生物分离工程施工期末复习题.doc

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1、- .填空题1.为了提高最终产品的回收率一是提高每步别离效率，二是减少别离步骤。2.评价一个别离过程效率的三个主要标准是：浓缩率，别离系数和产品回收程度3.生物产品的别离过程包括发酵液的预处理和液固别离,产品的提取，产品的精制和产品的加工处理。4.生化反响所起的作用是产生目的产物，指标是产率和转化率，而生物别离解决的是如何从反响液中获取这些物质，涉及的是收率和纯度。5.生物别离的主要任务：从发酵液和细胞培养液中以最高的效率，理想的纯度和最小的能耗把目的产物别离出来。6.生物别离过程的特点包括：生物别离过程的体系特殊，生物别离过程的工艺流程特殊，生物别离过程的本钱特殊。7.物质别离的本质是识别混

2、合物中不同溶质间物理，化学和生物性质的差异利用能识别这些差异的别离介质和扩大这些差异的别离设备8.性质不同的溶质在别离操作中具有不同的传质速率和或平衡状态9.平衡别离是根据溶质在两相间分配平衡的差异实现别离；溶质到达分配。平衡为扩散传质过程，推动力仅取决于系统的热力学性质。10.差速别离是利用外力驱动溶质迁移产生的速度差进展别离的方法。1.在细胞别离中，细胞的密度越大，细胞培养液的密度越小，那么细胞沉降2.区带离心包括差速区带离心和等密度区带离心。3.为使过滤进展的顺利通常要参加惰性助滤剂。4.发酵液常用的固液别离方法有离心和过滤等。5.常用离心设备可分为离心沉降和离心过滤两大类；6.常用的工

3、业絮凝剂有无机絮凝剂和有机絮凝剂两大类。7.工业生产中常用的助滤剂有硅藻土和珍珠岩粉。8.重力沉降过程中，固体颗粒受到重力，浮力，摩擦阻力的作用，固体匀速下降时，三个力的关系重力=浮力+摩擦阻力。9.发酵液预处理的方法包括：凝集，絮凝，加热法；调节pH法，加水稀释法，参加助滤剂和吸附剂。10.发酵液中胶粒保持稳定的原因：双电层和蛋白质周围水化层构造。11.发酵液预处理过程中的相对纯化主要包括去除高价态无机离子，可溶性杂蛋白质，色素和多糖类物质。12.发酵液中杂蛋白的去除方法主要有等电点沉淀法，热处理法和化学变性沉淀法。13.差速区带离心用于别离大小不同的颗粒，与颗粒密度无关。等密度区带离心包括

4、预形成梯度密度离心和自形成梯度密度离心两种方式。离心到达平衡后，样品颗粒的区带形状和平衡位置不再发生变化。1.单从细胞直径的角度，细胞直径越小，所需的压力或剪切力越大，细胞越2.常用的化学细胞破碎方法有.酸碱法，盐法，外表活性剂处理，有机溶剂法和螯合剂。3.包涵体的溶解需要打断蛋白质分子和分子间的共价键，离子键，疏水作用及静电作用等，使多肽链伸展。因此，包涵体的溶解需要强的变性剂，如8mol/L尿素和6mol/L盐酸4.蛋白质复性方法有：稀释法除变性剂，膜别离法除变性剂，层析法等。5.革兰氏阳性菌和阴性菌破碎的主要阻力来自于肽聚糖网状构造。6.溶菌酶破碎大肠杆菌的细胞，为了更好增加溶菌酶的溶胞

5、作用，通常要配合参加螯合剂.EDTA，其主要作用产生空隙，从而酶进入肽聚糖发生作用7.酶解法分为细胞自身酶系自溶和外加酶制剂催化。自溶作用通过枯燥法和加热法实现。8.机械破碎法只要是通过机械运动产生的剪切力来破碎细胞。9.测定细胞破碎率的方法包括：直接测定，测定释放蛋白质或者酶的活力和测定电导率。10.细胞破碎法包括机械破碎法和非机械破碎法。机械破碎包括，珠磨法高压匀浆法超声波破碎法。非机法包括：化学渗透法酶溶法物理破碎法。11.渗透压冲击法使利用高渗透压溶液产生的压差作用来使细胞溶胀。12.影响高压匀浆法破碎的因素包括：压力，温度和通过匀浆器的次数。13.影响包涵体变性溶解的因素: 作用的时

