2022年实验研究报告医学论文范文医学实验研究报告范文.docx

《2022年实验研究报告医学论文范文医学实验研究报告范文.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《2022年实验研究报告医学论文范文医学实验研究报告范文.docx（47页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、精品学习资源锌和维生素 E对型糖尿病大鼠心肌 Livin 表达的影响医学论文发表 创新医学网 作者：张婷张端莲作者单位： 武汉高校基础医学院人体解剖与组织胚胎学系武汉430071【摘要】目的：探讨锌 Zn和维生素 EVE对糖尿病大鼠心肌细胞爱护作用的机制；方法：按体重将大鼠随机分为正常对比组10只和试验组 40只,试验组动物采纳腹腔注射链脲左菌素 streptozotocin， STZ，60mg/kg一次注射，制备糖尿病大鼠模型；将 40只按血糖值参考体重分为 4组:糖尿病对比组 ,糖尿病补锌组 ,糖尿病补 VE组,糖尿病补Zn+VE 组；6周后将各组大鼠处死 ,切取心室肌组织 ,进行免疫组织

2、化学染色 ,观看各组心肌组织 Livin 的表达水平 ,利用 HPIAS 2000图像分析系统测定 Livin 在以上各组中表达的平均光密度和平均阳性面积率；结果：正常对比组心肌细胞内 Livin 呈阳性表达 ,糖尿病对比组心肌细胞内 Livin 呈阴性表达；糖尿病补锌组和糖尿病补VE组心肌细胞内 Livin 呈强阳性表达；糖尿病补 Zn+VE 组心肌细胞内Livin 呈弱阳性表达；图像分析结果显示：糖尿病补Zn+VE组与糖尿病对比组、糖尿病补锌组及糖尿病补 VE组之间 Livin 的平均光密度及阳性面积率的差异有显著性意义 P；糖尿病补 Zn+VE组与正常组之间 Livin 的平均光密度及阳

3、性面积率的差异无显著性意义P欢迎下载精品学习资源005；结论：Zn和VE联合使用可对糖尿病大鼠心肌细胞具有重要的爱护作用；【关键词】 锌； 维生素E； 糖尿病； 心肌； Livin糖尿病diabetesmellitus,DM 是一类由于胰岛素肯定或相对缺乏或胰岛素生物活性降低,或者以上二者共同引起体内代谢失调及高血糖状态；临床上主要分为2 型,即1 型糖尿病和型糖尿病 1；型糖尿病 ,或称胰岛素依靠性糖尿病 IDD属于自身免疫性疾病；机体对自身胰腺 细胞进行连续攻击 ,造成细胞大量破坏 ,胰岛素分泌严峻匮乏；型糖尿病的发病是由于机体对胰岛素产生抗击 ,同时合并胰岛素分泌的相对不足 2 ；近几年

4、来 ,糖尿病的发病率连续增长；截止到 1997年,全世界糖尿病患者为 12亿4 千万,其中97 %属于型糖尿病 3；随着生活方式的转变 ,经济的发展,以及人口结构变化 ,到2021年,全球糠尿病患者将达到 22亿1千万；在中国 ,糖尿病的患病人口为 20004000万,并在以年发病率 75万人的速度递增；如何有效掌握糖尿病及其并发症是当前世界医学领域关心的课题；欢迎下载精品学习资源糖尿病性心肌病是糖尿病的慢性并发症之一,是糖尿病发病过程中特异性的心肌受损和心脏功能转变 ,糖尿病性心肌病的显现可以不伴有缺血性病变、血管病变及高血压等并发症；目前有关糖尿病性心肌 病的准确病因仍不清晰 ,但认为糖尿

5、病性心肌病的发生主要与心肌能量代谢紊乱、 Ca2+超载、血管动脉硬化、氧化应激、高血压及高血糖导致的心肌细胞凋亡等有关 4 ；细胞凋亡是由多种因子介导的细胞主动死亡的过程,对机体或组织维护内环境的稳固和生物体的生长发育、生命周期、衰老死亡都有着重要的作用；在凋亡的调剂因素中 ,凋亡抑制蛋白家族 inhibitorof apoptosisproteins,IAPs是新发觉的一类在结构上具有同源性的细胞凋亡抑制 蛋白,它不仅抑制天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶Caspases的活性使细胞凋亡受阻 ,同时仍调剂着细胞分裂、细胞周期及信号传导等多个重要环节 ,其成员 livin 是新发觉的凋亡抑制基因 ,

