糖尿病的实验室检查.ppt

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1、PART ONE实验室检查一、血糖的来源与去路 血液中的葡萄糖称为血糖。 空腹时血糖浓度为3.896.11mmol/L。 血糖水平恒定，保证重要组织器官的能量供应，特别是某些依赖葡萄糖供能的组织器官。二、血糖浓度的调节 血糖浓度受到神经、激素和器官三方面的调节作用。 1.激素的调节作用三、糖尿病的实验室检查 （一）血糖测定 （二）口服葡萄糖耐量实验（OGTT） （三）糖化蛋白测定 （四）葡萄糖-胰岛素释放试验 （五）尿糖测定 （六）葡萄糖-C肽释放试验 （七）糖尿病急性代谢合并症的实验室检查（一）血糖测定1）葡萄糖氧化酶）葡萄糖氧化酶-氧速率法（氧速率法（GOD-OR法）法） 葡萄糖氧化酶每氧

2、化标本中的一分子葡萄糖便消耗一分子氧，用氧敏感电极测定氧消耗速率，便可知葡萄糖含量。此法准确性和精密度都很好，但只能用于特殊的分析仪。2 2）葡萄糖氧化酶）葡萄糖氧化酶- -过氧化物酶偶联法（过氧化物酶偶联法（GOD-PODGOD-POD法）法）原理原理：POD：过氧化物酶；GOD：葡萄糖氧化酶。 505nm比色，其色泽深浅与葡萄糖浓度成正比。 GOD催化的反应特异，只有葡萄糖反应，POD受干扰因素较多，如血中有还原性物质，评价：准确度、精密度、灵敏度和稳定性良好，是目前血糖测定的首选方法。 3 3）已糖激酶法（）已糖激酶法（HKHK法）：是目前公认的参考方法。法）：是目前公认的参考方法。原理

3、：原理：NADPH在在340nm有吸收峰，其吸光度增加与葡萄糖浓度成正比。有吸收峰，其吸光度增加与葡萄糖浓度成正比。该反应第二步特异，只有G-6-P才能反应。评价：本法准确度和精密度高，特异性高于葡萄糖氧化酶法。干扰因素少，轻度溶血、脂血、黄疸、肝素、EDTA等不干扰测定。试剂较贵。3.参考值：3.96.11mmol/L。4.临床意义（2）诊断低血糖症：血糖浓度血糖浓度2.8mmol/L（50mg/dl），称为低血糖症。），称为低血糖症。（二）口服葡萄糖耐量实验（二）口服葡萄糖耐量实验（oral glucose tolerance oral glucose tolerance testtest

4、，OGTTOGTT） 1.概述：是一种葡萄糖负荷试验。当胰岛细胞功能正常时，机体在进食糖类后，通过各种机制使血糖在23h内迅速恢复到正常水平。这种现象称为耐糖现象。利用这一试验可了解胰岛细胞功能和机体对糖的调节能力。 2.OGTT的主要适应证 （1）无糖尿病症状，随机或空腹血糖异常者。 （2）无糖尿病症状，有一过性或持续性糖尿。 （3）无糖尿病症状，但有明显糖尿病家族史。 （4）有糖尿病症状，但随机或空腹血糖不够诊断标准。 （5）妊娠期、甲状腺功能亢进、肝病或感染，出现糖尿者。 （6）分娩巨大胎儿的妇女或有巨大胎儿史的个体。 （7）不明原因的肾病或视网膜3.3.方法方法 试验前三天每日食物中糖

5、含量应不低于150g，维持正常活动，影响试验的药物应在三天前停用。整个试验期间不可吸烟、喝咖啡、喝茶或进食。 成人75g葡萄糖，孕妇100g，儿童每公斤体重1.75g，总量75g。坐位取血后5分钟内饮入250ml含75g无水葡萄糖的糖水，以后每隔30分钟取血一次，共4次，历时2h。根据各次血糖水平绘制糖耐量曲线。 4.OGTT4.OGTT结果结果 （1 1）正常糖耐量：）正常糖耐量： 空腹血糖6.1mmol/L（110mg/dl）。 口服葡萄糖3060min达高峰，峰值11.1mmol/L（200mg/dl）。 2小时恢复到正常水平，即7.8mmol/L（140mg/dl）。 尿糖均为（-）。

6、 此种糖耐量曲线说明机体糖负荷的能力好。（2 2）糖尿病性糖耐量：）糖尿病性糖耐量： 空腹血糖浓度7.0mmol/L； 服糖后血糖急剧升高，峰时后延，峰值超过11.1mmol/L，2小时后仍高于正常水平。 尿糖常为阳性。 服糖后2h的血糖水平是最重要的判断指标。 许多早期糖尿病病人，可只表现为2h血糖水平的升高，且尿糖常为阳性。 （3 3）糖耐量受损（）糖耐量受损（IGTIGT）：）： 空腹血糖6.117.Ommol/L（110126mg/dl），2小时后血糖水平：7.811.1mmol/L（140200mg/dl）之间。 IGT病人长期随诊，最终约有1/3的人能恢复正常，1/3的人仍为糖耐量