6、间，ph，离子强度，变性剂的种类和浓度。14.在变性溶解的过程中，变性剂破坏了蛋白质的高级构造，但(一级构造)和(共价键)没有破坏。当(除去变性剂)，蛋白质会重新折叠，恢复蛋白质的天然构型，1.防止蛋白质沉淀的屏障有蛋白质周围的水化层和双电子层。2.常用的蛋白质沉淀方法有：.盐析法沉淀，有机溶剂沉淀，等电点3.Cohn方程中，Ks越大，值越小，盐析效果越好。4.蛋白质溶液的pH在其等电点时，蛋白质的静电荷数为0。5.等电点沉淀的操作条件是低离子强度和PH=PI。6.有机溶剂沉淀时，蛋白质的相对分子质量越大，那么有机溶剂用量越少；在溶液等电点附近，那么溶剂用量越少。7.盐析常数Ks随蛋白质的相对

7、分子量的增大或分子构造的不对称性1.反渗透中，溶质浓度越高，渗透压越大，那么施加的压力越 (大) 。2.不对称膜主要由起 (膜别离) 作用的外表活性层和起 (支撑强化) 作用的3.料液的流速增大，那么透过量 (增大，透过通量的极限值 (增大) 。4.当料液浓度提高时，透过通量(减小) ，极限透过通量 (减少) 。5.浓度极化不存在时，表观截留率 = 真实截留率；当溶质完全被截留时，表观截留率等于 (1) ；当溶质自由透过膜时，表观截留率等于(0) 。6.工业上常用的超滤装置有板式，管式，螺旋差式和中空纤维式。7.膜污染包括：沉淀污染，吸附污染，生物污染。8.影响膜过滤的因素：料液浓度，流速，压

8、力，浓差极化，PH值和盐浓度。9.反渗透的的传质理论溶解-扩散优先吸附-毛细管流动氢链理论模10.膜别离是利用膜的选择性孔径大小，以膜的两侧存在的能量差作为推动力，由于溶液中各组分透过膜的迁移率不同而实现别离的一种技术。11.微滤和超滤的传质模型包括筛子模型和细孔模型。12. pH和盐浓度对于膜别离速率的影响包括两个方面：一是对膜外表电位、膜构造特性的影响，二是对溶质电荷特性的影响。13.对于膜别离过程，不仅需要具有优良别离性能的膜，还应该将其安装在构造紧凑，性能稳定的器件使用，这就是膜固体。1.在较低的pH下有利于青霉素在有机相中的分配，当pH大于水相中。2.利用溶质在互不相溶的两相之间溶解

9、度不同而使溶质别离的方法称为萃3.分配常数的适用条件是：稀溶液，溶质对溶剂互溶没有影响和必须是同一分子类型，不发生缔合或溶解。4.溶质在液液两相中到达萃取平衡时，具有化学位相等，萃取速率为06.弱酸性电解质的分配系数随pH减小而增大，弱碱性电解质随pH减小7.萃取过程中有机溶剂的选择原那么为相似相容原理。包含两方面的相似:分子构造相似和能量相似。8.发酵液中夹带有机溶剂微滴形成水包油O/W型乳浊液；有机相中夹带发酵液形成油包水W/O型乳浊液。9.无机盐的存在,可以增强溶质在水相中的溶解度，增加溶质向有机相10.破乳常用的方法有过滤或离心去除，化学法，物理法和顶替法和转型法。11.分子间相互作用

