标准的PCR实验室建设方案.docx

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1、标准的PCR实验室建设方案 标准的PCR试验室建设方案 发布时间： 2009-11-5 10:15:17 一、主体结构 主体为彩钢板、铝合金型材。室内全部阴角、阳角均采纳铝合金50内圆角铝，从而解决简单污染、积尘、不易清扫等问题。结构坚固，线条简明，美观大方，密封性好。 二、标准的三区分隔和气压调整 将PCR过程分成试剂打算、标本制备和PCR扩增检测三个独立的试验区。整个区域有一个整体缓冲走廊。每个独立试验区设置有缓冲区， 同时各区通过气压调整，使整个PCR试验过程中试剂和标本免受气溶胶的污染并降低扩增产物对人员和环境的污染。 可打开缓冲区，缓冲区和 PCR 扩增区的排风扇往外排气，在试验区的

2、外墙上和各扇门上都安装有风量可调的回风口，空气通过回风口向室内换气。 三、消毒 在三个试验区和三个缓冲区顶部以及传送窗内部安装有紫外灯，供消毒用。 在试剂打算区和标本制备区 还设置移动紫外线灯，对试验桌进行局部消毒。 四、机械连锁不锈钢传递窗 试剂和标本通过机械连锁不锈钢（不建议运用电子连锁方式）传递窗传递，保证试剂和标本在传递过程中不受污染（人物分流）。 五、地面 地面建议运用PVC卷材地面或自流坪地面，整体性好。便于进行清扫，耐腐蚀。没有条件的也可采纳水磨石地面，或大块的瓷砖（至少800mm800mm）接缝须要小于2mm。 六、照明 灯具要选用净化灯具，能达到便于清洗、不积尘的特点。 在建

3、设的过程中应留意： （1）规范的安装流程和全面的服务流程。 （2）严格根据规范科学设计的安装流程。 （3）安装前须要确定以下安装条件，如：电源电压，电源进线位置，电话网络线进线位置，进水水压，最小安装空间，地面平整度，通风孔、进水管和下水管的位置等，志向状态的空间尺寸和通风口尺寸。 临床基因扩增（PCR）试验室设计探讨 发布时间： 2009-4-10 10:39:25 简介： 介绍了什么叫做基因扩增试验室以及基因扩增试验室是如何保证明验结果的平安性和牢靠性的。并从平面布置、通风空调系统设计、污染的预防与限制几个方面探讨了基因扩增试验室设计的主要特点和应留意的问题。 关键字：基因扩增 基因扩增试

4、验室 相关站中站： 干净试验室/生物试验室 1 概述 临床基因扩增试验又称PCR试验，是特地用来检验艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病的一种检测手段。它可以通过将病毒体内所含的基因进行扩增的方法，测出一些病毒含量不高的感染者体内是否含有特定的病毒。由于该检测方法可以测出一般检验难以检测出的病毒并具有灵敏度高、特异性高、快捷、对样品要求低等优点，因此被临床医生广为认可，已广泛应用于医院的临床诊断和各防疫检测部门的禽疫病诊断。但是，这种试验须要有能保证肯定平安、配置合理的试验室和特别规范的操作为前提。近年来对临床基因扩增检验试验室的建设越来越得到重视，因为它对检测结果的牢靠性、精确性和平安性

5、起到至关重要的作用。本文主要从临床基因扩增检验试验室的平面布局，空调通风系统设计、气流限制和污染的防制几个方面对 试验室设计中的主要特点进行了阐述。 临床基因扩增检验试验室设计的核心问题是如何避开污染。因此，试验室的平面布局、空调通风系统设计、气流限制等都是围绕这个核心问题进行的。下面就对这几个方面分别进说明。 2 PCR试验室平面布局 临床基因扩增检验试验室原则上分为四个单独的工作区域：试剂贮存和打算区、标本制备区、扩增反应混合物配制和扩增区、扩增产物分析区。为避开交叉污染，进入各个工作区域必需严格遵循单一方向进行，即只能从试剂贮存和打算区标本制备区扩增反应混合物配制和扩增区扩增产物分析区。

6、 各试验区之间的试剂及样品传递应通过传递窗进行。 PCR试验室平面布置示意图如图1所示。 图1 PCR试验室平面布置示意图 3 试验室空调通风系统设计及压力限制 PCR试验室并没有严格的净化要求，但是为避开各个试验区域间交叉污染的可能性，宜采纳全送全排的气流组织形式。同时，要严格限制送、排风的比例以保证各试验区的压力要求。 3.1 试剂贮存和打算区 该试验区主要进行的操作为贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备。试剂和用于标本制作的材料应干脆运输至该区，不得经过其他区域。试剂原材料必需贮存在本区内，并在本区内制备成所需的贮存试剂。 对与气流压力的限制，本区并没有严格的要求。 3.2 标

