发酵工程及其在食品工业中的应用课件.ppt
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1、 1、发酵发酵-n 于拉丁文的“fervere”,指酵母作用于果汁或麦芽汁而表现出来的沸腾现象,是糖厌氧发酵产生二氧化碳的结果。n 1857年法国微生物家巴斯德巴斯德提出了著名的发酵理论:“。”n 上的发酵:任何通过大规模培养微生物来生产产品的过程都是发酵。 fermentation engineeringn 发酵工程是一门,包括微生物学、化学工程、基因工程、细胞工程、机械工程和计算机软硬件工程n 微生物、动物细胞、植物细胞u典型的发酵生产过程包括:典型的发酵生产过程包括: 确定菌种繁殖和发酵生产所用的培养基;确定菌种繁殖和发酵生产所用的培养基; 对培养基、发酵罐及其附属设备进行灭菌;对培养基
2、、发酵罐及其附属设备进行灭菌; 菌种经逐级扩大培养后,作为生产种子菌种经逐级扩大培养后,作为生产种子接种于发酵罐中接种于发酵罐中 菌种的选育菌种的选育产物萃取和精制产物萃取和精制 发酵过程中废弃物的处理与回收发酵过程中废弃物的处理与回收控制发酵罐中微生物的生长条件,最大程控制发酵罐中微生物的生长条件,最大程度地获得人们渴望的代谢产物度地获得人们渴望的代谢产物 发酵现象发酵现象酿造食品工业酿造食品工业抗菌素发酵工业抗菌素发酵工业氨基酸、氨基酸、核酸发酵核酸发酵()菌菌动物细胞大规模培养动物细胞大规模培养植物细胞大规植物细胞大规模培养模培养藻类细胞大规模培养藻类细胞大规模培养转基因动物转基因动物n
3、 :非食品工业(丙酮丁醇、甘油)n :青霉素抗菌素发酵工业n :切断支路代谢酶的活力调控,酶的合成调控(反馈控制和反馈阻遏),解除菌体自身的反馈调节,突变株的应用,前体、终产物、副产物等n :基因、动物、海洋 1900年以前,发酵产品只限于含酒精饮料和醋;古埃及已经能酿造啤酒, 17世纪能在容量为1500桶(一桶相当于110升)的木质大桶中进行第一次真正的大规模酿造 n 人们的对发酵技术的认识起始于,主要来自于,如利用酵母菌、乳酸菌生产酒精、乳酸和各种发酵食品。n 英国采用梭状芽孢杆菌生产,德国采用亚硫酸盐法生产甘油(第一次世界大战) n 好氧发酵技术:速酿法从乙醇生产醋酸,通气法大量繁殖酵母
4、,用米曲霉的麸曲代替麦芽糖作糖化剂生产酒靖,用微小毛霉生产干酪。n 等人发明了代替了传统的静置培养法。生长均匀,增殖时间短。 由 Fleming发现青霉素 美国和英国合作对青霉素进行生产研究表面培养:1升扁瓶或锥形瓶,内装200mL麦麸培养基 40u/ml : 5m3 200u/ml 当今:100-200m3 5-7万u/ml, 链霉素、金霉素、新霉索、红霉素 主要的:l 通气搅拌解决了液体深层培养时的。l 抗杂菌污染的:无菌空气、培养基灭菌、无污染接种、大型发酵罐的密封与抗污染设计制造。 :l 抗生素工业的发展; l 建立了一套完整的好氧发酵技术,大型搅拌发酵罐培养方法; l 推动了整个发酵
5、工业的深入发展;l 为现代发酵工程奠定了基础 发酵工业 谷氨酸、赖氨酸发酵工业 肌苷酸、乌苷酸微生物株通过代谢调节 代谢控制发酵技术转折点: 酶的活力调控,酶的合成调控(反馈控制和反馈阻遏) 解除菌体自身的反馈调节,特殊调节控制的利用,突变株的应用,前体、终产物、副产物等等生物技术发展,打破了生物种间障碍,能定向地制造出新的有用的微生物: 增加微生物体内控制代谢产物产量的基因拷贝数,可以大幅度地提高目标产物的产量 将动、植物或某些微生物特有产物的控制基因植入细胞中,快速经济地大量生产这些产物 将具有不同性能的多种质粒植入,使新菌株在清除污染或以非粮食物质为原料进行发酵生产或环境保护 这个阶段以