10、力相似一般以“介电常数评价溶解的定量方法。介电常数近，极性近，互溶性好；介电常数差距大，极性相差大，不容易1.双水相中溶质在两相中的分配有静电作用、疏水作用、生物亲和2.PEG/DX双水相中，假设降低PEG的相对分子质量，那么蛋白质的分配系数增大，假设降低DX的相对分子质量，那么分配系数减小。3.双水相中无机盐的添加对溶质分配系数的相间电位差)和外表疏水性的4.两水相萃取中，高聚物和高聚物形成两水相的原因是聚合物不相容性，而高聚物和无机盐形成两相的原因是无机盐盐析作用。5.双水相相图中，系线越长，两相间的性质差异越大。6.疏水因子HF是描述上相与下相之间疏水性的差异的参数。疏水因子HF与成相聚

11、合物的种类，相对分子质量和浓度有关，与添加的盐的种类和浓度有关，还与pH值有关。1.反胶团直径减小，那么蛋白质的溶解率减小；蛋白质的相，那么溶解率减小。2.常用的形成反胶团的阴离子外表活性剂是AO下丁二酸-2-2基己酸酯磺酸钠3.外表活性剂是构成反胶团的必要条件。只有浓度到达临界胶束浓度以4.蛋白质溶入反胶束溶液的推动力为：静电作用力和位阻效应。1. 液膜萃取过程中，溶质的迁移方式包括单纯迁移，反萃相化学反响促进迁移，膜向载体运输同向迁移和膜向载体运输反向迁移。2. 超临界萃取的方式包括：等温法，等压法和吸附法。3. 超临界流体萃取的过程是由 (萃取)和 (反萃取)组合而成的。4. 液膜别离系

12、统的膜是由膜溶剂，外表活性剂，流动载体和膜增强剂构成的。1. 吸附按作用力主要分为物理吸附，化学吸附和离子交换吸附。2.交换容量和滴定曲线是评价吸附剂性能的主要参数。3. 离子交换树脂由骨架，活性基团和活性离子组成。4. 良好的吸附剂应该具备四个特点：较强吸附能力，较高吸附选择性，机械强度高和再生容易。5. 大孔吸附剂是在聚合反响时参加了一些不参加反响的制孔剂，聚合完成后将其除去，因而留下了永久性的孔隙而形成大孔网状吸附剂构造。6. 离子交换树脂按树脂骨架分可分为凝胶性树脂，大网格树脂和均孔树脂。按活性基团可分为阴和阳离子交换树脂。7. 离子交换树脂中，交联度越大，交联剂含量越高，树脂孔径越小

13、，机械强度越高，一般不能用于大分子物质或两性分子物质的别离。交联度大的树脂可以起到分子筛的作用。8. 离子交换树脂的制备可以分为缩聚法和加聚法。分别以甲醛和二乙烯苯作为交联剂。9. 两性树脂是含有酸碱两种基团的树脂。10. 离子交换过程的操作可分为静态和动态两种。11. 离子交换树脂总是优先吸附高价离子，对低价离子吸附较弱。1. 根据别离机理的不同，色谱法可分为吸附色谱，分配色谱，离子交换色谱，凝胶色谱等。2. 层析操作必须具有固定相和流动相。3. 溶质的分配系数大，那么在固定相上存在的几率大，随流动相的移动速度小。4. 层析柱的理论板数越多，那么溶质的别离度越大。5. 两种溶质的分配系数相差

14、越小，需要的越多的理论板数才能获得较大的别离度。6. 离子交换层析操作多采用静态洗脱，动态洗脱和连续梯度洗脱。7. 凝胶色谱是根据溶质相对分子质量进展别离的一种液相色谱技术。根据流动相和固定相的极性不同，液相色谱可分为正向色谱和反向色谱。正相色谱中，流动相的极性低于固定相的极性。8. G类葡聚糖凝胶常用G-X代表，X既代表交联度，也代表吸水值。X数字越小，交联度越大，网孔越小，适用于别离低分子质量生化产品。X数字越大，交联度越小，网孔越大，适用于别离高分子质量生化产品9. 色谱法中固定量的方法包括标法，外标法和归一化法。10. 纸层析和薄层层析流动相的移动是依靠毛细作用。选择题1纯化酶时，酶纯

