胃癌医学检验论文(共2204字).doc

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1、胃癌医学检验论文(共2204字)胃癌医学检验论文 1材料与方法1.1研究对象186例非贲门胃癌患者，来自中山大学附属医院住院及门诊患者，经临床、胃镜及病理诊断证实。男81例，女105例，平均发病年龄（55.1914.05）岁。随机选取298例来自武汉大学中南医院的健康体检者，其中男198例，女100例，平均年龄（39.2014.12）岁。以上个体均为无血缘关系的广东汉族人，既往无糖尿病、系统性红斑狼疮、风湿性关节炎、炎症性肠病等自身免疫性疾病史。1.2研究方法1.2.1Hp的检测采用ELISA检测Hp感染。1.2.2基因组DNA提取抽取静脉血4ml，常规酚/氯仿抽提基因组DNA。1.2.3PC

2、R扩增与限制性片段长度多态性分析(PCRRFLP)1.2.3.1TLR4Asp299Gly，Thr399Ile基因多态性检测将PCR产物用限制性内切酶酶切后以8%的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离、GV1染色。1.2.3.2CD14C159T基因多态性检测引物设计及反应条件参照文献，引物为F：5TGCCAGGAGACACAGAACCC3，R：5TGTCATTCAGTTCCCTCCTC3，PCR产物用限制性内切酶酶切后以8%的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离、GV1染色。1.2.4统计学分析病例组和对照组人群HardyWeinberg平衡采用2拟和优度检验，等位基因及基因型频率采用直接计数法计算，2检验

3、差异的显著性水平（检验水准为=0.05），相对风险度用OR（Oddsratio）值及95%可信区间（95%CI）来评价。2结果与讨论我们的研究中，正常人的Hp感染率是61.3%，通过对湖北汉族人群Hp感染的检测，发现非贲门胃癌组Hp感染率显著高于对照组（P<0.0001，OR=7.573，95%CI：3.58515.995）。Correa等认为，胃黏膜在有害因素作用下产生损伤，黏膜细胞再分裂、增生以修复损伤的过程中可启动细胞凋亡，以清除无法修复的具有遗传缺陷的细胞，但有些胃黏膜细胞可因某种原因逃避凋亡，细胞寿命得以延长，增加其进一步受损的机会，胃黏膜经肠化、异型增生逐渐向恶性细胞转化。虽

4、然Hp具体致癌机制至今仍未清楚，但Correa提出的以炎症为触发因素的胃癌发生机制理论受到人们的重视，也肯定了炎症在Hp胃癌的发生中的作用。活体内，胃上皮细胞可以表达TLR，故很有可能TLRs表达于胃上皮细胞并与Hp相互作用，从而调节致炎细胞因子和趋化因子的生成，引起胃黏膜的炎症。进而在Hp感染性活动性胃炎的背景下，通过胃上皮的前期病损、肠化生和不典型增生逐渐发展，导致了胃癌的形成。TLR4/CD14基因突变可使机体的免疫系统失去正常处理胃腔HpLPS等病原分子的能力，进而使胃黏膜在其长期刺激下产生感染、炎症乃至癌变。TLR4基因突变可导致对LPS无反应，或LPS信号途径的抑制。野生型TLR4

5、的表达增强可使LPS信号传导增强。通过对TLR4基因Asp299Gly和Thr399Ile多态性的检测，未发现其896bp处AG和1196bp处CT的突变，提示此2个等位基因突变在中国湖北汉族人群中少见，说明TLR4基因不是胃癌的易感基因。就此我们对中国汉族人与日本人及德国人的TLR4Asp299Gly和Thr399Ile基因多态性分布进行了比较，中国汉族人与日本人的分布频率及基因型频率的分布无明显差异性，均未检测到突变体，但与德国人（9%）的突变频率存在显著差异性（P<0.0001）。欧洲人和亚洲人在该位点等位基因频率和基因型频率分布的不同，将有助于阐明不同种族和不同地区人群在疾病发生

6、机制上的差异。CD14基因位于5号染色体长臂（5q2331），CD14启动子区-159位点存在单个碱基的替换，该等位基因位于Sp1转录因子结合位点附近，主要影响CD14的表达，且TT纯合子患者单核细胞表面CD14的表达密度。有研究认为在-159位点的T/C的突变可能导致CD14启动子的活化增强，促进CD14基因的转录，使单核细胞高表达CD14，且CD14可以调节LPS诱导的IL1及TNF的分泌，从而使炎症应答增强。因此，CD14159基因多态性可能是导致个体在对Hp感染的免疫应答中不同的CD14表达水平及免疫应答程度的基因方面的因素。为此我们对该位点的多态性进行了检测，发现TT基因型在非贲门胃

7、癌患者中（45.35%）高于正常人群（29.2%），二者存在显著差异，T等位基因亦显著高于对照组(P=0.0078)。当我们按照Hp的感染情况分组后，我们发现非贲门胃癌Hp+组TT基因型亦高于对照组Hp+组。我们的结果表明CD14159位点TT纯合子或者T等位基因可能是Hp+非贲门胃癌的易感基因。此外，CD14附近以及与CD14连锁的其他基因多态性也可能影响疾病的表型与预后，因此，对CD14邻近的基因也需做进一步的研究。 阅读次数：人次 药学毕业论文医学检验论文心理健康论文临床医学论文护理医学论文医学教育论文医学科技论文循证医学论文内科医学论文生物医学论文基础医学论文临床医学论文妇产科学论文口

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