2022年生化考研重点知识总结2.docx
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1、生化考研重点学问总结第一章 单糖多糖与碘显色,至少需要的葡萄糖残基数: 6-唾液淀粉酶激活剂 : Cl几个典型非仍原糖 : 蔗糖、糖原、淀粉形成 N-糖肽键的单糖或衍生物是:其次章 油脂几个非饱和脂肪酸双键数:.油酸: 1.亚油酸: 2.亚麻酸: 3人不能自身合成的必需脂肪酸: 亚油酸、亚麻酸四种脂类转运脂蛋白:. CM: 乳糜微粒,转运外源性三酰甘油酯. VLDL: 极低密度脂蛋白,转运内源性三酰甘油酯. LDL: 低密度脂蛋白,转运内源性胆固醇. HDL: 高密度脂蛋白,转运外源性胆固醇第三章 氨基酸与蛋白质几种主要氨基酸及三字母缩写.两特别: Pro、Gly.芳香: 酪( Tyr )色(
2、 Trp/Try,吸光最强 )苯( Phe).八种必需氨基酸:甲携来一本亮色书, Met/Val/Lys/Ile/Phe/Leu/Trp/Thr.侧链为羟基氨基酸:苏( Thr )丝( Ser )酪( Tyr ).酸性氨基酸:天( Asp)谷( Glu) 对应两酰胺: Asn、Gln.碱性氨基酸:赖( Lys)精( Arg)组( His ).其它: 丙氨酸( Ala )PI. PI 的运算: PI= (PK1+PK2)/2=PK1+PKRCOOH/2=PK2+PKRNH2 /2+-. PH 的运算: PH=PK1+Lg( R/R ) =PK2+Lg( R/R ). PH =7 的水中溶蛋白,
3、PH=6,就该蛋白PIPI 时有 R蛋白二级结构.螺旋: Sn=3.6 13 ,存在 Pro 时不形成螺旋,右手螺旋.折叠: 同/ 反向,肽键中H 与 O成氢键,轴距 0.35nm.转角: 转角处为 Gly超二级结构: 无规卷曲、结构域三级结构: 作用力( 二硫键、疏水作用力、氢键、静电离子键、范德华力)蛋白结构分析. N 端分析法: FDNB( Sanger)、 PITC( Edman)、 DNS-Cl(丹磺酰氯)、氨肽酶法. C 端分析法: 羧肽酶法、无水肼解法羧肽酶 A:不能水解 C 端为 Lys 、Arg、 Pro 的肽键; 羧肽酶 B: 能水解 C 端为 Lys 、Arg 的肽键;
4、C 端倒数其次位是Pro 时, A、B 都不能水解.打开二硫键:仍原法(巯基化合物,碘乙酸爱护)、氧化法(过甲酸).专一切断:胰蛋白酶( Lys 、Arg-COOH肽键); CNBr( Met-COOH肽键);胰凝乳蛋白酶();显色反应. Follin酚: 蓝色,酚基( Tyr )、吲哚基( Trp ),组分( CuSO4+磷钼酸). Millon: 红色,酚基( Tyr ),组分( HgNO3 +Hg( NO3 ) 2 ).坂口反应:红色,胍基( Arg ),组分(萘酚, NaClO).黄色反应:黄色,芳香氨基酸,组分(浓HNO3 ).双缩脲反应:紫红色,肽键,多肽,组分(NaOH+CuS4
5、O).乙醛酸反应:紫色,吲哚基( Trp )几种重要氨基酸.供应活性甲基的:S- 腺苷 Met.形成 N-糖肽键的: Asp.胶原蛋白中含量高的氨基酸:Gly、Ala 、Pro、HO-Pro、HO-Lys 蛋白分别纯化技术:透析、超滤;密度梯度离心;凝胶过滤;PI法、盐析、有机溶剂法;电泳、离子交换;吸附层析;亲和层析凝胶过滤大分子先出,凝胶电泳相反:机理分子运动速度打算因素:大小、电荷量、外形蛋白离子交换层析与洗脱:凝胶电泳三效应:电荷、分子筛、浓度效应蛋白含量测定.测 N: 凯氏定氮、紫外吸光、双缩脲吸光、福林酚显色吸光.测 M: 沉降离心、凝胶过滤(凝胶排阻层析)、SDS-PAGE凯氏定