15、度的主要指标是：酶的比活力2以下哪项不是蛋白质的浓度测定的方法核磁共振。4别离纯化早期，由于提取液中成分，因而易采用别离量大分辨率低的方法5蛋白质类物质的别离纯化往往是多步骤的，其前采用以下的方法负载量大6. 减少操作步骤可以提高总回收率。7. 以下哪个不属于高度纯化：(吸附法)8以下哪个不属于初步纯化：(离子交换层析)9. 从组织中提取酶时，最理想的结果是比活力最高11. 在蛋白质初步提取的过程中，不能使用的方法有机溶剂萃取。12. 下面哪一种是根据酶分子专一性结合的纯化方法亲和层析。13. 从别离过程和产品的评价角度讲，其评价指标不包括：别离速度1. 其他条件均一样时，优先选用哪种固液别离

16、手段过滤2. 颗粒与流体的密度差越小，颗粒的沉降速度越小4. 以下物质属于絮凝剂的有聚丙烯类。5. 发酵液的预处理方法不包括离心6为加快过滤效果通常使用活性助滤剂7不能用于固液别离的手段为双水相萃取8酶提取液中，除所需酶外，还含有大量的杂蛋白.多(以上皆可)方法除去杂质。9能够除去发酵液中钙.镁.铁离子的方法是离子交换10从四环素发酵液中去除铁离子,可用加黄血盐11. 表示离心机别离能力大小的重要指标是别离因数。12. 过滤的透过推动力是压力差。13. 在错流过滤中，流动的剪切作用加重浓度极化，但降低凝胶层的厚度。14. 撞击破碎适用于细胞器的回收。15. 差速区带离心的密度梯度中最大密度小于

17、待别离的目标产物的密度。16. 在蛋白胶体外侧，有不同的电位，以下描述：在滑移面上的电位为电位。17关于蛋白胶体离子形成双电层后，蛋白外侧分成不同的区域，下：松散层。18. 菌体和动植物细胞的重力沉降操作，采用加热手段，可以提高沉降速度。19. 关于对絮凝作用的描述，以下说法中不正确的选项是：水化作用。20. 真空转鼓过滤机工作一个循环经过过滤区.缓冲区.卸渣区.再生区。22. 重力沉降过程中，固体颗粒不受静电力的作用。23哪种细胞破碎方法适用工业生产高压匀浆24高压匀浆法破碎细胞，不适用于青霉27. 关于发酵液预处理，表达正确的选项是：调节pH值可以促进凝聚和絮凝作用还有利于调整发酵液的状态

18、，防止沉淀变性，易于别离纯化1. 适合小量细胞破碎的方法是超声破碎法2. 基因工程药物别离纯化过程中，细胞收集常采用的方法膜过滤3. 丝状团状真菌适合采用珠磨法破碎。4. 哪种细胞破碎方法适用工业生产高压匀浆5珠磨机破碎细胞，适用于青霉6以下细胞破碎的方法中，哪个方法属于非机械破碎法(化学法)7如果用大肠杆菌作为宿主细胞，蛋白表达部位为细胞质，渗透压法8. 破碎细菌的主要阻力是：细胞壁。9. 以下哪种作用不是超声波破碎的作用过程：降解作用。10溶菌酶lysozyme)适用于革兰氏阴性菌细胞的分解，应用于革兰氏阴性菌：鳌合肽聚糖层外的脂多糖中的钙离子，破坏肽聚糖的稳定性11.目前认为包含体的形成