6、它可以作为一种酶抑制剂通过 BIR 结构域与激活的 Caspases蛋白，如欢迎下载精品学习资源Caspase3、Caspase7等结合，导致 Caspases蛋白的失活和降解； Caspase蛋s白是介导凋欢迎下载精品学习资源亡的主要因素之一，大多数刺激物通过激活Caspases蛋白的级联反应而引起凋亡 57 ；欢迎下载精品学习资源Zn作为机体必需的微量养分元素 ,是体内 200多种蛋白酶的金属配基 ,其含量的增加势必有利于这些酶活性的提高； Zn对细胞爱护作用的途径之一 ,是基于掌握过氧化作用； VE作为自然抗氧化成分 ,对维护体内自由基平稳 ,促进机体正常发育 ,爱护细胞膜稳固具有重要作

7、用；锌和维生素 E是抗氧化剂并具有细胞爱护作用；本争论应用免疫组织化学方法观看了锌和维生素E联合应用对高血糖引起的心肌细胞的爱护作用，旨在探讨两者对糖尿病大鼠心肌结构的爱护作用；1 材料与方法1.1 材料昆明种SD大鼠50只,雄性,体重180 200g,武汉高校医学院试验动物中心供应 ,适应饲养 1w后进行试验；欢迎下载精品学习资源1.2 方法1.2.1 动物模型建立及分组按体重随机分为正常对比组 10只和试验组 40只,各组大鼠禁食 12 h后,试验组大鼠以 60mg/kg的剂量一次性腹腔注射 STZ溶液用0.1mol/ L、pH4.4的枸橼酸盐缓冲液在冰浴下配制成 11mg/ml的STZ

8、溶液,正常对比组大鼠 NC 注射等体积的枸橼酸盐缓冲液；观看动 物饮水、进食及尿量变化等情形；一周后,采尾静脉血测血糖 ,以血糖浓度 16.6mmol/ L ,饮水量 40 ml/ d ,尿糖强阳性 + + + + + + 的大鼠作为糖尿病大鼠；将选取糖尿病大鼠40只按血糖值参考体重分为 4组:糖尿病对比组 ,糖尿病补锌组 ,糖尿病补 VE组,糖尿病补 Zn+ VE组；各组动物均喂饲人工合成饲料 ,配方:酪蛋白 20 % ,玉M淀粉65% ,植物油 8% ,纤维素 1% ,混合维生素 1% ,混合无机盐 5%；混合维生素和无机盐配方参见文献 5,合成饲料掌握锌浓度为 20mg/kg；正常对比组

9、和试验组赐予去离子水；补 Zn组赐予Zn浓度为 20 mg/L 的含ZnSO47H2O去离子水；补 VE组每天以 50mg/kgVE 灌胃； Zn和VE联合补充组在赐予 Zn浓度为 20mg/L 的含ZnSO47H2O去离子水的同时以 50mg/kgVE灌胃；试验期间 ,亲密观看动物进食和饮水量变化 ,每周称两次体重,6周后将各组大鼠处死 ,切取心室壁肌组织 ,进行免疫组织化学试验观看；欢迎下载精品学习资源1.2.2 主要试剂即用型兔抗鼠 Livin 单克隆抗体 北京中杉生物技术有限公司 ；超敏即用型SP通用型免疫组织化学试剂盒 福州迈新公司 ；DAB 显色试盒及多聚赖氨酸北京中山生物技术有限

10、公司 ；1.2.3 免疫组织化学 SP法检测 Livin 相关抗原主要步骤： 组织切片 5 m，常规脱蜡至水，蒸馏水洗；3%过氧化氢， 37孵育 10min以抑制内源性过氧化物酶活性，PBS洗45min； 切片采纳微波抗原修复 3档， 10 min， PBS洗45min； 正常羊血清 37孵育 10 min以削减非特异性反应；欢迎下载精品学习资源 一抗37孵育 1h，PBS洗45min； 生物素标记的二抗， 37孵育 10 min， PBS洗45min； 链霉菌抗生物素蛋白37孵育 10 min，PBS洗45min； DAB 显色液显色，自来水冲洗终止反应； 苏木精复染，脱水，透亮，封片；用P

