2022年实验材料与试剂总结2.docx

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1、精品word学习资料 可编辑资料- - - - - - - - - - - - - - - -试验专题常用方法技术与药品试剂、基本的试验方法和技术（补充）1. 植物叶片生成淀粉的鉴定技术（ 1）适用于光合作用的有关试验（ 2） 主要步骤：饥饿处理 光照 -.酒精脱色 - -.加碘检验等2. 同位素示踪技术（1） ）噬菌体侵染细菌试验（2） ）光合作用中氧原子、碳原子转移的讨论试验（3） ）半保留复制试验（4） ）分泌蛋白的形成过程3. 植物杂交技术（1） ） 雌雄同花：花蕾期去雄+套袋+开花期人工授粉 +套袋（2） ） 雌雄异花：花蕾期雌花套袋+开花期人工授粉+套袋4. 育种技术（ 1）杂交育

2、种（ 2）人工诱变育种（ 3）单倍体育种（ 4）基因工程育种（ 5）细胞工程育种等；、试验中常用器材和药品的使用1. 斐林试剂与班氏试剂：可溶性仍原糖的鉴定-砖红色沉淀（水浴加热）2. 双缩脲试剂：鉴定多肽（蛋白质）与双缩脲紫色3. 苏丹川、苏丹 W:脂肪的鉴定（脂肪被苏丹川染成橘黄色,被苏丹”染成红色,用显微镜观看；也可向待测样液中滴加）4. 酒精：用于洗去浮色,配制解离液,叶片脱色,析出DNA （冷酒精）,提取叶绿体中的色素, 消毒处理,冲洗卡诺是固定液；5. 碘液：鉴定淀粉（蓝色）6. 吡罗红甲基绿（混合染色剂、现配现用）：甲基绿使DNA 出现绿色（细胞核, 面积小）, 吡罗红使 RNA

3、 出现红色（细胞质,面积大）7. HCI : 转变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞；使染色质中DNA 与蛋白质分别,有利于 DNA 与染色剂结合；解离；转变溶液pH8. NaCI : 配制生理盐水（ 0.9% 的氯化钠溶液,维护动物细胞的正常形状）及其他不同浓度的盐溶液,可用于测定动物细胞内液浓度；溶解（ 2moI/L ） 或析出 DNA （ 0.14moI/L ）9. NaOH : 用于吸取 CO 2 或转变溶液的 pH ,模拟细胞大小与物质运输关系试验中应用10. 健那绿染液：专一染线粒体的活细胞染料（健那绿溶解在生理盐水中制成健那绿染液,使活细胞中的线粒体出现蓝绿色）11. 蔗糖：配制

4、蔗糖溶液,用于测定植物细胞液浓度或观看质壁分别和复原12. 台盼蓝：台盼蓝使死细胞染成蓝色（正常的活细胞,细胞膜结构完整具有挑选透过性能够排斥台盼蓝,区分活细胞和死细胞；检测细胞膜的完整性）3+13. 20% 的肝脏研磨液、3% 的过氧化氢、 3.5% 的氯化铁溶液：用于比较过氧化氢酶和Fe 的催化效率；14. 可溶性淀粉、 3% 的蔗糖溶液、 2% 的新奇淀粉酶溶液：探究淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用试验（应当用斐林试剂检测,不能用碘液进行检验,由于蔗糖及其水解产物与碘均不变色）15. 3% 可溶性淀粉、 2% 的新奇淀粉酶溶液：探究温度对酶活性的影响（先分别保温再混合,不能用斐林试齐咻佥测,只能

5、用碘液检测,不能用H2O2 做本试验）16. 20% 的肝脏研磨液、3% 的过氧化氢：探究Ph 值对酶活性的影响（不能用淀粉酶催化淀粉探究探究 Ph 值对酶活性的影响）17. Ca（ OH ） 2 （澄清的石灰水）：鉴定CO 2 （混浊程度不同可说明有氧呼吸与无氧呼吸产生二氧化碳的多少18. 溴麝香草酚蓝水溶液：可检测CO 2 （由蓝变绿再变黄）19. 重铬酸钾溶液：橙色的重铬酸钾溶液,在酸性条件下与酒精发生化学反应,变成灰绿色（可 以检测酵母菌的呼吸方式,也可检验酒驾）20. 乙醇或丙酮：用于提取叶绿体中的色素21 .层析液：可用于色素的分别,即将色素在滤纸上分别开；22. 滤纸：过滤或纸层