6、基因工程产品的生产为标志。 目前,世界上已经批准上市的基因工程药物就有几十种,如:胰岛素、人生长激素等等。 纤维素酶, -干扰素乙型肝炎疫苗集落刺激因子(CSF)促红细胞生成素(EPO)抗血友病因子组织溶纤原激活剂(t-PA)阶段阶段主要产品主要产品控制要求控制要求菌种来源菌种来源自然发酵阶段自然发酵阶段(1900以前)以前)制曲酿酒、制醋、酿制酱油制曲酿酒、制醋、酿制酱油、泡菜、沤肥等、泡菜、沤肥等温度计、比重计温度计、比重计、热交换器、热交换器纯培养物纯培养物重培养发酵阶段重培养发酵阶段(1900-1940)面包酵母、甘油、柠檬酸、面包酵母、甘油、柠檬酸、丙酮丙酮-丁醇等丁醇等pH离线控制
7、、离线控制、温度温度纯培养技术纯培养技术深层通气发酵阶段深层通气发酵阶段(1940-1957 )抗生素、有机酸、酶制剂、抗生素、有机酸、酶制剂、维生素、激素等维生素、激素等温度、温度、pH突变、筛选突变、筛选代谢调控发酵阶段代谢调控发酵阶段(1957-1960)氨基酸、核苷酸氨基酸、核苷酸温度、温度、pH、诱变诱变全面发展阶段全面发展阶段(1960-1979 )单细胞蛋白单细胞蛋白计算机控制计算机控制菌株遗传工程菌株遗传工程技术技术基因工程阶段基因工程阶段(1979-today)为生物自身不能产生的物质为生物自身不能产生的物质,如干扰素、胰岛素,如干扰素、胰岛素计算机控制计算机控制基因重组技术
8、基因重组技术p 目前,全球发酵产品的年销售额在400亿美元左右,并以每年约。p 我国发酵行业生产企业有5000多家,主要发酵产品的年产值达1300亿元。p 随着人类社会经济发展,当前的、已不能支撑现有的发展模式。p 煤、石油等能源的耗竭以及环境保护的急需。p 发酵工程给人类社会的生产力发展带来了巨大潜力,涉及到解决人类所面临的、等重大问题p 只有工业微生物才能将来源于太阳能的可再生资源碳水化合物转变为现代社会所需要的化工原料和能源。这种能源结构和资源结构的转变直接关系到我国经济的可持续发展,社会的稳定、和国家安全。p 未来科学家说:21世纪是生物技术世纪;预言: 21世纪世界即将在生物技术上取
9、得重大突破,新世纪之初,科学方面的主要将在生物学、遗传学和医学、新型生物材料、能源、环境保护上有所突破;则认为:21世纪20年代,生物经济将由目前的形成阶段进入成长阶段,即工业生产与商业开发阶段。转录组学转录组学 蛋白质组学蛋白质组学 代谢组学代谢组学 通量组学通量组学 计量生物学计量生物学(Micro-organism) 通常要用光学显微镜和电子显微镜才能看清楚 (有些肉眼可见,如蘑菇、灵芝) :细菌、蓝细菌、放线菌;支原体、衣原体、立克次氏体:真菌、原生动物、显微藻类:病毒、亚病毒 ( 类病毒,拟病毒,朊病毒):形体小(0.1mm); 构造简单:单细胞、简单多细胞、非细胞; 体积小,面积大
10、; 吸收多,转化快; 生长旺,繁殖快; 适应强,易变异; 分布广,种类多。 大肠杆菌大肠杆菌 0157:H7 放线菌放线菌酵母菌酵母菌霉菌分生孢子霉菌分生孢子弧形霍乱菌弧形霍乱菌肉毒梭菌肉毒梭菌淋病球菌淋病球菌肺炎支原体肺炎支原体HIV病毒病毒微生物名称微生物名称代时代时每日分裂次数每日分裂次数温度温度每日增殖率每日增殖率乳酸菌38分38252.71011大肠杆菌18分80371.21024 根瘤菌110分13258.2103枯草杆菌31分46307.01013 光合细菌144分10301.0103酿酒酵母120分12304.1103小球藻7小时3.42510.6念珠藻23小时1.04252.
