2022年HDN实验设计实验报告.docx

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1、精品学习资源封面欢迎下载精品学习资源作者： PanHongliang仅供个人学习二级学院：检验学院教研室：临床检验学临床输血与检验创新性试验设计欢迎下载精品学习资源试验名称母婴 Rh血型不合的新生儿溶血病检查 的试验设计专业：医学检验层次：本科年级： 2021小班：课姓名性别学号备注题组主要成员王千慧女10203070？林日娟女10203070229钟晓女10203070230陈远晓女10203070232卢雪如女10203070217卢宇东男10203070？周杰男10203070？朱虹亮男10203070233周伟泽男10203070？欢迎下载精品学习资源新生儿溶血病是由于母婴血型不合，胎

2、儿红细胞进入母体循环致使母体产 生了相应的IgG类抗体 . 该抗体作用于胎儿红细胞而引起的同种被动免疫性疾病.HDN 可引起婴儿贫血、黄疸、水肿、肝脾肿大，严肃者可导致胆红素脑病，引起新生儿死亡或智力发育障碍. 因此，对 HDN进行早期、精确的诊断有重要意义.新生儿溶血病的患儿血清学检测主要是“三项试验”，即：直接抗球蛋白 试验 DAT ；血清游离抗体测定试验；新生儿红细胞抗体释放. 但由于微柱凝胶技术利用分子筛效应和亲和效应，红细胞抗原与相应的抗体结合，经离心，便可检测血型、不完全抗体及作交叉配血试验，具有操作简洁、结果精确、敏捷且易于判读等优点，所以本试验设计主要接受微柱凝胶试验 和直接、

3、间接抗人球蛋白试验 以及相关的 帮忙检查 来对母婴 Rh 血型不合的新生儿溶血病作出诊断 . 一、试验设计（一）标本、试剂及器材标本：静脉血试剂：微柱凝胶试验 【抗人球蛋白凝胶微柱卡：含有抗人球蛋白（抗IgG+C3）， 可用于检测 IgG 类不完全抗体（间接抗球蛋白试验），IgG 类不完全抗体（或） 补体致敏红细胞（直接抗球蛋白试验）】抗人球蛋白试验 【5%筛检红细胞（试剂红细胞，用于间接抗人球蛋白试验）、抗球蛋白试剂盒（商品试剂，用于直接抗人球蛋白试验）、IgG 包被的红细胞、生理盐水】器材：微柱凝胶试验 【微量吸样枪、微柱凝胶检测卡专用离心机】抗人球蛋白试验 【试管、记号笔、试管架、滴管、

4、乳胶吸头、吸量管、洗耳球、载玻片、离心机、显微镜、滤纸】（二）主要试验产前检查微柱凝胶试验（1） ）检测血型1. 将受检者红细胞（不用洗涤）配成1%生理盐水悬液，向已标记好的特异性凝胶微柱卡的微管反应腔内加 50 L.2. 马上与 1000 转每分钟，离心 10 分钟，观看结果3. 观看及判定血型结果：阳性：对比管细胞沉淀在管底，检测管凝集块在胶上或 胶中. 阴性：对比管和检测管的细胞沉淀均在管底. 试验失败：对比管细胞在胶上或胶中，重新试验 .4. 报告方式： RhD血型阴性 / 阳性（2） ）筛检和鉴定不完全抗体1. 取筛检红细胞或谱细胞悬液（ 1红细胞生理盐水悬液）各50L，分别加入标记

5、好的微管反应腔中 .2. 然后分别马上加入受检血清 25L.3. 将已加好反应物的凝胶卡放入 37 度孵育 15min.4. 取出凝胶卡马上以 1000r/min 水平离心 10min，观看结果 .5. 观看及判定血型结果：同血型检测 .6. 报告方式：筛检试验 阳/ 阴性.欢迎下载精品学习资源5. 观看：是否有凝块和溶血，并记录结果.产后检测可疑 Rh 等其他血型系统血型不合应在产生后尽早为好.微柱凝胶试验（1） ）检测血型1. 将父亲或母亲或婴儿红细胞（不用洗涤）配成1%生理盐水悬液，向已标记好的特异性凝胶微柱卡的微管反应腔内加50L.2. 马上与 1000 转每分钟，离心 10 分钟，观

6、看结果 .3. 观看及判定血型结果：阳性：对比管细胞沉淀在管底，检测管凝集块在胶上或 胶中. 阴性：对比管和检测管的细胞沉淀均在管底. 试验失败：对比管细胞在胶上或胶中，重新试验 .4. 报告方式： RhD血型阴性 / 阳性（2） ）筛检和鉴定不完全抗体1. 取筛检红细胞或谱细胞悬液（ 1红细胞生理盐水悬液）各50L，分别加入标记好的微管反应腔中 .2. 然后分别马上加入受检血清 25L.3. 将已加好反应物的凝胶卡放入 37 度孵育 15min.4. 取出凝胶卡马上以 1000r/min 水平离心 10min，观看结果 .5. 观看及判定血型结果：同血型检测 .6. 报告方式：筛检试验 阳/