6、析23. 二氧化硅：在色素的提取和分别试验中研磨绿色叶片时加入,可使研磨充分24. 碳酸钙：研磨绿色叶片时加入,可中和有机酸,防止在研磨时叶绿体中的色素受破坏25. NaHCO 3 :维护环境中 CO 2 浓度的恒定26. 改良苯酚品红染液、龙胆紫染液、醋酸洋红溶液（碱性染料）：用于染色体染色27. 秋水仙素：阻断纺锤体的形成, 使染色体加倍（人工诱导多倍体试剂；用于萌发的种子或幼苗,可使染色体组加倍,原理是可抑制纺锤体的形成）（低温也可抑制纺锤体的形成）28. 卡诺氏液：把经诱导处理的根尖放入卡诺氏液中浸泡0.5-1h , 以固定细胞形状29. 二苯胺：鉴定 DNA （蓝色,沸水浴）30.

7、柠檬酸钠：防止血液凝固,抗凝剂31. 洗涤剂：提取植物细胞中DNA 时瓦解细胞膜32. 琼脂：激素的转移或配制固体培育基33. PEG 试剂：促融剂（灭活的病毒也可作为促融剂）34. 氯化钙：增大细菌细胞壁的通透性35. 胰蛋白酶（胶原蛋白酶）：可用于动物细胞培育时分解组织使组织细胞分散开36. 木瓜蛋白酶：嫩肉粉的主要成分,催化水解蛋白质37. 蒸馏水：在观看DNA 、RNA 分布中配染色剂；缓水流冲洗载玻片 质壁分别及复原试验中,使发生质壁分别的细胞浸浴在蒸馏水中发生复原（引流法）- - -细心整理 - - - 欢迎下载 - - -第 3 页,共 3 页三.留意取材问题 暂时装片的制作（擦

8、、滴、取、放、展、盖） 有丝分裂试验中漂洗解离液 DNA 粗提取与鉴定试验中使血细胞吸水涨破；稀释NaCl 溶液 制备细胞膜时使细胞吸水涨破（引流法、差速离心法）等冷却 （防止高温杀死酵母菌 ）后再将食用酵母菌加入；酵母菌培育液应封口放置一段时间后,待酵母菌将瓶内的氧气消耗完,再连通盛有澄清石灰水的锥形瓶,以保证检测到的肯定是酵母菌无氧呼吸产生的CO2 使澄清的石灰水变混浊；（ 2 ）试验结果的检测（1） ）观看 DNA 、RNA 在细胞中的分布不能选用哺乳动物成熟的红细胞（无细胞核,也就几乎不含DNA 、RNA ）；（2） ）不能用观看叶绿体的材料来观看线粒体（ 叶绿体中的色素颜色会掩盖健那

9、绿染色后的颜色变化）；（3） ） 观看细胞的有丝分裂或低温诱导植物染色体数目的变化时,应留意观看呈正方形的根尖分生区细胞 （长方形的细胞可能是根尖的伸长区或成熟区的细胞,没有分裂才能） ；（4） ） 观看细胞的减数分裂所选的材料可以是动物的精巢和植物的雄蕊,而不宜选用动物的卵巢和植物的雌蕊 （雄配子的产生数量远远多于雌配子,更简单观看到减数分裂的细胞）；（5） ） 观看叶绿体时,如选用菠菜叶就取稍带些叶肉的下表皮（靠近下表皮的叶肉细胞中的叶绿体较大而数目较少 ） ；（6） ）观看植物细胞的质壁分别与复原应选取活的成熟的植物细胞（含有大的液泡 ）；四. 试验中留意问题1. 有关蛋白质的鉴定如用蛋