11、BS代替一抗作为阴性对比；1.2.4 免疫组织化学结果判定以胞核或胞浆显现棕黄色颗粒为阳性反应；阴性对比除细胞核染成蓝色外，胞浆内无棕黄色反应物；采纳HPIAS-2000高清晰度彩色病理图文报告治理系统 同济千屏影像公司 对Livi n的表达进行定量分析，每张切片随机选取5个完整而不重叠的高倍欢迎下载精品学习资源镜视野 400，测定每个视野下阳性反应的平均光密度、阳性反应 面积和全部细胞总面积，运算阳性面积率；以每例5个视野的平均光密度、阳性面积率的平均值作为该例的测量值阳性面积率 =单位面积中阳性反应的总面积 /单位面积中细胞的总面积 100%；1.2.5 统计学处理对各组免疫组织化学反应阳

12、性颗粒的平均光密度、阳性面积率作单因素方差分析和 SNKq检验，检验水准 为0.05；2 结果Livin 的表达正常对比组心肌细胞胞核和胞浆内可见密集分布的棕黄色颗粒，Liv in表达呈阳性 ,糖尿病对比组心肌细胞核和胞浆内可见少量的棕黄色颗粒,Livin 表达呈阴性；糖尿病补锌组心肌细胞核和胞浆内可见一些棕黄色颗粒,Livin 表达呈弱阳性，糖尿病补 VE组结果与糖尿病补锌组相同；糖尿病补Zn+VE 组心肌细胞核和胞浆内可见密集分布的棕黄色颗粒, Livin 表达呈阳性；图像分析结果显示见表；糖尿病补Zn+VE组与糖欢迎下载精品学习资源尿病对比组、糖尿病补锌组及糖尿病补 VE组之间平均光密度

13、及阳性面积率的差异有显著性意义 P；糖尿病对比组与糖尿病补锌组、糖尿病补 VE组之间平均光密度及阳性面积率的差异无显著性意义P0.05，见表 1；表1糖尿病补 Zn+VE 组、糖尿病对比组、糖尿病补锌组及糖尿病补 VE组Livin 表达的平均光密度和阳性面积率注：* 正常对比组与糖尿病对比组比较， P0.05；# 糖尿病对比组与糖尿病补 Zn+VE 组比较， P； 细胞的凋亡；每个因素对于维护 细胞总数的作用 ,都随着生长发育的不同阶段以及不同的代谢负荷而转变,甚至在不同的种族都有所不同这种差异在不同种的小鼠之间都有所表现；高浓度 Glucose使促凋亡和抗凋亡基因表达失衡 ,继而转变线粒体的

14、稳态、活化 caspa se系统,启动不行逆转的凋亡过程 8 10；临床上主要分为 2型,即1型糖尿病和 2欢迎下载精品学习资源型糖尿病 ,为一类常见病、多发病 ,发病率有愈来愈高的趋势；世界各国糖尿病患病率均上升 ,其中90%为2型糖尿病； WHO1997年报告,全世界糖尿病患者 1.35亿；近 20年来 ,中国糖尿病患病率从 1980年的0.6 7%上升至 1997年的3.2%,上升近 5 倍11；在非传染性疾病中 ,糖尿病死亡率仅次于肿瘤和心血管病而居第三位；胰岛素治疗使糖尿病急性并发症死亡率下降,但慢性并发症死亡率却因此而上升；其根本缘由在于对2型糖尿病的病因及发病机制的熟悉尚不清晰；

15、关于糖尿病的发病缘由,1型糖尿病已争论得较为深化 ,可能与 HLA 系统、基因突变等有关；关于 2型糖目前的熟悉是由遗传因素与环境因素共同作用,经由胰岛素抗击、细胞功能减退、临床糖尿病等不同进展阶段；糖尿病的发病较为复杂,明白仍远远不够；糖尿病患者在无明显微血管病变时也可显现心力衰竭 ,说明糖尿病患者心肌细胞本身可以发生结构和功能转变,提示有心肌病的可能 12；凋亡蛋白抑制因子 inhibitorofapoptosis protein,IAP 是一类重要的抗细胞凋亡因子 ,该家族结构的共同特点是N端含有一个或多个 目前发觉最多为 3个串联的杆状病毒 IAP重复序列baculovirusIAPr