7、本制备区 该区域主要进行的操作为临床标本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定RNA时cDNA的合成。 本区的压力梯度要求为：相对于邻近区域为正压，以避开从邻近区进入本区的气溶胶污染。另外，由于在加样操作中可能会发生气溶胶所致的污染，所以应避开在本区内不必要的走动。 3.3 扩增反应混合物配制和扩增区 该区域主要进行的操作为DNA或cDNA扩增。此外，已制备的DNA模板和合成的cDNA(来自样本制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂贮存和制备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。在巢式PCR测定中，通常在第一轮扩增后必需打开反应管，因此巢式扩增有较高的污染危急性，

8、其次次加样必需在本区内进行。 本区的压力梯度要求为：相对于邻近区域为负压，以避开气溶胶从本区漏出。为避开气溶胶所致的污染，应尽量削减在本区内的不必要的走动。个别操作如加样等应在超净台内进行。 3.4 扩增产物分析区 该区域主要进行的操作为扩增片段的测定。如运用全自动封闭分析仪器检测，此区域可不设。 本区是最主要的扩增产物污染来源，因此对本区的压力梯度的要求为：相对于邻近区域为负压，以避开扩增产物从本区扩散至其它区域。 4 污染的预防与限制 PCR试验室设计的核心问题是如何避开污染。在实际工作中，常见的有以下几种污染类型：扩增产物的污染；自然基因组DNA的污染；试剂的污染以及标本间的污染。由于一

9、旦发生污染，试验就必需停止，直到找到污染源为止，而且试验结果必需作废，需重新进行试验。所以发生污染后再围绕试验室来找寻污染源不但耗时而且繁琐，奢侈人力物力。因此要避开污染，首先应是预防，而不是解除。 4.1 工作区域的严格划分 （1）各个试验区域设置合理； （2）各个试验区域要有明显的标记（如醒目的门牌或不同的地面颜色等），以避开各个不同试验区域设备物品、试剂等发生混淆。 4.2 合理的系统设置 （1）合理的空调通风系统设置，尽量采纳全送全排的空调系统； （2）严格的气流压力限制，保证不同的试验区内不同的压力要求。 4.3 规范的操作 （1）临床基因扩增检验试验室的技术人员必需进行上岗培训，经

10、培训合格后才能从事临床基因扩增检验的工作； （2）在试验操作过程中，操作者必需戴手套，并常常更换。此外，操作中运用一次性帽子也是一个有效地防止污染的措施； （3）清洁工作刚好、正确。试验工作结束后，必需马上对本区进行清洁。除常规的消毒液体对表面进行擦拭消毒或紫外线灯的照耀消毒外，对一些试验设备还应进行高压消毒处理。 4.4 严格的管理 （1）严格限制进出试验室的人员。与试验无关的人员不得随意进出试验室，有条件的状况下要设置独立的通道和进出整个试验区的门； （2）在各个试验区域运用带有明显区分标记的工作服（如不同颜色），当工作人员离开时不得将本区的工作服带至其它区域； （3）尽量削减在试验区内不

11、必要的走动以削减交叉污染的可能性。 （4）扩增产物分析区是最主要的扩增产物污染来源，废液不能在试验室中倾倒，必需经消毒液浸泡消毒后在远离试验室的地方弃掉，用过的吸头等一次性材料也应经消毒液浸泡消毒后统一处理，如焚烧等； （5）扩增产物分析区可能会用到某些可致基因突变和有毒物质，应特殊留意试验人员的平安防护。 4.5 完备的试验室配套设施 完备的试验室配套设施是保证明验工作的必要条件，应依据各个试验室试验内容的不同配备相应的设备和仪器，如超净工作台、离心机、加样器等。 标准的PCR试验室建设方案 PCR试验室 PCR试验室 PCR试验室说明 301医院 PCR试验室建设说明 标准的PCR试验室简介设计规划 PCR试验室检查要点() PCR试验室认证体会 PCR试验室审核表 PCR试验室装饰要求 本文来源：网络收集与整理，如有侵权，请联系作者删除，谢谢！第9页 共9页第 9 页 共 9 页第 9 页 共 9 页第 9 页 共 9 页第 9 页 共 9 页第 9 页 共 9 页第 9 页 共 9 页第 9 页 共 9 页第 9 页 共 9 页第 9 页 共 9 页第 9 页 共 9 页