10、清进行蛋白质鉴定时,需将鸡蛋清用水稀释,通常是0.5 mL 蛋白液加入 5 mL 水,搅拌匀称；假如蛋白液稀释程度不够,与双缩脲试剂发生反应后会粘固在试管的内壁上,使反应不简单完全,并且试管也不简单刷洗洁净；鉴定蛋白质时,向样液中加入2mL 双缩脲试剂 A 摇匀,再向样液中加入3. 4 滴双缩脲试剂 B 摇匀；其中双缩脲试剂B 不能过量, 由于过量的双缩脲试剂B 会与试剂 A 反应,使溶液呈 检测 CO2 （观看石灰水混浊的程度、溴麝香草酚蓝溶液变成黄色的时间长短） 检测酒精的产生（酸性的重铬酸钾）4. 探究生长素类似物促进插条生根的最适浓度 装置的设计应有利于观看,如观看促进生根的试验可以用

11、水培法； 所设组别除不同浓度的生长素类似物处理外,仍要增加一组蒸馏水处理的做空白对比；5. 探究培育液中的酵母菌种群数量的动态变化 从试管中吸出培育液进行计数之前,要轻轻震荡几次,使酵母菌匀称分布,以确保计数精确, 削减误差； 该探究不需要设置对比,由于随着时间的连续,酵母菌种群数量的变化,在时间上形成前后自身对比 该探究不用重复,只要分组试验,求得平均值即可； 对于压在小方格界线上的酵母菌,应只运算相邻两边及其顶角的酵母菌； 试验终止后,用试管刷蘸洗涤剂擦洗血球计数板的做法是错误的,正确的方法是浸泡和冲洗；6. 观看叶绿体、线粒体选用藓类的小叶或者菠菜叶的下表皮（稍带叶肉）作观看叶绿体的试验

12、材料是试验胜利的关键,由于藓类叶片仅为一层细胞,菠菜叶的下表皮的叶肉细胞叶绿体大且数目少,便于观察；） 线粒体、叶绿体均需保持活性； 叶绿体,不需染色,可直接观看；线粒体用健那绿染色（活体染色剂） 观看线粒体一般选用动物或人体细胞,而不选用植物的叶肉细胞,其缘由是经健那绿染色的线粒体颜色为蓝绿色,与叶绿体颜色相近,会掩盖影响对对线粒体的观看7. 采纳差速离心法的试验有细胞膜的提纯分别各种细胞器蓝色,从而掩盖生成的紫色；2.探究温度 （ pH ） 对酶活性的影响时,必须在达到预设的温度（pH ） 的条件下,再让反应底物与酶接触,防止在未达到预设的温度（ pH ） 时反应底物已与酶接触发生反应,影

13、响试验结果；（ 1 ）温度对酶活性影响试验中8. 位素标记法）9. 引流法的应用细胞膜的制备质壁分别与复原10. 紫色洋葱可做哪些试验讨论 DNA 的复制方式用（答案：密度梯度离心法、同 不能用过氧化氢酶来完成此试验,由于过氧化氢受热易分解 不能用斐林试剂检测,由于斐林试剂的使用需要加热,加热会转变0C 组的试验结果（ 2） pH 对酶活性影响试验中：不能用淀粉、淀粉酶做此试验有丝分裂（根尖）、低温诱导染色体数目加倍（根尖）、质壁分别（洋葱鳞片叶外表皮）、观看 DNA 、RNA 的分布（洋葱鳞片叶内表皮）、观看线粒体（洋葱鳞片叶内表皮3. 探究酵母菌的呼吸方式时：11. 植物种群密度调查用（答

14、案：样方法、标志重捕法）（1 新配制的质量分数为5% 的葡萄糖溶液先加热煮沸 （杀死里面的微生物、除去溶液中的氧气） ,蚯蚓（活动才能比较弱的动物）的种群密度调查用（样方法） 调查动物丰富度用（取样器取样法统计动物丰富度（目测估量法、记名运算法）12. 关注酵母菌的常考学问点和留意问题（1） ） 酵母菌是单细胞真菌,即属于 真核生物（2） ） 代谢类型异养兼性厌氧型 （3） ）生殖方式 （4） ） 具有的核酸种类有DNA 和 RNA,其中遗传物质是DNA,是否遵循遗传规律 （5） ） 能发生的可遗传变异有基因突变、基因重组和染色体畸变（6） ）酵母菌不是种名,代表的是一类生物；（ 7） 在生态系统中的位置：大多数腐生,属分解者；少数寄生,属消费者,如葡萄表面的野生酵母；（ 8） 有细胞壁但成分既不是纤维素和果胶（植物）,也不是肽聚糖（细菌）；