11、1硅藻17小时1.4202.64草履虫10.4小时2.3264.92一般为 个体多为单细胞或的多细胞,甚至非细胞结构, 细胞,细胞数量多,因而尽管其自发突变率很低,也会造成在短时间内产生较多的变异后代生产青霉素的产黄青霉菌,开始筛选获得时,每毫升发酵液仅含约20单位单位的青霉素,但经过多次诱变选育后,每毫升已超过5万单位万单位了。 40年代初至今,成人患者的青霉素注射剂量注射剂量, 已由每天每天10万单位万单位提高到100万单位万单位甚至上千万单位甚至上千万单位。 维C 、抗生素 、酶及酶抑制剂、有机酸 从石油产品制造产品(水杨酸等) 消除环境污染(处理石油废水,含酚、氰和化学农药的污水等)基
12、因工程宿主菌,工业上生产谷氨酸脱羧酶、天冬酰胺酶和制备天冬氨酸、苏氨酸及缬氨酸等活性双歧杆菌的乳制品或微生态制剂 淀粉酶、蛋白酶、5-核苷酸酶、某些氨基酸及核苷 ,常见有:链霉素、土霉素、博莱霉素、丝裂霉素、制霉菌素、卡那霉素、井冈霉素常用酵母菌有:啤酒酵母、假丝酵母、类酵母等主要用于酿酒、制造面包、制造低凝固点石油、生产脂肪酶、酵母菌体蛋白、基因工程宿主菌等。工业上常用霉菌有:根霉、毛霉、犁头霉,红曲霉,曲霉、青霉等,主要用于生产多种酶制剂、抗生素、有机酸及甾体激素等。 乳酸菌乳酸菌酵母和醋酸菌酵母和醋酸菌泡菜发酵中的有益菌泡菜发酵中的有益菌豆豉和纳豆的发酵菌种豆豉和纳豆的发酵菌种豆豉:米曲
13、霉(同豆酱)豆豉:米曲霉(同豆酱)纳豆:米曲霉、细菌(纳豆芽纳豆:米曲霉、细菌(纳豆芽孢杆菌)孢杆菌)腐乳的发酵菌种腐乳的发酵菌种主要是毛霉主要是毛霉另有根霉、米曲霉、红曲菌、另有根霉、米曲霉、红曲菌、酵母等酵母等酿造酱油的发酵菌种酿造酱油的发酵菌种米曲霉米曲霉和和酱油曲霉酱油曲霉决定酱油的发酵速度、成决定酱油的发酵速度、成品颜色及味道品颜色及味道 米曲霉(蛋白酶、谷氨酰胺酶、淀粉酶、果米曲霉(蛋白酶、谷氨酰胺酶、淀粉酶、果胶酶、半纤维素酶等)胶酶、半纤维素酶等)酵母菌和乳酸菌酵母菌和乳酸菌有助酱油产有助酱油产香香(乳酸乙酯)(乳酸乙酯)酿造食醋的发酵菌种酿造食醋的发酵菌种黑曲霉(糖化)黑曲霉
14、(糖化)酵母(产酒精)酵母(产酒精)醋酸菌醋酸菌:过滤介质不干燥;灭菌和发酵时操作不当使罐压高于过滤器中空气压力,将冷凝水或发酵液倒灌至过滤器内;突然停电,空压机停转,也会发生倒灌。:蒸汽压力或灭菌时间不够;配料未混合均匀,存在结块现象:设备方面特别是老设备常会遇到各种问题,如夹层或盘管、轴封和管道的渗漏;空气除菌效果差;管道安装不合理,存在死角等:多个罐的排气管、下水管汇集在一条总管路上,相互干扰 芽孢杆菌、短杆菌、长杆菌、球菌、噬菌体、酵母菌等:镜检或无菌试验方法。局限性:初期很难镜检发现,发现后染菌已很严重;无菌试验要十来个小时,发现后再处理为时已晚。:溶氧变化规律可作为染菌预报的根据。
15、污染好气性杂菌,溶氧会一反往常在较短时间内下降到接近零,且长时间不回升 杂菌本身非十分好气:溶氧反而升高 :发酵液变稀,溶氧迅速回升发酵罐染菌,而且染的是同一种菌,一般是由空气过滤器失效造成的。对空气系统必须定期检查。发酵罐(或罐组)染菌,发酵前期可能是种子带菌,中后期可能是中间补料系统或油管路发生问题发酵罐连续染菌和偶然染菌,大多由设备问题造成(如阀门渗漏、罐体腐蚀、冷却管穿孔等) 。个别发酵罐的偶然染菌原因比较复杂。l 发酵染菌:种子带菌,培养液灭菌或设备灭菌不彻底l 染菌:中间补料、设备渗漏以及操作不合理l 染耐热芽孢杆菌:多因设备存在死角或培养基灭菌不彻底l 染球菌、酵母:从蒸汽的冷凝
