《医学微生物学》第一篇　细菌学 第二十章衣原体.pptx

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1、第20章 衣原体chlamydia第一节 概述第二节 主要致病性衣原体重点难点熟悉了解掌握衣原体的概念、共同特征、形态染色与发育周期、培养特性和对抗生素的敏感性主要致病性衣原体所致的人类疾病及其致病机制衣原体感染的实验室检查方法与防治原则概 述summary第一节衣原体（Chlamydiae）是一类严格真核细胞内寄生，具有独特发育周期，并能通过细菌滤器的原核细胞型微生物，归属于细菌范畴。医学微生物（第9版）医学微生物（第9版）有细胞壁，革兰阴性，呈圆形或椭圆形具有独特的发育周期，以二分裂方式繁殖有DNA和RNA两种核酸（有原始的核质，无核膜、核仁）含有核糖体严格细胞内寄生具有独立的酶系统，但不

2、能产生代谢所需的能量，须利用 宿主细胞的三磷酸盐和中间代谢产物作为能量来源 对多种抗生素敏感衣原体的共同特性医学微生物（第9版）一、生物学特性1. 基因组 环状闭合的双链DNA，大小为1.01.24Mb 含有约7.5kb大小的质粒，为环状闭合的双链DNA，由8个开放阅读框（ORF）组成并编码8种蛋白医学微生物（第9版）2.发育周期发育周期包括两种形态： 原体（elementary body, EB）小而致密，有核质及细胞壁，位于胞外，为成熟的典型的衣原体，有感染性，无繁殖力。 网状体（reticulate body, RB）大而疏松，无核质及细胞壁，位于胞内，为衣原体的分裂象，无感染性，具有繁

3、殖能力。医学微生物（第9版）衣原体的发育周期图医学微生物（第9版）EB和RB的性状比较性状性状EBRB大小（大小（m） 0.20.4 0.51.0 细胞壁细胞壁-代谢活性代谢活性-胞外稳定性胞外稳定性强强弱弱感染性感染性强强无无繁殖能力繁殖能力无无强强RNA:DNA比比 1:13:1医学微生物（第9版）包涵体 （inclusion body）衣原体在宿主细胞内形成的由宿主细胞膜包裹EB和/或RB的空泡状结构 包涵体经Giemsa染色后呈深蓝色，碘染色呈褐色。 在发育周期的不同阶段，包涵体形态大小都有差异。 成熟的包涵体中含有大量的EB。医学微生物（第9版）Normal HeLa cells0

4、hour2 hour40 hour12 hour24 hourLegend:F-actinNucleiInclusion body 衣原体在HeLa细胞中包涵体的变化3. 培养特性 医学微生物（第9版）严格活细胞寄生可在HeLa、McCoy或HL等敏感细胞中培养可接种鸡胚卵黄囊可在小鼠中传代医学微生物（第9版）4. 抗原结构 属特异抗原：细胞壁的LPS，可区分衣原体不同的属 种特异抗原：位于主要外膜蛋白（MOMP）上 ，可鉴别不同种的衣原体 型特异抗原：根据MOMP可变区氨基酸序列的不同，可分为不同的血清型或生物型医学微生物（第9版）5. 抵抗力耐冷不耐热；对常用消毒剂敏感；对红霉素等大环内酯

5、类抗生素和四环素类、强力霉素类抗生素敏感。医学微生物（第9版）二、致病性和免疫性1. 致病物质 黏附素 肝硫素内毒素样物质 抑制宿主细胞代谢，直接破坏宿主细胞。 MOMP 与吸附、入侵及阻止吞噬体和溶酶体融合有关，有利于衣原体在吞噬体内存活； 易突变，可逃避机体的免疫应答。型分泌系统（T3SS） 可分泌效应蛋白与毒力蛋白，与致病有关。医学微生物（第9版）2. 所致疾病衣原体血清型感染部位所致疾病沙眼衣原体A，B，Ba，C眼沙眼DK眼包涵体结膜炎、新生儿眼炎DK生殖道（男）尿道炎，附睾炎，前列腺炎DK生殖道（女）尿道炎，宫颈炎，子宫内膜炎，输卵管炎， 肝周炎，流产，早产儿L1L3生殖道性病淋巴肉