16、epeat,BIR,C 端含或不含有一个环指 ring finger结构.目前人类 IAP 家族已发觉有 8个成员,即NAIP,XIAPILP 1/MIHA,cIAP1HIAP2/MIHB, cIAP2 HIAP1/MIHC,survivinTIAP,apollonBruce,ILP2Ts欢迎下载精品学习资源IAP 和livinMLIAP/KIAP；Livin 抗细胞凋亡作用：抗死亡受体介导的细胞凋亡作用:Vucic等13 将livin 基因转染乳腺癌 MCF7细胞,证明转染细胞对 Fas,TN FR1tumor necrosis factor receptor 1,DR4 death rec

17、eptor 4及DR5介导的细胞凋亡具有显著的抑制作用；Kasof等14 将livin 基因转染 HeLa细胞,结果显示转染细胞可有效阻断由FADDFasassociatedproteinwithdeathdo main,Bax,RIP,RIP3及DR6诱导的细胞凋亡 ,livin 抗细胞凋亡的作用甚至略强于 Survivin. 在Jurkat人T淋巴细胞株中 ,livin 可明显抑制由 TNF 及抗CD95抗体诱导的细胞凋亡 ,其抗细胞凋亡作用强于 Bcl214；进一步争论说明 livin 抗细胞凋亡的作用依靠于 BIR 结构的完整16；抗线粒体介导的细胞凋亡作用 :星状孢子素 Stauro

18、sporine, STS是一种蛋白激酶 CPKC抑制剂 ,可诱导线粒体释放细胞色素 C, 后者可进一步激活细胞凋亡的下游通路；Livin对STS诱导的 Jurkat细胞凋亡表现出肯定的抑制作用,但作用弱于Bcl欢迎下载精品学习资源2；而livin就无此作用 ,显示了 livin和livin的抗细胞凋亡作用存在欢迎下载精品学习资源肯定差异 17 ；抗化疗药物介导的细胞凋亡作用 :很多化疗药物可导致细胞 DNA 的损耗而诱导细胞凋亡；转染 livin 基因的 MCF7细胞可有效对抗阿霉素 ,4TBP4tertiary butylphenol诱导的细胞凋亡 18 ；欢迎下载精品学习资源Livin可显

19、著抑制依靠泊苷 etoposide诱导Jurkat细胞凋亡；Livin 抗细胞凋亡调剂机制：抑制 Caspase途径:Livin 可与介导细胞凋亡的下游效应 Caspase即, 激活形式的 Caspase3和Caspase7结合,并抑制其活性； Livin 仍可与未加工的或断裂形式的 Caspase 9结合,可抑制由 Apaf1apoptosisproteinactivatingfactor 1,细胞色素 C及dATP诱导的 Caspase9激活作用；Livin 与Caspase的结合抑制作用具有高度的特异性和亲和性,这有赖 于其BIR 结构域的完整 ,BIR结构域内单个氨基酸的突变即可导致

20、livin 与Caspase的结合作用及 livin 抗细胞凋亡作用的明显降低甚至完全丧失19 ；激活 TAK1/JNK1 信号传导途径 : Livin 可激活 MAPmitogenactivatedprotein激酶 JNK1和JNK2,对JNK3无激活作用 ,而livin 对JNK1的激活作用远远强于 JNK2,并且是 livin 对抗TNF和ICE 介导的细胞凋亡作用的一条重要途径；JNK蛋白家族可直接由 MKK4/MKK7 激活,但livin 对JNK1的激活并不依靠于 MKK4/MKK7 信号途径,而是通过 TAB1/TAK1 途径实现；TAK1 是一上游 MAP3激酶 ,在TGF1

21、的刺激下可激活 JNK1； TAB1是TAK1的共反应子 coactivator,TAB1本身对于 JNK1无激活作用,但可促进 TAK1 介导的JNK1激活作用； Livin 可与TAB1 结合,并进一步激活 TAK120；此外,SMAC second mitochondrial activator of欢迎下载精品学习资源caspases及活性肽片段可与 livin 的BIR 结构域特异性结合 ,抑制livin 与 caspase的结合及其抗细胞凋亡作用；因此存在着由 SMAC介导的对 li vin抗细胞凋亡作用的负性调剂机制；Zn作为机体必需的微量养分元素 ,是体内 200多种蛋白酶的金