16、水或空气中带来l 污染霉菌:大多是灭菌不彻底或无菌操作不严格所致。:用物理或化学方法杀死或除去环境中所有微生物,包括营养细胞、细菌芽孢和孢子:用物理或化学方法杀死物料、容器、器皿内外的病源微生物。 100 843 99.99 110 75 89 120 7.6 27 130 0.851 10 140 0.107 3 150 0.015 1火焰灼烧法烘箱热空气灭菌法干热灭菌法巴氏消毒法煮沸消毒法间歇灭菌法高压蒸汽灭菌法湿热灭菌(消毒)法高温灭菌(消毒)法常用的几类食品添加剂一、发酵法生产酒类饮料一、发酵法生产酒类饮料发酵工程在食品工业中的应用实例发酵工程在食品工业中的应用实例酒分白酒、黄酒、啤酒
17、、葡萄酒。酒分白酒、黄酒、啤酒、葡萄酒。按颜色,分为有色酒和无色酒。按颜色,分为有色酒和无色酒。按本质分,有压榨酒和蒸馏酒。按本质分,有压榨酒和蒸馏酒。压榨酒包括黄酒,啤酒,葡萄酒。压榨酒酒压榨酒包括黄酒,啤酒,葡萄酒。压榨酒酒精含量比较低。精含量比较低。 蒸馏酒主要指白酒。蒸馏酒的酒精含量高,蒸馏酒主要指白酒。蒸馏酒的酒精含量高,浓度越高质量越高,高档的白酒酒精含量一般浓度越高质量越高,高档的白酒酒精含量一般大于大于50。 浸米浸米蒸饭蒸饭淋饭淋饭摊冷摊冷加酒药(菌种)加酒药(菌种)发酵(缸中发酵(缸中5-7d)装坛装坛低温发酵低温发酵压榨压榨煮酒(灭菌)煮酒(灭菌)装坛泥装坛泥封封堆置陈化
18、(后熟)堆置陈化(后熟)出厂出厂 1、黄酒、黄酒l我国的民族特产和传统食品,也是世界上最古老的饮料我国的民族特产和传统食品,也是世界上最古老的饮料酒之一。酒之一。l以谷物为主要原料,利用酒药、麦曲或米曲所含的多种以谷物为主要原料,利用酒药、麦曲或米曲所含的多种微生物的共同作用酿制而成的发酵原酒。微生物的共同作用酿制而成的发酵原酒。l长江以南地区,主要分布在浙江、江苏、福建,以稻米长江以南地区,主要分布在浙江、江苏、福建,以稻米为原料。为原料。l长江以北地区,主要以小米为原料。长江以北地区,主要以小米为原料。制作过程制作过程按生产方法按生产方法 按成品酒的含按成品酒的含糖量糖量黄酒的黄酒的分类分
19、类传统工艺黄酒传统工艺黄酒新工艺黄酒新工艺黄酒干型黄酒干型黄酒 糖含量糖含量20.00以纯种发酵取代自然发酵,以大型发以纯种发酵取代自然发酵,以大型发酵生产代替小型手工操作,生产过程酵生产代替小型手工操作,生产过程简化,原料利用率高,去除了笨重的简化,原料利用率高,去除了笨重的体力劳动体力劳动以酒药、麦曲或米曲、红曲及淋饭酒以酒药、麦曲或米曲、红曲及淋饭酒母为糖化发酵剂,进行自然的、多菌母为糖化发酵剂,进行自然的、多菌种的混合发酵生产而成,发酵周期长种的混合发酵生产而成,发酵周期长淋饭酒淋饭酒摊饭酒摊饭酒喂饭酒喂饭酒A.绍兴黄酒绍兴黄酒压榨后加上酱色(糖炒焦和小苏打混合,加入),酒压榨后加上酱
20、色(糖炒焦和小苏打混合,加入),酒精浓度为精浓度为10%-20%。 特点特点 (1)原料好:)原料好:淀粉多,胚乳多。(淀粉多,胚乳多。(2)水好)水好:鉴湖水,秋天水呈青黛色。:鉴湖水,秋天水呈青黛色。蒸饭分批加入,保持高浓度的培养基,高浓度发酵。蒸饭分批加入,保持高浓度的培养基,高浓度发酵。:进一步提高酒精度,用状元酒代替水冲缸,装坛。进一步提高酒精度,用状元酒代替水冲缸,装坛。:黄酒蒸馏,酒浓度高。黄酒蒸馏,酒浓度高。:雕花的缸装的状元红。雕花的缸装的状元红。江阴黑酒(木酒),米煮熟后炒焦,用木头装坛;闽南,沉缸酒;厦门,红曲黄酒(加入红曲霉)。B.其他几种有特色的酒其他几种有特色的酒l
