2022年微生物检验中级基础知识总结 .pdf
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1、学习必备欢迎下载鼠 疫病 原G-鼠疫耶尔森菌(该属共11 种,鼠疫、小肠结肠炎(冰箱病,O3 群) 、假结核致病) 。杆菌,无芽孢。血,淋巴液,咳痰,咽拭子,脑脊液。低温保存运送。赫氏琼脂,玻璃渣样菌落, 加血培养有花边边缘薄而透明不整齐菌落,可 4冷增菌, 一般 28培养。 F1 抗体双份血清滴度4 倍增高诊断。霍 乱病 原G-霍乱弧菌, O1(无荚膜 ) O139(有荚膜),无芽孢,单端1 根鞭毛。 32 个噬菌体型,a-l12 个生物型, 1-6,a-f 为流行株, 1a,1b,1d 常见。粪便,流调食物或水源。TCBS或庆大霉素培养基,营养要求简单。玻片凝集或ELISA测定 O 抗原。
2、 GM1-ELISA或杀弧菌抗体试验检测IgA 。伤 寒与 副伤 寒病 原G-沙门菌,无芽孢,有鞭毛。血(1-2 周) ,粪便( 3-4 周) ,尿,骨髓,胆汁,水,食物,经口传播,室温,不能冷存。“ 玫瑰疹 ” 。血琼脂,营养琼脂,Mac,DHL,SS 形成中等大小,无色半透明表面光滑,边缘整齐菌落无溶血环。不发酵乳糖,蔗糖,发酵葡萄糖麦芽糖甘露醇,伤寒产酸不产气,副伤寒产气。O,H,Vi,M抗原,伤寒O凝集价 1:80 以上, H 在 1:160 以上,副伤寒H 1:160 以上有诊断意义。沙门菌血清学位相变异试验所用培养基:0.7-0.8% 半固体琼脂培养物淋 病病 原G-奈瑟菌,需2.
3、5-5%CO2 生长,感染后不侵入血液,生殖道脓性分泌物或子宫颈口分泌物,保温保湿,WHO 推荐培养法检查女病人,巧克力血琼脂平板或T-M 培养基。梅 毒病 原G-梅毒螺旋体, I 期取硬下疳渗出液,II 期取梅毒疹渗出液或局部淋巴结抽出液,先天梅毒取母亲血清,神经梅毒取脑脊液。Fontana 染色棕褐色,人工培养基不易生长,接种兔睾丸或眼前房内,Nichols 株有致病力,Reiter 株无致病力可厌氧培养。白 喉病 原G+棒状杆菌属中致病力最强的,无荚膜,无鞭毛,无芽孢,一端或两端膨大,栅栏状或“V”“Y”“Z” 等形状,亚碲酸钾培养基(筛选,呈黑色或黑灰色菌落,圆形稍隆起菌落),吕氏血清
4、斜面,哥伦比亚血培养基(培养,呈乳白色,圆形,稍隆起,有光泽菌落),铁影响外毒素产量,ELISA 检测双份IgG 4 倍升高可诊断,1978 年开始百白破计划。百 日咳 病原 G-杆菌,鲍特菌属,含青霉素G 的包 -姜培养基用于咳碟法取样,或鼻咽拭子,包-姜培养基上细小光滑凸起银灰色不透明珍珠状菌落,加血培养基有溶血环,光滑型S(I 相)向粗糙型R(IV 相)变异, II 和 III 相为过渡型,双份IgG 4 倍升高可确诊脑 膜炎 奈瑟 菌G-菌血症, 13 个血清群, A,B,C, 三群引起90%以上病例,不能取脑脊液时取血液,巧克力琼脂平板或血琼脂平板,发酵葡萄糖麦芽糖,不发酵半乳糖和蔗