22、属配基 ,其水平的提高势必有利于这些酶活性的提高；Zn对细胞爱护作用的途径之一 ,是基于掌握过氧化作用 ,其作用机理 ,可能是竞争性结合膜蛋白上的巯基 ,有效地抵制它氧化成二硫键 ,阻挡脂质过氧化反应 ,从而爱护细胞膜的稳固性； VE作为第一线的抗氧化爱护剂阻挡脂质过氧化,在自由基攻击的早期 ,通过在生物膜中的自由基瘁灭作用 ,爱护细胞膜中的多不饱和脂肪酸21 23；含硒的谷胱甘肽过氧化物酶可在脂质过氧化物破坏细胞膜前就把它们清除掉； VE作为自然抗氧化成分 ,对维护体内自由基平稳 ,促进机体正常发育 ,保护细胞膜稳固具有重要作用； VE的分子结构上其酚羧基的氢原子可供应应自由基,使之仍原成脂

23、质氢过氧化物阻断生物膜上多不饱和脂肪酸的自身过氧化；并且VE仍可结合生物膜上 ,爱护生物膜免受自由基的攻击和氧化损耗；同时VE能增强GSH2Px的活性,并与GSH2Px 协同地终止脂质过氧化及与磷脂氢过氧化物谷胱甘肽过氧化物酶一起抑制微粒体膜磷脂过氧化；欢迎下载精品学习资源本试验通过免疫组织化学方法观看到 :正常对比组 Livin 表达呈阳性 ,糖尿病对比组 Livin 表达呈阴性；糖尿病补锌组 Livin 表达呈弱阳性， 糖尿病补 VE组结果与糖尿病补锌组相同；糖尿病补Zn+VE 组Livin 表达呈阳性；图像分析结果显示 :糖尿病补 Zn+VE组与糖尿病对比组、糖尿病补锌组及糖尿病补 VE

24、组之间平均光密度及阳性面积率的差异有显著性意义 P；糖尿病对比组与糖尿病补锌组、糖尿病补V E组之间平均光密度及阳性面积率的差异无显著性意义P0.05；说明Zn+VE联合作用后可削减由于高血糖引起的心肌细胞的凋亡,对心肌细胞起了重要的爱护作用；其准确机制仍有待于进一步争论探讨；【参考文献】1 Tilg H,Moschen AR.Inflammatory mechanisms in the regulation of insulin resistance,Mol Med,2021,1434:222 231.2 Mnzberg H,Myers MG.Molecular and anatomical

25、 determinants ofcentral leptin resistance,Nat Neurosci,2005,85:566 570.3 StarrR,WillsonTA,VineyEM,etal.Afamilyofcytokine-inducible欢迎下载精品学习资源inhibitors of signaling,Nature,1997,3876636:917921.4 Rnn SG,Billestrup N,MandrupPoulsen T.Diabetes and suppressorsofcytokinesignaling proteins,Diabetes,2007,562

26、:541 548.5 Hunter AM, LaCasse EC, Korneluk RG.The inhibitors of apoptosisIAPs as cancer targets. Apoptosi，s 2007，2:1543 1568.6 Song T, Hong BF, Gao JP, Zhang L, et al. Expression of apoptosis inhibitorgene Livininprostate cancer and itsclinicalimplication.National Journal of Andrology,2021,141:30 33

27、.7 Dean EJ, Ranson M, Blackhall F, et al. Novel therapeutic targets in lung cancer: inhibitorof apoptosis proteins from laboratory to clinic.Cancer Treat Rev ,2007,33:203 212.8张敬芳,王光浩.黄芪多糖对 2型糖尿病大鼠骨骼肌组织 GLUT4 表达的影响.时针国医国药 , 2007, 1811: 26522653.8 GarcaCompean D,JaquezQuintana JO,Maldonado欢迎下载精品学习资源G

28、arzaH.Hepatogenousdiabetes.Currentviewsofanancient problem.Ann Hepatol,2021,81:13 20.9 Raddatz D,Nolte W,Rossbach C,et al.Measuring the effect of a study meal on portal concentrations of glucagonlike peptide 1GLP 1 in non diabetic and diabetic patients with livercirrhosis: transjugular intrahepatic

29、portosystemic stent shuntTIPSS as a new method for metabolicmeasurements.ExpClinEndocrinol Diabetes,2021,1168:461467.10 Anonymous.Report of the Expert Committee on Diagnosis and ClassificationofDiabetesMellitus.Diabeles Care,1997,207:1183 1197.11 GarciaCompean D, JaquezQuintana JO, Gonzalez Gonzalez

