使酵母死灭的最低温度,可作为鉴别菌株的内容之一。一般啤酒酵母的死灭度,可作为鉴别菌株的内容之一。一般啤酒酵母的死灭温度在温度在5253,若死灭温度增高,则说
4、明酵母变异,若死灭温度增高,则说明酵母变异或污染野生酵母。或污染野生酵母。(4)产孢能力一般啤酒酵母生产菌种都不能产生)产孢能力一般啤酒酵母生产菌种都不能产生孢子或产孢能力极弱,而某些野生酵母能很好产孢。根孢子或产孢能力极弱,而某些野生酵母能很好产孢。根据此特性,可判别啤酒酵母是否混入野生酵母。据此特性,可判别啤酒酵母是否混入野生酵母。 8啤酒酵母与野生酵母的主要区别啤酒酵母与野生酵母的主要区别9三、啤酒酵母扩大培养三、啤酒酵母扩大培养l啤酒酵母扩大培养是指从斜面种子啤酒酵母扩大培养是指从斜面种子到生产所用的种子的培养过程,这一过到生产所用的种子的培养过程,这一过程又分为实验室扩大培养阶段和生
5、产现程又分为实验室扩大培养阶段和生产现场扩大培养阶段。场扩大培养阶段。101.实验室扩大培养阶段实验室扩大培养阶段(1)斜面试管)斜面试管 一般为工厂自己保藏的纯粹原菌或由科一般为工厂自己保藏的纯粹原菌或由科研机构和菌种保藏单位提供。研机构和菌种保藏单位提供。(2)富氏瓶(或试管)培养)富氏瓶(或试管)培养 富氏瓶或试管装入富氏瓶或试管装入10mL优级麦汁,灭菌、冷却备用。接入纯种酵母在优级麦汁,灭菌、冷却备用。接入纯种酵母在2527保温箱中培养保温箱中培养23天,每天定时摇动。平行培养天,每天定时摇动。平行培养24瓶,供扩大时选择。瓶,供扩大时选择。(3)巴氏瓶培养)巴氏瓶培养 取取5001
6、000mL的巴氏瓶(也可用的巴氏瓶(也可用大三角瓶或平底烧瓶),加入大三角瓶或平底烧瓶),加入250500mL优级麦汁,加优级麦汁,加热煮沸热煮沸30min,冷却备用。在无菌室中将富氏瓶中的酵母,冷却备用。在无菌室中将富氏瓶中的酵母液接入,在液接入,在20保温箱中培养保温箱中培养23天。天。(4)卡氏罐培养)卡氏罐培养 卡氏罐容量一般为卡氏罐容量一般为1020L,放入,放入约半量的优级麦汁,加热灭菌约半量的优级麦汁,加热灭菌30min后,在麦汁中加入后,在麦汁中加入1L无菌水,补充水分的蒸发,冷却备用。再在卡氏罐中接入无菌水,补充水分的蒸发,冷却备用。再在卡氏罐中接入12个巴氏瓶的酵母液,摇动
7、均匀后,置于个巴氏瓶的酵母液,摇动均匀后,置于1520下保下保温温35天,即可进行扩大培养,或可供天,即可进行扩大培养,或可供1000L麦汁发酵用。麦汁发酵用。11(5)实验室扩大培养的技术要求)实验室扩大培养的技术要求l应按无菌操作的要求对培养用具和培养基进行灭菌;应按无菌操作的要求对培养用具和培养基进行灭菌;l每次扩大稀释的倍数约为每次扩大稀释的倍数约为1020倍;倍;l每次移植接种后,要镜检酵母细胞的发育情况;每次移植接种后,要镜检酵母细胞的发育情况;l随着每阶段的扩大培养,培养温度要逐步降低,以随着每阶段的扩大培养,培养温度要逐步降低,以使酵母逐步适应低温发酵;使酵母逐步适应低温发酵;
8、l每个扩大培养阶段,均应做平行培养:试管每个扩大培养阶段,均应做平行培养:试管45个,个,巴氏瓶巴氏瓶23个,卡氏罐个,卡氏罐2个,然后选优进行扩大培养。个,然后选优进行扩大培养。122.生产现场扩大培养阶段生产现场扩大培养阶段l卡氏罐培养结束后,酵母进入现场扩大培卡氏罐培养结束后,酵母进入现场扩大培养。啤酒厂一般都用汉生罐、酵母罐等设备来养。啤酒厂一般都用汉生罐、酵母罐等设备来进行生产现场扩大培养。进行生产现场扩大培养。l(1 1)麦汁杀菌)麦汁杀菌 取麦汁取麦汁200200300L300L加入杀菌罐,加入杀菌罐,通入蒸汽,在通入蒸汽,在0.080.080.10MPa0.10MPa汽压下保温