19、是局部折叠的中间态之间疏水性)相互作用的结果。12. 高压匀浆法破碎细胞，不适用于青霉13. 珠磨机破碎细胞，适用于青霉14. 撞击破碎适用于细胞器的回收。15. 处于包含体的表达产物具有正确的一级构造。1. 盐析法沉淀蛋白质的原理是中和电荷，破坏水膜2. 使蛋白质盐析可参加试剂硫酸铵3. 盐析法纯化酶类是根据调节酶溶解度的方法进展纯化。4. 盐析操作中，硫酸铵在什么样的情况下不能使用碱性条件5. 有机溶剂沉淀法中可使用的有机溶剂为丙酮6有机溶剂为什么能够沉淀蛋白质介电常数小7蛋白质溶液进展有机溶剂沉淀，蛋白质的浓度在0.52围适合。8假设两性物质结合了较多阳离子，那么等电点pH会升高9假设两

20、性物质结合了较多阴离子，那么等电点pH会降低10生物活性物质与金属离子形成难溶性的复合物沉析，然后适用 EDTA去11. 在一定的pH和温度下改变离子强度盐浓度进展盐析，称作 (KS盐析法)12. 盐析法与有机溶剂沉淀法比拟，其优点是变性作用小13. 在Cohn方程中，logS=-KsI中，盐析常数Ks反映盐的种类对蛋白质14. 在Cohn方程中，logS=-KsI中，常数反映(pH值和温度)对蛋白质溶解15. 蛋白质溶液的pH接近其等电点时，蛋白质的溶解度最小。16. 变性活化能 A 的蛋白质可利用热沉淀法别离相差较大17. 在一样的离子强度下，不同种类的径(小且带电荷较多的阴离子)效果好。

21、18. 盐析沉淀时，对构造不对称且高分子量的蛋白质所需的盐浓度低。19. 影响-别离法的因素不包括：无机盐的种类20. 影响Ks别离法的因素不包括：盐的浓度21. 不适宜盐析用盐的盐是 (碳酸钠)。22. 以下离子中, 盐析作用比拟强的是(PO3-)。23. 以下不属于有机溶剂沉淀法的特点的是(变性蛋白)。24. 等电点法沉淀蛋白，原因是(降低其溶解度)。25. 不参与影响PEG沉淀效果的因素是(试剂毒性)26. 不属于成盐聚合物沉淀方法的是：非离子聚合物成盐27. 将四环素粗品溶于pH2的水中，用氨水调pH4.5- 4.6，2830保温，即有四环素沉淀结晶析出。此沉淀方法称为等电点法28.

22、关于蛋白质盐析的说法，的：温度升高，盐析作用强，故温度越高越好29. 无机盐的存在有利于溶质向有机相中分配。1. 非对称膜的支撑层只起支撑作用。2. 哪一种膜孔径最小反渗透4微孔膜过滤不能用来pH55. 超滤膜通常不以其孔径大小作为指标，而以截留分子量作为指标。所谓“分子量截留值是指阻留率达90%以上的最小被截留物质的分子量。6. 在超滤过程中，主要的推动力是压力7. 膜别离是利用具有一定 (选择性透过) 特性的过滤介质进展物质的别离过8. 反渗透别离的对象主要是 (离子) 。9. 超滤膜主要用于 (不含固形物的料液 ) 别离。10. 微滤主要用于 (悬浮物) 别离。11. 透析主要用于 (生

23、物大分子溶液的脱盐) 。12. 菌体别离可选用 (微滤) 。14. 蛋白质的回收浓缩通常选用 (超滤) 。15. 相对分子量一样时， (球型) 分子截留率最大。16. 相对分子质量一样时， (线状) 分子截留率较低。17. 两种以上高分子溶质共存时与单纯一种溶质存在的截留率相比要 (高) 。18.膜面流速增大，那么 (浓度极化减轻，截留率减少) 。19. 膜别离过程中，料液浓度升高，那么 (粘度上升，截留率增加) 。20. 当pH (等于等电点) ，蛋白质在膜外表形成凝胶极化层浓度最大，透过21. 真实截留率和外表截留率在 (不存在浓度极化) 情况相等。22.错流过滤操作中料液流动的剪切力作(