5、糖,乳胶凝集试验检测抗原。玻片凝集法2-10 分钟检测。致 病性 链甲型溶血性链球菌,1-2mm 溶血环,草绿色, 。乙型, 2-4mm ,界线分明,完全透明, 。丙型,无溶血环,不致病。化脓性链球菌,肺炎链球菌(痰标本铁锈色),球 菌G+猪链球菌钩 端螺 旋体 G-人兽共患,问号钩体(致病),双曲钩体(非致病),有内鞭毛(轴丝)及外膜。黑线姬鼠,血液脑脊液,流调地表水,Korthorf 或 EMIH 培养基,双份血清抗体4 倍升高有诊断意义。接触疫水传播莱 姆病 G-伯道疏螺旋体,左旋,早起移行性环形红斑,蜱传鼠宿,血液尿液脑脊液,BSK 培养基, 微嗜氧, 双份血清抗体4 倍以上升高或单份
6、血清滴度256 倍以上有诊断意义,WB 最终确诊。布 鲁氏 菌G-无鞭毛,无芽孢,有荚膜,需氧,初次分离需5-10%CO2 ,营养要求高,人和家畜共患,血液,肝浸液琼脂培养基,商品布鲁斯琼脂,布鲁斯肉汤等,血清凝集试验为常用的诊断试验炭 疽病 原G+芽孢杆菌,人兽共患,有荚膜,产外毒素,毒素基因位于大质粒Pxo1 上,荚膜基因位于 Pxo2 上,渗出液,粪便,痰液,咽试子,血标本,动物脏器,流调土壤动物制品。显微镜检查G+巨大杆菌,染色见荚膜可诊断,血琼脂培养基,“ 毛玻璃状 ” ,“ 狮鬃样 ” 菌落,双份血清抗体4 倍增高。斑 疹伤 寒病 原G-流行性(普氏,体虱),地方性(莫氏,鼠蚤),
7、革兰染色不易着色,常用吉姆尼茨(菌体红背景绿)或吉姆萨染色,无芽孢无鞭毛,细胞内寄生,人工培养基不生长,切片不超过3-4um ,血标本,接种鸡胚(接种前38-39培养,湿度45-60%,接种后 32-35)或雄性豚鼠腹腔,Vero 或 L929 细胞培养, WTO 推荐的诊断金标准:间接免疫荧光法(IFA ) ,双份血清IgG 4 倍以上升高或单份血清160 倍以上有诊断意义。结 核病 原G+结核分枝杆菌(一定条件可形成L 型菌)和牛分枝杆菌,直或弯曲细长杆菌,V Y型或条索型,专性需氧,厚涂片抗酸染色光镜检查,液体培养基中菌膜生长,卡介苗 BCG 为减毒活疫苗,结核菌素试验测定皮肤迟发超敏反
8、应麻 风病原多形性,抗酸性,聚簇性,胞内菌,使细胞胞浆呈泡沫状,人工培养尚未成功,患者鼻咽膜或皮损处取材,临床检查,皮肤切刮法涂片查菌,组织病理学检查,抗酸染色或改良的Fite 染色法空 肠弯 曲菌 G-夏秋季腹泻和旅行者腹泻主要病因之一,学龄前儿童发病率高,水和食物传播,人畜共患,粪便,选择性血平皿,42微需氧( 85%N2 ,10%CO2,5%O2 或烛缸法) ,25不生长,菌落不溶血,灰色扁平湿润有光泽像水滴边缘完整发亮,氧化酶和过氧化氢酶阳性,产H2S,马尿酸水解试验阳性幽 门螺 杆菌取胃粘膜活检组织,涂片或病理组织S-W 银染色,布氏培养基或脑心浸液血琼脂,针尖状或直径1mm 以下的
9、半透明菌落,营养丰富可达1-2mm ,尿素呼吸试验,IgG变化缓慢,一般不用于诊断精品资料 - - - 欢迎下载 - - - - - - - - - - - 欢迎下载 名师归纳 - - - - - - - - - -第 1 页,共 6 页 - - - - - - - - - - 学习必备欢迎下载军 团菌 G-杆菌,无荚膜无芽孢,有鞭毛,不产酸,培养需L-半胱氨酸,铁盐促生长,不易从口腔及咽部分离出,血液,痰液,尿液,流调取空调冷却水,BCYE- 培养基含酮戊二酸,双份血清抗体4 倍或单份血清抗体滴度256 倍以上有诊断意义流 感嗜 血杆 菌G-球杆菌,寄生于鼻咽部,婴幼儿易感,脑脊液,血液,胸