21、属于甜型水酒。属于甜型水酒。l酒药为黄曲霉,根霉。酒药为黄曲霉,根霉。l酒母:糯米加麦曲,加酒药,浸泡晾干。酒母:糯米加麦曲,加酒药,浸泡晾干。l精米率:精米率:70-75,而一般黄酒,而一般黄酒88-92。l后处理:经压滤、澄清后,还需进行过滤、调配,后处理:经压滤、澄清后,还需进行过滤、调配,60-65灭菌后储存一年,出库时再次进行调配、过滤,并灭菌后储存一年,出库时再次进行调配、过滤,并用活性炭脱色,最后加热至用活性炭脱色,最后加热至65 ,趁热装瓶、出厂。而,趁热装瓶、出厂。而一般黄酒对澄清、过滤、调配等操作不大重视。一般黄酒对澄清、过滤、调配等操作不大重视。C.日本清酒日本清酒2、葡
22、萄酒、葡萄酒我国汉代(公元前我国汉代(公元前138138年),张骞出使西域带年),张骞出使西域带回葡萄,并引进酿酒艺人,开始有了葡萄酒回葡萄,并引进酿酒艺人,开始有了葡萄酒葡萄酒分类葡萄酒分类按酒的颜色按酒的颜色按含糖量按含糖量按酿造方法按酿造方法按是否含有按是否含有CO2红葡萄酒红葡萄酒白葡萄酒白葡萄酒桃红葡萄酒桃红葡萄酒干葡萄酒干葡萄酒半干葡萄酒半干葡萄酒半甜葡萄酒半甜葡萄酒甜葡萄酒甜葡萄酒天然葡萄酒天然葡萄酒加强葡萄酒加强葡萄酒加香葡萄酒加香葡萄酒平静葡萄酒平静葡萄酒起泡葡萄酒起泡葡萄酒葡萄汽酒葡萄汽酒用果皮带色的葡萄制成,酒色呈深红、用果皮带色的葡萄制成,酒色呈深红、鲜红、紫红或宝石红
23、。鲜红、紫红或宝石红。用白葡萄或红皮白肉葡萄的果汁制成,酒色用白葡萄或红皮白肉葡萄的果汁制成,酒色呈浅黄、禾秆黄、金黄色或近似无色。呈浅黄、禾秆黄、金黄色或近似无色。用带色红葡萄短时间浸提或分离发酵制用带色红葡萄短时间浸提或分离发酵制成的,酒色呈桃红或浅玫瑰色。成的,酒色呈桃红或浅玫瑰色。含糖量含糖量50.1g/L葡萄原料在发酵过程中不添加糖或酒精,即葡萄原料在发酵过程中不添加糖或酒精,即完全用葡萄汁发酵酿成的葡萄酒。完全用葡萄汁发酵酿成的葡萄酒。人工添加白兰地或脱臭酒精,以提高酒精人工添加白兰地或脱臭酒精,以提高酒精含量;或添加糖份提高含糖量含量;或添加糖份提高含糖量。葡萄原酒浸泡芳香植物或
24、药材制成的。葡萄原酒浸泡芳香植物或药材制成的。不含不含CO2的葡萄酒的葡萄酒CO2由葡萄酒加糖发酵产生或人工压入,酒中由葡萄酒加糖发酵产生或人工压入,酒中CO2含量在含量在20 时保持压力时保持压力0.35MPa。CO2由葡萄酒加糖发酵产生或人工压入,酒中由葡萄酒加糖发酵产生或人工压入,酒中CO2在在20 时在时在0.051-0.25MPa。葡萄采下分选,厚皮的较好;去梗;表面消毒(KMnO4浸,无菌水淋洗,灭表面原菌);发酵(温度20,2-3周,密闭或半密闭,皮厚的时间长些,皮薄的时间短些);压榨:液体进行后发酵(20-25,一周),澄清,取上部液体,其中低挡的装瓶,较高档次的换桶(最好是橡
25、木桶,橡木能产生抑菌物质,同时具有一种天然植物香)陈化三年(5);渣进行蒸馏,调香,制成白兰地(酒精多)。主要工艺主要工艺葡萄酒的再加工葡萄酒的再加工起泡葡萄酒:是一种含起泡葡萄酒:是一种含CO2的葡萄酒,以葡萄酒为基础的葡萄酒,以葡萄酒为基础,通过加糖发酵产生或人工压入,通过加糖发酵产生或人工压入CO2。香槟酒是起泡酒的一种香槟酒是起泡酒的一种起源于法国,因产于法国香起源于法国,因产于法国香槟地区而得名。目前世界各槟地区而得名。目前世界各国都产起泡酒,并都将含一国都产起泡酒,并都将含一定定CO2的优质白葡萄酒称为的优质白葡萄酒称为香槟酒。香槟酒。葡萄酒的再加工葡萄酒的再加工白兰地:是一种以水
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- 发酵 工程 及其 食品工业 中的 应用 课件
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