6、氮: HNO2 反应,生成的 N2 中氨基酸占 1/2其它.分别二硫基的肽段可用:SDS-PAGE.几个主要氨基酸的PI 值:.几种重要蛋白:.镰刀贫血病:Glu Val ,第 6 位.与烷化剂(碘乙酸)反应的氨基酸:Cys(半胱氨酸)第四章 酶学酶活化中心组成: 结合部位、催化部位运算: 活力单位( IU 、Kat )、比活力( IU/mg)、转化数 / 转化周期、米氏方程各可逆抑制作用的动力学特点:Km、Vmax几个抑制作用:竞争抑制( 丙二酸对琥珀酸脱氢酶);有有机磷(与丝氨酸羟基共价不可逆 ); CO、CN( 作用于 Cytaa3);不行逆抑制(重金属、有机砷、 CN化物、硫化物、 C
7、O)酶促反应初速度与 E 、 T 有关以“三点结合”模型作用的酶:甘油激酶酶的专一性.专一水解葡萄糖形成的二酯键的酶:.以 O2为直接氢受体的氧化酶:VC氧化酶、细胞色素氧化酶别构酶.两独立功能部位:活性中心、变构中心.动力学曲线:S 型, 其它为双曲线.具有效应:协同效应、变构效应典型代表 血红蛋白: 协同效应、波尔效应、变构效应酶分别纯化.要求: 纯化倍数高、回收率高纯化倍数 =比活力 / 纯化前总比活力回收率 =活力单位数 / 纯化前活力单位数.方法: 同蛋白质竞争性抑制剂: 增S 可减弱抑制作用患尿黑酸症的病人是由于:缺少尿黑酸氧化酶(尿黑酸氧化酶遗传缺陷 )第五章 核酸反向互补配对:
8、 ACG-CG(T U)N- 苷键: ( C1 -C5),嘌呤( N9-C1),嘧啶( N1-C1)SnRNA: 核仁不均一 RNA,功能( 促进转录、 )核酸分别技术 凝胶电泳: 三效应、分子运动速度打算因素见蛋白质. 离子交换层析: 阳离子交换层析,核苷酸脱下次序:U G CA阴离子交换层析,核苷酸脱下次序:C A UG 亲和层析: 可用亲和层析法分别的核酸:mRN(A PolyA 尾) DNA 测序三法 : 加减法( Sanger 、 1975 ),化 学断裂法, 双脱氧终止 法( Sanger 、1977 、原理)不能形成两性离子的核苷酸是UMP:缘由cNMP.最重要的cNMP: cA
9、MP、cGMP. cAMP: 其次信使. cAMP分子内有: 环化的磷酸二酯键cAMP与 cGMP: 生物作用并不是完全相反第六章 分子生物学与基因工程基因组学.启动子组成3 部分: 识别部位( -35 、 CG/CAAT),结合部位( -10 、TATA),转录起始点.高度重复序列:卫星 DNA、小卫星 DNA、微卫星 DNA.原核生物基因重叠类型:.基因家族按特点分三类:简洁多基因家族、复杂多基因家族、发育调控的复杂多基因家族基因家族按组成分三类:DNA复制. DNA复制方式: 线性 (眼型), 环状 【(大肠杆菌)、滚环(病毒质粒)、D 型(线粒体、叶绿体)】. DNA复制需引物: 转录
10、不需引物原核 DNA聚合酶功能: 损耗修复、校正、合成DNA基因工程酶. RNase: RNaseA嘧啶 3 5 、RNaseT1( G的 3 5)、 RNaseT2( A 的 3 5). DNA连接酶所需能量: 原核 ATP、真核 NAD+.转移水解DNA-RNA中的 RNA的酶: RNaseH、逆转录酶(有 RNaseH活性).牛脾磷酸二酯酶水解RNA所得产物: 5磷酸切开,产生3单磷酸核苷.蛇毒磷酸二酯酶水解RNA所得产物: 3 -OH 切开,产生 5单磷酸核苷.核酸合成酶:DDDP(依靠 DNA的 DNA聚合酶)、 RDDP(依靠 RNA的 DNA聚合酶)、 DDRP(依靠 DNA的
11、RNA聚合酶). RNAPol2: RNAPolB,合成 hnRNA,分布在核质中. RNA用强碱水解产生: 2 - 核苷酸、 3 - 核苷酸混合物.限制内切酶切割特点:4-8bp 、6bp 主要,成黏性、平齐末端,成回文序列,甲基化难切tRNA 结构.含稀有碱基最多:D(二氢尿嘧啶)、(假尿嘧啶)、I (次黄嘌呤).四环四臂五区:D臂、 T C臂、氨基酸臂(受体臂)、反密码子臂.二级: 三叶草.三级: 倒 L基因表达. DNA重组过程中 DNA连接四方式: 粘性末端连接、同聚物加尾法、加连接物连接法、加DNA接头连接法.转位: 三类转位因子【(插入序列IS)、转座子( Tn)、可转座噬菌体】
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