6、芽肿DK呼吸道新生儿肺炎肺炎衣原体呼吸道咽炎，支气管炎，肺炎鹦鹉热衣原体（鸟株）呼吸道鹦鹉热，鸟疫人类致病性衣原体的感染部位与所致疾病医学微生物（第9版）二、致病性和免疫性3. 免疫性可产生特异性细胞免疫和体液免疫，以细胞免疫为主免疫力不强且短暂 ，易持续感染、反复感染可出现免疫病理损伤，由迟发型超敏反应引起主要致病性衣原体main pathogenic chlamydia第二节一、沙眼衣原体医学微生物（第9版）（一）生物学性状根据侵袭力和引起人类疾病部位的不同，沙眼衣原体可分为3个生物型 沙眼生物型（Biovar trachoma） 生殖生物型（Biovar genital） 性病淋巴肉芽肿

7、生物型（Biovar LGV）根据三个生物型MOMP表位氨基酸序列的差异，将沙眼衣原体分为19个血清型（二）致病性与免疫性医学微生物（第9版）沙眼衣原体主要寄生于人类，无动物储存宿主，主要引起以下疾病： 1. 沙眼 p 由沙眼生物型A、B、Ba和C血清型引起p 主要通过眼眼或眼手眼传播p 早期症状是流泪、有黏性或脓性分泌物、结膜充血及滤泡增生。晚期出现结膜瘢痕、眼睑内翻、倒睫等；也可引起角膜血管翳，导致角膜损害，影响视力或致盲医学微生物（第9版） 2. 包涵体结膜炎 p 由沙眼生物型B、Ba和生殖生物型D、Da、E、F、G、H、I、Ia、J、Ja及K血清型引起p 包括婴儿结膜炎经产道感染，引起

8、急性化脓性结膜炎（包涵体脓漏眼） 成人结膜炎经两性接触、经手至眼或污染的游泳池水感染，引起滤泡性结膜炎， 又称游泳池结膜炎医学微生物（第9版） 3. 泌尿生殖道感染p 由生殖生物型DK血清型引起p 经性接触传播p 男性多表现为尿道炎、附睾炎、前列腺炎、直肠炎等。 女性表现为尿道炎、宫颈炎、输卵管炎与盆腔炎、不孕不育等。医学微生物（第9版） 4. 婴幼儿肺炎p 生殖生物型DK血清型 5. 性病淋巴肉芽肿p 由沙眼衣原体LGV生物型L1、L2、L2a及L3引起p 人是LGV的自然宿主，主要通过性接触传播p 侵犯男性腹股沟淋巴结，引起化脓性淋巴结炎和慢性淋巴肉芽肿，常形成瘘管；亦可侵犯女性会阴、肛门

9、、直肠，引起会阴-肛门-直肠组织狭窄。LGV也可引起结膜炎并伴有耳前、颌下及颈部淋巴结肿大13-10（三） 微生物学检查法医学微生物（第9版）标本采集 眼结膜刮片，结膜分泌物 生殖道拭子、尿液 浓液或溃疡组织直接涂片镜检：Giemsa、碘液染色或荧光抗体染色镜检，观察有无衣原体或包涵体13-10医学微生物（第9版）分离培养：接种鸡胚卵黄囊或传代细胞系， 35培养4872h。再用IFA或 ELISA检测培养物中的衣原体衣原体抗原或核酸组分检测： 应用单克隆抗体通过ELISA检测临床标本中沙眼衣原体LPS或MOMP抗原； 以特异性引物通过PCR或链接酶链反应（LCR）等扩增技术检测沙眼衣原 体DN

10、A。13-10（四)防治原则医学微生物（第9版）注意个人卫生，避免直接或间接的接触感染广泛开展性传播疾病防治知识的宣传，积极治愈病人和带菌者对高危人群开展普查和监控，防止感染的扩散尚无有效的沙眼衣原体疫苗治疗药物可选用多西环素、罗红霉素、阿奇霉素、加替沙星等二、肺炎衣原体13-06医学微生物（第9版）（一）生物学性状 衣原体的新种，只有一个菌株TWAR 原体直径为0.38m，呈梨形 依据16S rRNA，23S rRNA，ompA基因序列和某些生物学特性比较分析将肺炎衣原体分为三个生物型：即人生物型、考拉生物型和马生物型 肺炎衣原体抗原主要有两种，即脂多糖（LPS）抗原和蛋白质抗原（二）致病性