9、灭菌汽压下保温灭菌60min60min,然后在夹套和蛇管中通入冰水冷却,然后在夹套和蛇管中通入冰水冷却,并以无菌压缩空气保压。待麦汁冷却至并以无菌压缩空气保压。待麦汁冷却至10101212时,先从麦汁杀菌罐出口排出部分沉淀物,时,先从麦汁杀菌罐出口排出部分沉淀物,再用无菌压缩空气将麦汁压入汉生罐内。再用无菌压缩空气将麦汁压入汉生罐内。132.生产现场扩大培养阶段生产现场扩大培养阶段l(2 2)汉生罐空罐灭菌)汉生罐空罐灭菌 在麦汁杀菌的同时,在麦汁杀菌的同时,用高压蒸汽对汉生罐进行空罐灭菌用高压蒸汽对汉生罐进行空罐灭菌1h1h,再通无,再通无菌压缩空气保压,并在夹套内通冷却水冷却备菌压缩空气保
10、压,并在夹套内通冷却水冷却备用。用。l(3 3)汉生罐初期培养)汉生罐初期培养 将卡氏罐内酵母培将卡氏罐内酵母培养液以无菌压缩空气压入汉生罐,通无菌空气养液以无菌压缩空气压入汉生罐,通无菌空气5 510min10min。然后加入杀菌冷却后的麦汁,再通。然后加入杀菌冷却后的麦汁,再通无菌空气无菌空气10min10min,保持品温,保持品温10101313,室温维,室温维持持1313。培养。培养363648h48h左右,在此期间,每隔左右,在此期间,每隔数小时通风数小时通风10min10min。142.生产现场扩大培养阶段生产现场扩大培养阶段l(4)汉生罐旺盛期培养)汉生罐旺盛期培养 当汉生罐培养
11、液进入旺当汉生罐培养液进入旺盛期时,一边搅拌,一边将盛期时,一边搅拌,一边将85左右的酵母培养左右的酵母培养液移植到已灭菌的一级酵母扩大培养罐,最后逐液移植到已灭菌的一级酵母扩大培养罐,最后逐级扩大到一定数量,供现场发酵使用。级扩大到一定数量,供现场发酵使用。l(5)汉生罐留种再扩培)汉生罐留种再扩培 在汉生罐留下的约在汉生罐留下的约15左右的酵母培养液中,加入灭菌冷却后的麦汁,左右的酵母培养液中,加入灭菌冷却后的麦汁,待起发后,准备下次扩大培养用。保存种酵母的待起发后,准备下次扩大培养用。保存种酵母的室温一般控制在室温一般控制在23,罐内保持正压(,罐内保持正压(0.020.03MPa),以
12、防空气进入污染。),以防空气进入污染。152.生产现场扩大培养阶段生产现场扩大培养阶段l在下次再扩培时,汉生罐的留种酵母在下次再扩培时,汉生罐的留种酵母最好按上述培养过程先培养一次后再移植,最好按上述培养过程先培养一次后再移植,使酵母恢复活性。使酵母恢复活性。汉生罐保存的种酵母,应每月换一次汉生罐保存的种酵母,应每月换一次麦汁,并检查酵母是否正常,是否有污染、麦汁,并检查酵母是否正常,是否有污染、变异等不正常现象。正常情况下此种酵母变异等不正常现象。正常情况下此种酵母可连续使用半年左右。可连续使用半年左右。16(6)生产现场扩大培养的注意点)生产现场扩大培养的注意点生产现场扩大培养一般一步步接
13、近生产现场工艺生产现场扩大培养一般一步步接近生产现场工艺每一步扩大后的残留液都应进行有无污染、变每一步扩大后的残留液都应进行有无污染、变异的检查;异的检查;l每扩大一次,温度都应有所降低,但降温幅每扩大一次,温度都应有所降低,但降温幅度不宜太大;度不宜太大;l每次扩大培养的倍数约为每次扩大培养的倍数约为510倍。倍。173.啤酒酵母的质量检验啤酒酵母的质量检验 l(1)形态检验)形态检验 液态培养中的优良健壮的酵母细胞应具有均匀的形液态培养中的优良健壮的酵母细胞应具有均匀的形状和大小,平滑而薄的细胞壁,细胞质透明均一;年状和大小,平滑而薄的细胞壁,细胞质透明均一;年幼少壮的细胞内部充满细胞质;