7、 阴性.直接抗人球蛋试验1. 洗涤红细胞：完全悬浮细胞，用盐产水前后洗涤检查5 次. 最终一次洗涤后，弃掉全部盐水，将试管边缘盐水用滤纸吸干 .2. 加抗球蛋白：按试剂说明加最适稀释度抗人球蛋白血清1 滴，充分混匀 .3. 离心：血型血清学检查常规检查1000r/min 离心 1min.4. 观看：轻轻悬浮细胞，观看是否有溶血或凝集，有溶血为阳性，否就为阴性.产妇及5.其复丈核夫：阴性产者妇应血加清的不Ig规G 包被的胎红儿的细血胞型物1 滴，离外周心血并常观规检察查结果：胆凝红集素测：定表、示阴欢迎下载精品学习资源产妇及其丈夫R h 血型 D 抗原产妇血清的不规就抗体选择及筛婴儿的血清，确质

8、，确定胎儿血外周血常规检查血红蛋白、胆红素测定、羊水胆红素含量欢迎下载精品学习资源R h 血性型结D果抗可原 靠 . 就抗不体凝筛集选及：筛表示实定验胎无儿效血，型（必微须重做血. 红蛋白、羊水胆红素含量欢迎下载精品学习资源鉴定选阳性者效价检型（微柱凝胶实血涂片检查、测定欢迎下载精品学习资源（鉴三定）帮忙试验选（阳性母者亲效及价检刚产生疑柱凝有胶溶实血验胎、直儿或婴儿血）涂片检查、测定欢迎下载精品学习资源验、间接抗人球红细胞计数、欢迎下载精品学习资源1. 流式细胞仪检查血常规 ，包括接血抗人红球蛋蛋白实、红细胞红计细胞数计、数网、织红细胞计数、白细欢迎下载精品学习资源胞计数、血小板计数蛋试验）

9、 验）网织红细胞计网织红细胞计数、白细胞计数、白细胞计欢迎下载精品学习资源数、2. 血涂片检查细胞外形 ：特殊要观看红细胞是否有溶血数及、 凝块形成.3. 胆红素测定、羊水胆红素含量测定：胆红素氧化酶法测定总胆红素和结合胆红判定： Rh 血型阳性或阴性素，特异性高，手工判操断作：简便Rh快血捷型，阳也性适或合阴自性动化生化分析仪操作.（四）争论内容与方法的技术路线（以线路图的形式简要呈现）欢迎下载精品学习资源二、近五年参考文献（参照检验医学与临床杂志的投稿要求）1 兰炯采, 刘景汉 , 马红丽, 等. 新生儿溶血病 HDN 免疫血液学试验举荐方案 J.中国输血杂志 ,2021,225:95-1

10、00.2 宋宁, 陈静娴 , 李宏. 新生儿溶血病检测 / 兰炯采 , 贠中桥 , 陈静娴输血免疫血液学试验技术 , 北京: 人民卫生出版社 ,2021:45-573 潘纪春 . 庄远.PAN Ji-chun.ZHUANG Yuan . 新生儿溶血病血清学检查分析J.科学技术与工程 2021,1054 杨珊 . 新生儿溶血病血清学检测结果分析J.海南医学 .2021.20l139-1415 卢磊 , 刘 燕 . 微 柱 凝胶 技术 在新 生 儿 溶血 病检 测中 的 应用 J . 中 国现 代医生.2021.48136 杨秀丽 . 红细胞直接抗球蛋白试验阳性Rh 血型鉴定方法 J.国际检验医学

11、杂志.2021,3214:1609-1610.7 徐 玮. 新生儿溶血病免疫血液学检测进展 J.吉林医学 .2021,3412:2339-2340.三、设计创新及存在问题传统的试管法抗球蛋白检查方法在手工操作中受到血清与红细胞比例、离心速度和时间等因素的干扰，操作过程中需反复洗涤红细胞. 结果判定人为影响因素较多，重复性较差；而且在洗涤过程中由于抗原和抗体之间的亲和力较弱，抗体易被洗脱掉，易显现假阴性 . 微柱凝胶技术是建立在传统血型血清学基础上的一项免疫学检测技术，是通过调剂凝胶的浓度来把握凝胶间隙的大小，利用离心力将抗原和抗体反应后的凝集红细胞留在微柱上端或分布在凝胶中，未凝集红细胞通过间

12、隙到达微柱底部. 同时不用洗涤红细胞可使抗人球蛋白被残留蛋白质中和，抗人球蛋白被洗涤后残留的盐分稀释所产生的假阴性不再发生 . 因此，微柱凝胶法与传统试管法相比，具有操作简便、敏捷、易于标准化、影响因素少、重复性好、结果可储存等优点，适用于大批量标本的 检测.欢迎下载精品学习资源四、评审成果2021年月日版权申明本文部分内容，包括文字、图片、以及设计等在网上搜集整理；版权为潘宏亮个人全部This article includes some parts, including text, pictures, and design. Copyright is Pan Hongliangs perso

13、nal ownership.用户可将本文的内容或服务用于个人学习、争论或观看，以及其他非商业性或非盈利性用途，但同时应遵守著作权法及其他相关法律的规定，不得侵害本网站及相关权益人的合法权益；除此以 外，将本文任何内容或服务用于其他用途时，须征得本人及相关权益人的书面许可，并支付酬劳；Users may use the contents or services of this article for personal study, research or appreciation, and other non-commercial or non-profit purposes, but at t

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