5月份工作总结.doc
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1、5月份工作总结5月份工作总结5月份工作总结一田间工作这个月在田间主要帮张师兄测株高,刘师兄育苗和挂牌。二实验室1遗传差异实验(1)发苗5.2号总在育苗盘中发了33个亲本和杂交组合(详见下表)的苗,每个组合五穴,每穴丢三颗种子。CMo17Mo1718白C478478自330C黄早四*A619C48-248-2A619C黄早四黄早四C478C48-2*18白C黄早四Mo17C黄早四*47848-248-2*18白CMo17黄早四C478*自330C48-2C黄早四Mo17478C478*48-2CMo17*48-2黄早四黄早四Mo17C48-2*478黄早四目前在这个扩大后的群体CMo17Mo17
2、C478478C48-248-2C黄早四黄早四C478C48-2*18白C黄早四Mo17C黄早四*47848-218白自330A619C478C48-2*A619C黄早四47848-2*自330黄早四Mo17C48-2*478黄早四478CMo1748-2*18白C478*自330黄早四C48-2C黄早四Mo17478C478*48-2CMo17*48-2黄早四黄早四中,只有以下六个组合C47848-2C48-2*A619待多营取材478*自330待多营取材黄早四478*18白无种子还没有发苗,准备让徐浩师兄帮我取样。478*18白这个组合无种子,暂时待找到种子。(2)DNA提取以下是育苗20
3、天后的生长情况图片图一育苗结果图二育苗结果图三育苗结果图四育苗结果将这33组合中得C48-2和48-2全部提取DNA,其他组合随即选取三株提取DNA,编号如下:组合提取个数编号C48-238S148-234S2A6193S3C48-2*18白3S4C478*18白3S5C黄早四*18白3S6黄早四*18白3S7C478*黄早四3S8C478*Mo173S9C478*48-23S10CMo17*48-23S11CMo17*4783S12CMo17*黄早四3S21C48-2*黄早四3S14C48-2*4783S13C48-2*Mo173S15C黄早四*4783SC黄早四*48-23S17C黄早四*
4、Mo173S18CMo173S19C4783S20C黄早四3S22Mo173S234783S24黄早四3S2518白3S26自3303S27C黄早四*A6193S2848-2*18白3S29CMo17*自3303S30C478*自3303S31C黄早四*自3303S32C48-2*自3303S33选取所提取的部分DNA对其浓度进行测定和1%的琼脂糖电泳检测,结果如下:图五DNA检测结果2RNA提取RNA的提取和DNase处理实验前准备:为防止RNA降解,金属、玻璃器皿180高温处理6h以上,塑料制品用0.1%的DEPC水浸泡处理,高温灭菌后烘干使用,所用试剂溶解液需用0.1%的DEPC水溶解,
5、实验过程中需带灭菌的手套进行。RNA的提取使用Trizol法,步骤严格按照说明书要求进行。(1)取0.1g的叶片于液氮预冷的研钵中,加入液氮,迅速研磨,加入1ml的Trizol覆盖,待液体完全融化后,继续研磨直至液体透明清亮。将液体转入1.5ml离心管,室温放置5min,使其充分裂解,4下12022rpm离心5min;(2)取上清于另一1.5ml的离心管中,加入0.2ml氯仿,充分振荡混匀3040s,室温放置5min,4下12022rpm离心10min;(3)弃沉淀,取上清于另一1.5ml的离心管中,加入等体积的异丙醇,混匀后室温放置510min,4下12022rpm离心10min;(4)弃上
6、清,RNA沉于管底,用75%乙醇洗涤RNA沉淀,温和振荡离心管,悬浮沉淀,4下12022rpm离心3min;(5)尽量弃上清,室温晾干或真空干燥510min,干燥后加入40lDEPC水溶解RNA;(6)RNA的DNase处理。反应体系如表4:表4.PCR反应体系Table4PCRreactionsystem药品RNADNaseI(5U/l)RNase-FreeH20RNasin(40U/l)10DNaseI缓冲液用量10-20g2l加至50l0.5l5l以上成分37温浴30min后,适量的RNase-Free水溶解,并于-70保存。且用核酸蛋白仪测定RNA样品的OD260/OD280值,测定其
7、纯度和浓度。用1.0%琼脂糖凝胶电泳,更换新的0.5%TBE缓冲液,电压140V,快速检测RNA。结果如下图:从图中可以看出RNA提取结果不好,RNA发生降解,主要原因可能是操作的原因,也可能是实验前准备工作没做好,以后一定要花大力气改进,争取提取出可用的RNA。三文献阅读本月由于田间劳动的原因,只读了三篇中文文献,两篇英文文献,中文文献1基因表达调控与选择性剪接机制研究这篇文章是2022年发表在电子学报上的文章,由于当时还没有高通量测序技术,所以是以cds序列通过EST来研究RNA可变剪接的机制以及影响因素,这篇文章的两点就是建立了AsMaIndb并进行了多序列比对算法ASALIGN,没有进
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