30、JA,etal.Livercirrhosisanddiabetes:risk factors,pathophysiology, clinical implications and management.World J Gastroenterol,2021,153:280288.12 Holstein A,Hinze S,Thiessen E,et al.Clinical implications of hepatogenous diabetes in liver cirrhosis. J Gastroenterol Hepatol,2002,176:677 681.欢迎下载精品学习资源13 V

31、ucic D, Stennicke HR, Pisabarro MT,et al. ML IAP, a novel inhibitor of apoptosis that is preferentially expressed in human melanomas.Curr Biol, 2000,1021: 13591366.14 Li JH, He WJ, He YJ,Expression and clinical significance of Survivin and Livin in DukesoB colorectal cancer. 2007,26:547551.15 Nedelc

32、u T, Kubista B, KollerA, et al. Livinand Bcl2expression inhighgradeosteosarcoma. JCancer ResClin Oncol,2021,134:237244.16 Liu P, Wang TS, You SH, et al. Expression of livin in gastric dancer and effect of silencing of the livin gene on apoptosis in gastriccancer cells. Chinese Journal of Oncology,20

33、07,29:570 574.17 Kempkensteffen C, Hinz S, Krause H, et al. Expression of splicing variants of the inhibitor of apoptosis Livin in testicular germ cell tumors. Tumour Biol,2021,29:76 82.18 Liu HB, Kong CZ, Zeng Y , et al. Livin may serve as a marker for prognosis of bladder cancer relapse and a targ

34、et of bladder cancer欢迎下载精品学习资源treatment. Urol Oncol Epub ahead of print,2021.19 Chang H, Schimmer AD. Schimmer Livin/melanoma inhibitor of apoptosis protein as a potential therapeutic target for the treatment of malignancy. Mol Cancer Ther,2007, 6:24 30.20 CrnkovicMertens I, Wagener N, Semzow J, et

35、al. Targeted inhibition of Livin resensitizes renal cancer cells towards apoptosis. Cell Mol Life Sci,2007, 64:1137 1144.21 Bierhaus A, Schiekofer S,Schwaninger M, et al. Diabetes associatedsustained activation of the transcription factor nuclear factorB. Diabetes, 2001,5012:27922808.22 Kolodziejska

36、KE,BurnsAR, MooreRH, et al. Regulation of inducible nitric oxide synthase by aggresome formation.ProcNatlAcad Sci, 2005, 10213: 48544859.23 Bierhaus A,SchiekoferS,Schwaninger M,et al.Effectof selective cyclooxygenase2 inhibitoron the renal lesion of streptozocin induced diabetic rats and its possibl

37、e mechanism. Natl Med J China,2002, 821: 239243.欢迎下载精品学习资源锌和维生素 E对糖尿病大鼠心肌 COX2表达的影响 医学论文发表 创新医学网 作者：陈敏张端莲作者单位：武汉高校基础医学院人体解剖与组织胚胎学系武汉430071【摘要】目的：争论锌和维生素 E对糖尿病大鼠心肌 COX2表达的影响 ,以此探讨锌和维生素 E对糖尿病心肌细胞爱护作用的机制；方法：按体重将大鼠随机分为正常对比组10只和试验组 40只 ,各组大鼠禁食 12h后,试验组大鼠以 60mg/kg的剂量一次性腹腔注射STZ溶液用0.1mol/L、pH=4.4的构橼酸盐缓冲液在冰浴

38、下配制成 11mg/ml的STZ溶液,正常对比组大鼠 NC 注射等体积的枸橼酸盐缓冲液；观看动物饮水、进食及尿量变化等情形；一周后,采尾血测血糖 ,以血糖浓度16.6mmol/L,饮水量40ml/d,尿糖强阳性 + + 的大鼠作为糖尿病大鼠；将选取糖尿病大鼠40只按血糖值参考体重分为:糖尿病对比组、糖尿病补锌组、糖尿病补VE组和糖尿病补 Z n和VE组；6周后将各组大鼠处死 ,切取心室肌组织 ,进行免疫组织化学的试验 ,观看各组心肌组织中 COX2的表达水平 , 利用HPIAS欢迎下载精品学习资源2000图像分析系统测定 COX2在以上各组中表达的平均光密度和平均阳性面积率；结果：正常对比组心