24、减轻浓度极化,但降低凝胶层厚度)23. 当压力较小，膜面上尚未形成浓差极化层时，此时，透过通量与压成(正比) 24. 当压力逐渐增大时，膜外表出现浓差极化，此时透过通量增长速率(放慢) 。25. 欲使溶质浓度高的一侧溶液中的溶剂透过溶质低 (施加压力大于渗透压) 。26. 常用于海水和苦咸水淡化的膜别离技术是电渗析。27. 电渗析采用的膜材料为：离子交换膜)。29. 孔径越大的微滤膜，其通量 (下降速度越快) 。30. 超滤和微滤是利用膜的筛分性质以膜两侧的压力差为传质推动力。31. 超滤和微滤的通量 (与压差成正比，与料液粘度成反比) 。32. 关于膜别离过(可以通过增加料液中的溶质浓度到达

25、减轻浓差极化的作用)33. 膜别离过程中的影响因素，说确的是：(超滤别离过程中，增大流速会使膜两侧平均压力差减小，因为流经通道的压力降增大 )34. 膜别离过程中的影响因素，说法错误的选项是：(对荷电膜，具有与膜一样电荷的分子截留率较低，反之那么较高)1. 用来提取产物的溶剂称萃取剂。2. 关于萃取以下说确的是两性电解质在等电点时进展提取3. 液一液萃取时常发生乳化作用，如何防止加热4. 物理萃取即溶质根据相似相溶的原理进展别离的5. 溶质在液液两相中到达萃取平衡时，萃取速率为零。6. 溶质在两相到达分配平衡时，溶质在两相中的浓度不再改变。7. 萃取分配定律成立的条件为恒温恒压，溶质在两相中相

26、对分子质量相等，且低浓度围。8. 分配常数与分配系数分配常数是分配系数的一种特例。9. 分配常数与分配系数在溶质在两相中的分子形态一样情况下一样。10. 假设萃取平衡符合线性关系，并且各级萃取流量之和为一常数，各级大。11. 红霉素是碱性电解质，采用有机溶剂萃取，水相从pH 9.8降至pH 5降低。12.青霉素是较强的有机酸，采用有机溶剂萃取时，水相中pH从3明显降低。13. 无机盐的存在以上答案都不对溶质向有机相中分配。14. 有机溶剂萃取较高温度有利于目标产物的回收与纯化，通常操较低温度15. 以下对分配定律的描述哪一个是正确的： (一定温度压力下，溶质分配达平衡时在两相的浓度之比为常数)

27、16. 关于用氢键形成来判断各类溶剂互溶规律，以下氢键形成是能量释放的过程，假设溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，那么有利于互溶项是正确的表达。1. 在葡聚糖与聚乙二醇形成的双水相体系中，目标蛋白质存在于上相2当两种高聚物水溶液相互混合时二者之间的相互作用不可能产生形成沉淀3. 非电解质溶质在双水相中的分配系数随相对分子质量的增大而(减小)4. 疏水因子HF一般随聚合物的相对分子质量, 浓度和盐析浓的增大而(增大)。5. 在pH为等电点的双水相中蛋白质的分配系数的对数值 (双水相的疏水性) 。6. 在pH=pI的双水相中，假设双水相疏水因子HF=0，那么蛋白质在两相中的 (1) 。7. 双水

28、相的疏水因子HF值越大，那么溶质的分配系数越 (大) 。8. 在PEG/DX双水相中，假设添加的无机盐使相间电位差，(大于等电点) 。9. 在pH为等电点的双水相中，蛋白质主要根据 (疏水性差异) 产生各自分配。10. 在聚乙二醇/葡聚糖双水相体系中，提高聚乙二醇的相对分子质减小。11. 在PEG-Dex双水相系统中，关于双节线形状描述正确的选项是：两种聚合物相对分子质量相差越大，双节线的形状越不对称1. 蛋白质溶解在反胶团中的主要推动力是静电相互作用。2. 反胶团萃取中，蛋白质相对于反胶团的直径越大，萃取率越低。3. 反胶团萃取假设选用阴离子型外表活性剂，当水相中pH 小于蛋白质等电4. 反