11、与免疫性医学微生物（第9版）肺炎衣原体人生物型寄生于人类，在人与人之间经飞沫或呼吸道分泌物传播肺炎衣原体是呼吸道疾病的重要病原体，易引起肺炎、支气管炎、咽炎和鼻窦炎等，表现为咽痛、咳嗽、咳痰、发热等，一般症状较轻肺炎衣原体与冠心病、动脉粥样硬化等慢性病的发生密切相关以细胞免疫为主，体液免疫为辅，但免疫力不持久，可重复感染13-10（三） 微生物学检查法医学微生物（第9版） 标本采集常取痰标本、鼻咽拭子及支气管肺泡灌洗液 先直接涂片，观察包涵体；再以荧光或酶标记的种特异性单克隆抗体直接检测标本中肺炎衣原体抗原特异抗血清做GIT和MIT进一步鉴定 可采用组织培养或动物接种进行病原体分离，再通过Gi

12、emsa或Macchiavello染色观察原体或网状体。13-10医学微生物（第9版）微量免疫荧光试验（MIF） MIF可测定血清中的IgM和IgG抗体，有助于区别近期感染和既往感染，也有利于区别原发感染和继发感染 双份血清抗体滴度增高4倍或以上，或单份血清IgM抗体滴度1 16，或IgG抗体滴度1 512，可确定为急性感染，IgG1 16表示为既往感染。 采用PCR技术检测特异性16S rRNA基因或MOMP基因三、鹦鹉热衣原体13-06医学微生物（第9版）（一）生物学性状 鹦鹉热是由鹦鹉热衣原体引起的一种人兽共患疾病，在鸟类及家禽中传播，广泛分布于世界各地，一般呈散发型，偶有小范围的暴发或

13、流行。 原体直径为0.20.5m，呈球形或卵圆形。网状体直径为0.61.5m，呈球形或不规则形态，原体在细胞空泡中增殖后形成碘染色呈阴性的包涵体 依据血清学分类法，鹦鹉热衣原体至少可以分为9个血清型，分别为A、B、C、D、E、F、E/B、WC和M56型 可用鸡胚卵黄囊、敏感细胞培养以及小鼠接种（二）致病性与免疫性医学微生物（第9版）主要经呼吸道吸入病鸟粪便、分泌物或羽毛的气雾或尘埃而感染，也可经破损皮肤、黏膜或眼结膜感染临床表现多为非典型性肺炎，以发热、头痛、干咳、间质性肺炎为主要症状，偶尔可发生系统性并发症，如心肌炎、脑炎、心内膜炎与肝炎、肝脾肿大等以细胞免疫为主13-10（三） 微生物学检

14、查法医学微生物（第9版） 标本采集常取患者血、痰标本或咽拭子 直接涂片，观察包涵体 可采用组织培养或动物接种进行病原体分离，再通过Giemsa或Macchiavello染色观察原体或网状体。13-10医学微生物（第9版） 采用重组鹦鹉热衣原体抗原进行IFA或ELISA法检测特异IgM抗体（滴度1 16）作为早期、特异诊断 采用PCR技术检测特异性16S rRNA基因或MOMP基因13-10（四)防治原则医学微生物（第9版）严格控制传染源，对饲养的鸟类与禽类加强管理，避免鹦鹉热衣原体的传播和流行加强易感人群的防护，对进口的鸟类和禽类应加强检疫确诊后及早使用四环素类、大环内酯类或喹诺酮类抗生素彻底治疗 本章节概括了衣原体的基本概念及其共同特征。衣原体具有独特的发育周期，可出现2种不同形态：原体和始体。原体具有细胞壁，无繁殖能力，是发育周期的感染阶段；始体是感染细胞内的繁殖阶段，无细胞壁，具有繁殖能力，无传染性。在感染细胞内形成各种类型的包涵体，有鉴别衣原体的意义。对人致病的衣原体主要有沙眼衣原体、肺炎衣原体和鹦鹉热衣原体，这些衣原体可通过多种机制能引起机体多种疾病，如沙眼、泌尿生殖道感染和肺炎等。实验室诊断包括直接涂片镜检、分离培养、血清学试验与核酸检测。预防措施主要是注意个人卫生，避免接触感染。治疗可选用四环素类、大环内酯类和喹诺酮类药物。