7、受损，1/3的人最终转为糖尿病。 （4 4）空腹血糖受损（）空腹血糖受损（IFGIFG）： 空腹血糖介于6.17.0mmol/L之间，2小时血糖7.8mmol/L。（三）糖化蛋白测定（三）糖化蛋白测定 1.糖化血红蛋白测定 （1）Hb的种类：最重要的是最重要的是HbA1cHbA1c。HbA1c的生成量取决于血糖的浓度，正常人约占4%6%。由于红细胞的半寿期是60天，所以GHb的测定可以反映测定前8周左右病人的平均血糖水平。（2）测定方法：高压液相色谱（HPLC）法（参考方法）可精确分离HbA1各组分；并分别得出HbA1a、HbA1b、HbA1c、HbA1d的百分比。低压液相色谱（LPLC）阳离

8、子交换柱层析法CV（2%16%），测定的血红蛋白类型为HbA1。参考值：HbA1c4%6%（HPLC法）。2.2.糖化血清蛋白糖化血清蛋白 血清白蛋白和其他蛋白质也可与葡萄糖发生糖基化反应，生成酮胺结构，称为果糖胺。 白蛋白的半寿期比血红蛋白短，转换率快，约1719天，可通过测定血清糖基化蛋白水平来反映23周前的血糖控制情况，制定控制糖尿病患者血糖浓度的短期方案。糖化终末产物糖化血红蛋白果糖胺血糖（四）葡萄糖-胰岛素释放试验 1.概述：通过观察在高血糖刺激下胰岛素的释放可了解胰岛细胞的功能。糖尿病患者往往可出现胰岛素空腹水平低下，或服糖后胰岛素释放与血糖不同步，高峰后移或胰岛素升高水平不够等现

9、象。 2.方法 实验前后的准备同OGTT，如已知为糖尿病患者用馒头餐代替口服葡萄糖。取血同时进行葡萄糖和胰岛素测定。 胰岛素测定过去一般采用放射免疫竞争双抗体-PEG法。 现在多采用化学发光法。 3.参考值 空腹胰岛素 4.015.6U/L（CLIA法） 17.8173pmol/L（电化学发光） 胰岛素峰时在3060min，峰值达基础值的510倍，180min时降至空腹水平。胰岛素曲线一般与糖耐量曲线的趋势平行。4.临床意义 （1）胰岛素水平降低常见于1型糖尿病，糖耐量曲线上升而胰岛素曲线低平。 （2）胰岛素水平升高可见于2型糖尿病。 病人胰岛素空腹水平正常或略高，胰岛素释放曲线峰时出现晚，约

10、在120180min。 原因：病人体内存在胰岛素拮抗物或靶细胞的胰岛素受体数目减少或胰岛素清除率降低。 胰岛素持续升高，而血糖持续低平则见于胰岛细胞瘤； 胰岛素持续升高，而血糖水平正常见于早期糖尿病。 空腹血糖正常的轻型糖尿病人表现为迟发的高胰岛素水平和低血糖现象。 高胰岛素血症还见于肥胖、高血压、皮质醇增多症等胰岛素抵抗者。（五）尿糖测定 1.概述：正常人尿糖定性为（-），24h尿中排出的葡萄糖少于0.5g。 尿中可测出糖的最低血糖浓度（8.829.92mmol/L）称为肾糖阈。 当血糖浓度超过肾糖阈时，可在尿中测出糖。 尿糖测定主要用于筛查疾病和疗效观察而不作为诊断指标。 一般情况下糖尿病

11、患者血糖越高，尿糖也越多，可以从尿糖反映一定时间内葡萄糖从尿中流失的情况，但评价尿糖时一定要考虑肾糖阈的因素。 2.参考值 尿糖试纸半定量法（-）。24h尿糖定量（葡萄糖氧化酶法）：0.5g/24h。3.了解病人的肾糖阈。 具体方法： 6:00Am空腹取血、留尿，餐后7:00Am、8:00Am再取血、留尿，分别测血糖、尿糖。 如三次血糖都8.82mmol/L，而测出尿糖，说明肾糖阈低； 三次血糖都11.02mmol/L，而无尿糖，说明肾糖阈高。 4.注意事项 （1）妊娠、哺乳期可出现乳糖尿。 （2）了解病人从尿中丢失糖的情况，要求至少固定饮食条件一周后测定24小时尿糖。 （3）尿糖定性可受尿量影响。有的糖尿病患者经过治疗后血糖下降，可尿糖不见下降，这是因为经治疗后病人不渴，无渗透性利尿，尿中水少了，所以加号不少。 （4）葡萄糖氧化酶法是靠生成过氧化氢使色原显色。尿中其他还原剂使过氧化氢变为水，造成结果假阴性。过氧化氢可造成假阳性。PART ONE