29、胶团的形状是极性头朝里，非极性尾朝外。1. 乳化液膜的制备中强烈搅拌C.使相的尺寸变小2. 利用液膜膜相中流动载体B.选择性输送作用的传质机理称为液膜膜相载体输送。3.液膜中膜溶剂的粘度越大，那么膜B.易于成膜4. 在液膜别离的操作过程中，B.外表活性剂主要起到稳定液膜的作用5. 超临界流体萃取中，如何降低溶质的溶解度到达别离的目的C.升温7. 超临界流体在其临界温度和压力附近的微小变化，都会引起C.密度发生很大的变化。8. 超临界流体萃取的萃取速度C.大于液液萃取1. 适合于亲脂性物质的别离的吸附剂是活性炭。2. 离子交换剂不适用于提取抗生素物质。3.强酸性阳离子交换树脂的活性交换基团磺酸5

30、. 离子交换法是应用离子交换剂作为吸附剂静电6. 工业上强酸型和强碱型离子交换树脂钠型和氯型。 7. 依离子价或水化半径不同Fe3+Ca2+Na。8. 关于0019离子交换树脂表达正确的选项是：a。9. 吸附剂和吸附质之间作用力是通过德华力产生的吸附称为物理吸附。10哪一种活性碳的吸附容量最小锦纶活性碳11酚型离子交换树脂那么应在pH9的溶液中才能进展反响12离子交换树脂适用乙醇进展溶胀13. 通过改变pH值从而使与离子交换剂结合的各个组分被洗脱下来a14. 下面四条曲线中哪个是弱酸性离子交换树脂的滴定曲线b 15. 对于吸附的强弱描述错误的选项是成正比16. “类似物容易吸附类似物非极性溶剂

31、17. 将离子交换树脂装在玻璃柱中Li +、Na+、Ca2+、Fe3+18. 在酸性条件下用以下哪种树脂吸附氨基酸有较大的交换容量氢型阳19. 活性炭在以下哪种溶剂中吸附能力最强水22. 当吸附操作到达穿透点时，应 (停顿吸附) 操作。23. 离子交换的分配系数与离子浓度呈(线性增加) 关系。24. 线性梯度洗脱过程中，流动相的离子强度线性增大。分配系数1. HPLC高效液相色谱。2. 针对配基的生物学特异性的蛋白质别离方法是亲和层析。3.利用酶作为亲和层析固定相高度特异亲合性4. 用于蛋白质别离过程中的脱盐和更换缓冲液的色谱是凝胶5. 关于凝胶色谱的葡聚糖凝胶的性质分子质量生化产品6. 葡聚

32、糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶的商品名分别是： (P) 7. 氨基酸自动分析仪是以以下哪种色谱别离方法为根底而设计的：离子交换色谱8. 在液相色谱中, 某组分的保存值大小组分与流动相和固定相9. 凝胶色谱别离的依据是各物质分子大小不同。10. 在凝胶过滤别离围是5000400000中肌球蛋白11. 在高效液相色谱流程中，试样混合物在色谱柱中被别离。13.分子量大于5000的物质与5000分子量以下的物质分开选用G-50。14. 分配层析中的载体能吸附溶剂构成固定相。15洗脱体积是与该溶质保存时间相对应的流动相体积。16. 吸附色谱别离的依据是固定相对各物质的吸附力不同。17. 分子筛层析纯化酶是根据酶