14、老熟的细胞出现液泡,幼少壮的细胞内部充满细胞质;老熟的细胞出现液泡,内贮细胞液,呈灰色,折光性强;衰老细胞中液泡多,内贮细胞液,呈灰色,折光性强;衰老细胞中液泡多,内容物多颗粒,折光性较强。内容物多颗粒,折光性较强。生产上使用的酵母一般死亡率应在生产上使用的酵母一般死亡率应在3以下,新以下,新培养的酵母死亡率应在培养的酵母死亡率应在1以下。镜检中,不应有杂以下。镜检中,不应有杂菌污染。菌污染。18(2)发酵度检验)发酵度检验 在正常情况下,外观发酵度一般为在正常情况下,外观发酵度一般为7587,真正发酵度,真正发酵度为为6070,外观发酵度一般比真正发酵度约高,外观发酵度一般比真正发酵度约高2
15、0,可按,可按下式粗略换算:下式粗略换算:wr=wa0.819。淡色啤酒发酵度的区分可按表。淡色啤酒发酵度的区分可按表5-5来划分。来划分。P P1F真真(%) =- 100 P式中:式中:P发酵前麦汁浓度();发酵前麦汁浓度(); P1发酵后,蒸馏酒精后的发酵液浓度();发酵后,蒸馏酒精后的发酵液浓度();F真真真正发酵度()。真正发酵度()。P P2F外外(%) = - 100 P式中:式中:P发酵前麦汁浓度();发酵前麦汁浓度(); P2发酵后,直接用糖度计测的发酵液浓度(也称外观浓发酵后,直接用糖度计测的发酵液浓度(也称外观浓度)();度)(); F外外外观发酵度()。外观发酵度()。
16、19(2)各种啤酒发酵度的区分)各种啤酒发酵度的区分204-2、啤酒发酵机理、啤酒发酵机理l一、主要物质变化一、主要物质变化1、糖的变化、糖的变化 在啤酒发酵过程中,可发酵糖约有在啤酒发酵过程中,可发酵糖约有96%发酵发酵为乙醇和为乙醇和CO2,是代谢的主产物;,是代谢的主产物;2.02.5%转化为其他发酵副产物;转化为其他发酵副产物;1.52.0%作作为碳骨架合成新酵母细胞。发酵副产物主要有:为碳骨架合成新酵母细胞。发酵副产物主要有:甘油、高级醇、羰基化合物、有机酸、酯类、甘油、高级醇、羰基化合物、有机酸、酯类、硫化合物等。硫化合物等。212、含氮物质的变化、含氮物质的变化 在正常的发酵过程
17、中,麦汁中含氮物约下降在正常的发酵过程中,麦汁中含氮物约下降1/3,主要是约主要是约50%的氨基酸和低分子肽为酵母所同化。的氨基酸和低分子肽为酵母所同化。酵母分泌出的含氮物的量较少,约为酵母同化氮的酵母分泌出的含氮物的量较少,约为酵母同化氮的1/3。啤酒中残存含氮物质对啤酒的风味有重要影响。啤酒中残存含氮物质对啤酒的风味有重要影响。含氮物质高(含氮物质高(450 mgL)的啤酒显得浓醇,含)的啤酒显得浓醇,含氮量为氮量为300400 mgL的啤酒显得爽口,含氮物的啤酒显得爽口,含氮物质量质量300 mgL的啤酒则显得寡淡。的啤酒则显得寡淡。223、其他发酵产物、其他发酵产物l(1)高级醇类)高
18、级醇类 高级醇(俗称杂醇油)是啤酒发酵代谢产物的主要高级醇(俗称杂醇油)是啤酒发酵代谢产物的主要成分,对啤酒风味有重大影响,超过一定含量时有明成分,对啤酒风味有重大影响,超过一定含量时有明显的杂醇味。对于一般的啤酒,多量的高级醇是不受显的杂醇味。对于一般的啤酒,多量的高级醇是不受欢迎的。啤酒中的绝大多数高级醇是在主发酵期间酵欢迎的。啤酒中的绝大多数高级醇是在主发酵期间酵母繁殖过程中形成的。母繁殖过程中形成的。l(2)酯类)酯类 啤酒中的酯含量很少,但对啤酒风味影响很大,啤啤酒中的酯含量很少,但对啤酒风味影响很大,啤酒含有适量的酯,香味丰满协调,但酯含量过高,会酒含有适量的酯,香味丰满协调,但酯
19、含量过高,会使啤酒有不愉快的香味或异香味。酯类大都在主发酵使啤酒有不愉快的香味或异香味。酯类大都在主发酵期间形成。期间形成。23l(3)连二酮)连二酮 连二酮是双乙酰和连二酮是双乙酰和2,3-戊二酮的总称,其戊二酮的总称,其中对啤酒风味起主要作用的是双乙酰。中对啤酒风味起主要作用的是双乙酰。双乙酰被认为是衡量啤酒成熟与否的决定性双乙酰被认为是衡量啤酒成熟与否的决定性的指标,双乙酰的味阈值为的指标,双乙酰的味阈值为010.15 mg/L,在啤酒中超过阈值会出现馊饭味。在啤酒中超过阈值会出现馊饭味。淡爽型成熟啤酒,双乙酰含量以控制在淡爽型成熟啤酒,双乙酰含量以控制在0.1mg/L以下为宜;高档成熟