39、肌细胞内 COX2呈阴性表达 ,糖尿病对比组心肌细胞内 COX2呈阳性表达；糖尿病补锌组和糖尿病补 VE组心肌细胞内 COX2呈弱阳性表达；糖尿病补 Zn+VE组心肌细胞内 COX2呈阴性表达；图像分析结果显示，糖尿病补Zn+VE 组与糖尿病对比组、糖尿病补锌组及糖尿病补 VE组之间 COX2的平均光密度及阳性面积率的差异有显著性意义P；糖尿病补Zn+VE组与正常组之间 COX2的平均光密度及阳性面积率的差异无显著性意义P0 05； 结论：Zn和VE联合使用可降低糖尿病大鼠心肌组织中 COX 2的活性,对糖尿病大鼠心肌细胞起了重要的爱护作用；【关键词】 锌 维生素E 糖尿病 心肌糖尿病diab

40、etesmellitus,DM 是一类由于胰岛素肯定或相对缺乏或胰岛素生物活性降低,或者以上两者共同引起之体内代谢失调及高血糖状态1 ；临床上主要分为 2型,即1型糖尿病和 2型糖尿病 ,世界各国糖尿病患病率均上升 ,其中90 %为2 型糖尿病；欢迎下载精品学习资源糖尿病性心肌病是糖尿病的慢性并发症之一,是糖尿病发病过程中特异性的心肌受损和心脏功能转变 ,糖尿病性心肌病的显现可以不伴有缺血性病变、血管病变及高血压等并发症；目前糖尿病性心肌病的 准确病因仍不清晰 ,但目前认为糖尿病性心肌病的发生主要与心肌能量代谢紊乱、 Ca2+超载、血管动脉硬化、氧化应激、高血压及高血糖导致的心肌细胞 凋亡等有

41、关；糖尿病时 ,高血糖引起的氧化应激参加了心肌细胞的损耗；糖尿病在病理组织形状上主要是由于胰岛损耗,胰岛素肯定或相对缺乏所引起 2；近年来 ,国内外很多学者经过临床和流行病学调查,以及周密设计的基础争论和试验争论 ,虽然对糖尿病的病因有了较多的熟悉 ,但对原发性糖尿病的病因仍旧不清晰；因此对糖尿病的治疗也就成了目前人们所关注的焦点；环氧化酶又称为前列腺素内过氧化合成酶,前列腺素 H合成酶,是催化花生四烯酸转变为前列腺素的限速酶； COX2属于诱导型 ,静息时不表达 ,但可以在细胞因子、激素、致癌物质等多种诱导因子的刺激下快速表达 ,参加多种病理生理过程 3 ；近年来争论说明 ,COX2不仅与病

42、理生理过程有关 ,与肿瘤的发生进展也有亲密的联系； CO X2的高表达与糖尿病并发症的发生亲密相关；欢迎下载精品学习资源Zn作为机体必需的微量养分元素 ,是体内 200多种蛋白酶的金属配基 ,其水平的提高势必有利于这些酶活性的提高4 ；Zn对细胞爱护作用的途径之一 ,是基于掌握过氧化作用 5 ；VE作为自然抗氧化成分 ,对维护体内自由基平稳 ,促进机体正常发育 ,爱护细胞膜稳固具有重要作用；锌和维生素E是抗氧化剂并具有细胞爱护作用；本争论应用免疫组织化学方法观看了锌和维生素E联合应用对高血糖引起的心肌细胞内 COX2的表达,旨在探讨两者对糖尿病大鼠氧化应激时心肌结构的影响及对心肌细胞的爱护作用

43、；1 材料与方法1.1 材料试验动物为昆明种 SD大鼠 50只,雄性,体重180200g,由武汉高校医学院试验动物中心供应 ,适应饲养 1w后进行试验；1.2 方法欢迎下载精品学习资源1.2.1 动物模型建立及分组按体重随机分为正常对比组 10只和试验组 40只,各组大鼠禁食 12 h后,试验组大鼠以 60mg/kg的剂量一次性腹腔注射 STZ溶液用0.1mol/ L、pH=4.4的构橼酸盐缓冲液在冰浴下配制成 11mg/ml的STZ 溶液,正常对比组大鼠 NC 注射等体积的枸橼酸盐缓冲液；观看动物饮水、进食及尿量变化等情形；一周后,采尾血测血糖 ,以血糖浓度 16.6mmol/ L ,饮水量 40 ml/ d ,尿糖强阳性 + + + + + + 的大鼠作为糖尿病大鼠；将选取糖尿病大鼠40只