10、水,流调取耳鼻咽试子和痰液, 巧克力血琼脂培养,需 V 和 X 因子, 不溶血, 可生长于金葡球菌周围,呈 “ 卫星现象 ” ,cap 基因,外膜蛋白OMP1-6 ,抗体4 倍升高支持诊断,具有保护性的最低抗体水平0.05-0.15ug/ml 克 雷伯 杆菌 G-肺炎杆菌,兼性厌氧,有荚膜,痰标本砖红色胶冻样,痰液,浓汁,尿液,咽试子,血液,胸腹水,分泌液,脑脊液,粪便,血琼脂培养基,麦康凯琼脂平板,发酵乳糖,呈有色菌落,O 抗原 K 抗原, magA 基因用于诊断,rmpA 基因辅助诊断衣 原体 G-原核细胞,寄生,能通过滤器,发育分原生小体(感染阶段,具感染力)和网状小体(繁殖阶段,具增值
11、力),细胞膜呈有丝分裂繁殖,取淋巴脓肿的黏性材料,接种McCoy 细胞,碘染色或吉姆萨染色观察包涵体支 原体 G-缺乏细胞壁,原核细胞,独立生活自行繁殖的最小微生物,加压可通过滤器的最小孔径为0.22um,5 种支原体致病,取黏膜组织,营养丰富的培养基,菌落“ 油煎蛋 ”样,革兰染色不易着色,吉姆萨染色为淡紫色,Dienes 染色呈蓝色并不易褪色,除嗜血杆菌外不易着色,可用于鉴别,支原体培养为确诊的可靠方法之一,ELISA 检测外膜蛋白,WB 检测抗原, PCR 检测 16SrRNA,E,P1 ,tuf 等基因,双份抗体4 倍升高有意义1.G+菌有链球菌,白喉,结核分枝杆菌,金葡球菌,放线菌(
12、G+杆菌)2.国际单位制基本单位有长度,质量,时间,电流,热力学温度,物质的量,发光强度3.大肠菌群计数GB4789.3-2010 沙门菌检验GB/T4789.4-2010 培养基制备和质量控制GB/T4789.28-2010 食品微生物检验安全标准GB19489-2008 4.外毒素:金葡球菌肠毒素,产毒性大肠杆菌肠毒素,白喉毒素,痉挛毒素,肉毒毒素,表皮剥脱毒素,霍乱肠毒素。大肠菌素属于细菌素。5.脂多糖 LPS 为热原质的成分,包括:类脂A 耐热内毒素主要成分,核心多糖具有属特异性,特异多糖有种特异性,O 抗原6.局部致病菌: 志贺菌, 麻风杆菌全身致病菌: 铜绿假单胞菌, 布鲁氏菌,
13、白色念珠菌毒素致病菌:霍乱,破伤风,白喉,肉毒,金葡球菌繁殖致病菌:鼠疫,炭疽,流行性脑脊髓膜炎,斑疹伤寒免疫致病菌:链球菌引起的风湿病,肾小球肾炎7.肠致病性大肠埃希菌EPEC:毒力因子有O 抗原, H 抗原,菌毛,易污染产房引起严重腹泻,婴幼儿腹泻肠侵袭性大肠埃希菌EIEC :志贺样,侵犯肠粘膜,脓血粘液便,Sernery 测毒力,里急后重产肠毒素性大肠埃希菌ETEC :婴幼儿,旅行者腹泻,霍乱样,轻度水泻,产生不耐热肠毒素肠出血性大肠埃希菌EHEC :主要血清型O157:H7,肾衰竭, 严重水泻, 带血腹泻, 发热,腹绞痛,呕吐弥散粘附性大肠埃希菌EAEC/EAggEC :不致病,不侵入
14、肠上皮细胞,具有与Hep-2 细胞粘附的能力8.L 型菌分为: L 型,油煎蛋样, 中心致密, 透光性差,周边透明呈颗粒状。G 型,颗粒状,由透明颗粒组成,无核心部分。F 型,丝状,类似L。L 型菌致病特点:慢性,反复发作9.IMViC试验,杆菌(大肠埃希菌)呈+,产气杆菌+,鼠伤寒 +,伤寒 +,甲型副伤寒+,乙型副伤寒+ V 10.巴氏消毒61.1-62.8 30 分钟或 71.715-30s(常用)紫外线杀菌法260nm,革兰阴性菌敏感11.血清灭活补体常用温度:猪血清 56,豚鼠血清57,羊血清 58,驴血清 63新洁尔灭(苯扎溴铵)浓度:0.05-0.1% 12.抗体 Ig 两条轻链