20、啤酒最好控制在以下为宜;高档成熟啤酒最好控制在0.05mg/L以下。以下。24影响双乙酰生成的因素l菌种还原能力:强壮幼、衰老、营养不菌种还原能力:强壮幼、衰老、营养不良、代数多者。良、代数多者。l麦汁成分中麦汁成分中AA的种类和含量:的种类和含量:-氨基氨基N降降低,低,-乙酰乳酸生成,双乙酰降低。乙酰乳酸生成,双乙酰降低。l巴氏灭菌前巴氏灭菌前-乙酰乳酸的含量:升高,则高乙酰乳酸的含量:升高,则高温杀菌时,双乙酰升高温杀菌时,双乙酰升高l染菌增加染菌增加l酵母自溶增加酵母自溶增加25双乙酰的控制与消除方法l菌种双乙酰产量低者;提高接种量,还原期菌种双乙酰产量低者;提高接种量,还原期7106
21、个个/100ml。l麦汁成分麦汁成分-氨基氨基N:180200mg/L,并有适宜,并有适宜的的Val含量。溶解含量。溶解O269mg/L,锌,锌0.150.20mg/L。l酿造用水:残余碱度酿造用水:残余碱度1.78mmol。l还原温度:适当提高。还原温度:适当提高。l控制酵母增殖控制酵母增殖l外加外加-乙酰乳酸脱羧酶使发酵液中的乙酰乳酸脱羧酶使发酵液中的-乙酰乳乙酰乳酸酸乙偶姻乙偶姻 26l(4)硫化物)硫化物 挥发性硫化物对啤酒风味有重大影响,这些挥发性硫化物对啤酒风味有重大影响,这些成分主要有硫化氢、二甲基硫、甲基和乙基硫成分主要有硫化氢、二甲基硫、甲基和乙基硫醇、二氧化硫等。其中硫化氢
22、、二甲基硫对啤醇、二氧化硫等。其中硫化氢、二甲基硫对啤酒风味的影响最大。啤酒中的挥发性硫化氢大酒风味的影响最大。啤酒中的挥发性硫化氢大都是在发酵过程中形成的。啤酒中的硫化氢应都是在发酵过程中形成的。啤酒中的硫化氢应控制在控制在010g/L的范围内;啤酒中二甲基硫的范围内;啤酒中二甲基硫浓度超过浓度超过100g/L时,啤酒就会出现硫磺臭味。时,啤酒就会出现硫磺臭味。l(5)乙醛)乙醛 乙醛是啤酒发酵过程中产生的主乙醛是啤酒发酵过程中产生的主要醛类,乙醛是酵母代谢的中间产物。当啤酒要醛类,乙醛是酵母代谢的中间产物。当啤酒中乙醛浓度在中乙醛浓度在10mg/L以上时,则有不成熟的以上时,则有不成熟的口
23、感、腐败性气味;当乙醛浓度超过口感、腐败性气味;当乙醛浓度超过25mg/L,则有强烈的刺激性辛辣感。成熟啤酒的乙醛正则有强烈的刺激性辛辣感。成熟啤酒的乙醛正常含量一般常含量一般10mg/L。27l4、苦味物质、苦味物质 发酵过程中,麦汁中近发酵过程中,麦汁中近1/3的苦味物质损失的苦味物质损失掉。主要原因是由酵母细胞的吸附、发酵时间掉。主要原因是由酵母细胞的吸附、发酵时间增长等原因造成的。增长等原因造成的。l5、pH值的变化值的变化 麦汁发酵后,麦汁发酵后,pH值降低很快。下面发酵啤酒,值降低很快。下面发酵啤酒,发酵终了时,发酵终了时,pH值一般为值一般为4.24.4。pH值下值下降主要是由于
24、有机酸的形成,同时也由于磷酸降主要是由于有机酸的形成,同时也由于磷酸盐缓冲溶液的减少。盐缓冲溶液的减少。 28二、影响发酵的主要因素二、影响发酵的主要因素l1麦汁成分麦汁成分氨基氮、还原糖、锌等。氨基氮、还原糖、锌等。l2发酵温度发酵温度变温发酵,指主发酵阶段的最高温变温发酵,指主发酵阶段的最高温度。一般低温发酵。上面:度。一般低温发酵。上面:1822,下面:,下面:715。低温发酵的原因:低温发酵的原因:下面发酵的类型:低温发酵(接种下面发酵的类型:低温发酵(接种67.5,发酵,发酵79);中温发酵(接种);中温发酵(接种89,发酵,发酵1012);高温发酵(接种);高温发酵(接种910,发
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