15、( L 链,本 -周蛋白)和两条重链(H 链)组成,各自又可分为可变部分V 和恒定部分C 组成,木瓜酶水解IgG,可分为 2Fab+Fc, 胃蛋白酶可将其分解为F(ab )2+Fc ,Fab 位抗原抗体结合部位,Fc 为结晶部分,F(ab )2 是 2 个 Fab 连在一起的部分,可结合抗原, VH+VL是 F(ab )2 中的高变区,直接与抗原结合,Ig 分类主要依据H 链的结构特点,Fc 部分( CH)IgG:血清中含量最高,唯一能通过人类胎盘的,再次免疫应答的主要抗体,参与CFT 反应IgM :分子量最大,免疫应答早期产生的抗体IgA :经 J链连接形成多聚IgA ,与分泌片结合可抵抗蛋
16、白酶水解左右,旁路途径激活补体,参与黏膜局部免疫,母乳中含量多IgE:介导 I 型超敏反应,与肥大细胞Fc 受体结合,正常人血清中含量最少的抗体,慢性寄生虫感染时含量显著升高IgD:功能未知,可能与细胞识别或细胞分化有关,存在于B 淋巴细胞表面13.志贺菌:血清型葡萄糖乳糖甘露醇鸟氨酸脱羧酶A 群:痢疾志贺菌1-10 + 具有菌毛B 群:福氏志贺菌1-6 + + C 群:鲍特志贺菌1-18 + + D 群:宋内志贺菌1 + + + 宋内志贺菌常发生S-R 变异,形成扁平,粗糙型菌落。志贺菌血清学鉴定用三糖铁琼脂斜面培养物14.青霉素对病毒杀灭无效15.金葡球菌:烫伤样皮肤综合征16.小肠结肠炎
17、耶尔森菌:胃肠炎,败血症精品资料 - - - 欢迎下载 - - - - - - - - - - - 欢迎下载 名师归纳 - - - - - - - - - -第 2 页,共 6 页 - - - - - - - - - - 学习必备欢迎下载17.细菌素的作用:限制细菌DNA 的复制18.分支杆菌分为结核分枝杆菌,非结核分枝杆菌,麻风分支杆菌191956 年汤飞用鸡胚卵黄囊接种法首次分离沙眼衣原体,1950 年日本首次发现并分离副溶血性弧菌20.Klenow 片段具有5 -3 DNA 聚合酶活性和3 -5 外切酶活性肝 炎病毒甲型 HAV:小 RNA 病毒科,单正链RNA ,球形,粪口传播。乙型H
18、BV: 嗜肝 DNA病毒科,不完全双链环状DNA ,球形、管型、Dane 型颗粒,母婴传播,输血及血制品传播,性传播。丙型HCV: 黄病毒科,正链RNA ,球形,母婴,输血,血液性传播,性传播几率不高。丁型HDV :卫星病毒科,颗粒,缺陷病毒需在HBV 辅助下才能增殖,单负链环状闭合DNA ,HDV 抗原( HDAg ) ,血制品及吸毒传播。戊型 HEV :球形,无包膜,线状单正链RNA 病毒,粪口传播。抗H? V IgM 阳性,抗 H?V IgG 4 倍增高人 类免 疫缺 陷病毒1981 年首次报道, 1985 年我国发现首例,逆转录病毒科慢病毒属,球形,HIV-1 和HIV-2 型,包含两
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