33、分子大小.形状不同的纯化方法进展纯化。18. 以下关于正相色谱与反相色谱说确的是c19. 一般来说，可使用正相色谱别离带电离子20. 以氧化铝和硅胶为介质进展层析，对极性稍大的成分其Rf小21.那一种凝胶的孔径最小Sephadex G-2522哪一种凝胶的吸水量最大Sephadex G-20023葡聚糖凝胶可使用哪种溶剂溶胀缓冲液24气相色谱的载气不能用氧气25. 在选用凝胶层析柱时粗且长的26. 线性梯度洗脱过程中分配系数27.逐次洗脱过程中阶段式判断题原料目标产物的浓度越高，所需的能耗越高，回收本钱越大。溶质两相中的浓度与相平衡时的浓度差是过程进展的推动称为平衡别离。回收率反映被别离组分在

34、别离与纯化过程中损失的量。原料目标产物的浓度越高，所需的能耗越高，回收本钱越大。() 在恒压过滤中，过滤速率会保持恒定。生长速率高的细胞比生长速率低的细胞更难破碎。()凝聚与絮凝的作用原理是一样的，只是沉淀的状态不同。离心操作时，对称放置的离心管要到达体积一样才能进展离心操作。发酵液中水的外表力是温度的函数，温度升高降低外表力对发酵液的) 细胞絮凝的方法包括自身絮凝和絮凝剂絮凝。高级醇能被细胞壁中的脂类吸收，使细胞膜溶胀，导致细胞破碎。高压匀浆法可破碎高度分支的微生物。冻结的作用是破坏细胞膜的疏水键构造，降低其亲水性和通透性。高压匀浆法适合团状和丝状细胞的破碎。超声波破碎细胞是利用超声波对细胞

35、壁的降解作用。革兰氏阴性菌的肽聚糖层比革兰氏阳性菌的要厚。超声波破碎法比拟适合酵母菌的破碎。要增加目的物的溶解度，往往要在目的物等电点附近进展提取。蛋白质水溶液中离子强度在生理离子强度0.150.2molkg-1之外，蛋白质在高离子强度时，升温会使蛋白质的溶解度下降，有利于盐析沉淀，因此常利在其等电点的溶液中蛋白质的溶解度最低的原理进展别离，称为等电点沉无论是亲水性强，还是疏水性强的蛋白质均可采用等电点沉淀。盐析法经济、平安、操作简便、不易引起蛋白质变性，且分辨率不高。有机溶剂沉淀蛋白的作用比盐析的强,并且免去了后期脱盐的麻烦。Pb2+不但可以和羧酸作用也可以和含有巯基的化合物作用形成金属盐复

36、合物。丙酮沉析作用小于乙醇。超滤的主要别离对象是悬浮液中的菌体细胞。膜别离过程中增加流速一定可以增加膜的透过率。微滤膜中的外表过滤机理会造成膜孔的吸附。不对称膜具有单一层的膜构造。膜污染和浓差极化都是不可逆的过程。弱电解质的萃取过程中，一方面弱电解质在水相中到达解离平衡，另一方面由于温度影响相水系统的相图，因而影响蛋白质的分配系数，因此温度对双荷电溶质在双水相中分配系数的对数与溶质的静电荷数成反比。根据成膜液体的不同，分为W/O/W和O/W/O两种，其中生物别离中主要应用O/W/O。超临界流体具有和液体类似的密度，与气体类似的溶解性。压力不变，减低温度，超临界流体的密度减小，萃取能力减弱。弱酸

37、性阳离子交换树脂在强酸条件下具备较强的离子交换能力。物理吸附是有选择性的。化学吸附是多分子层吸附。活性炭在有机溶剂中的吸附能力强，在水中变弱。色谱别离技术中被检测物质的峰越宽越好。凝胶层析中分配系数为0，说明溶质分子量很小，可以完全进入凝胶部。反相色谱中样品中碳链越长，疏水性越强，在别离中和固定相的作用力越弱，洗脱体积较小。当试样中所有组分不能全部出峰，或只要求测定试样中某个或几个组分时，可用外标法定量祖组分。问答题3.生物别离工程可分为几大局部，分别包括哪些1.固-液别离离心、过滤、细胞破碎2.初步纯化离子交换吸附、萃取、溶剂萃取、反胶团萃取、超临界流体萃取、双水相萃取3高度纯化色谱、电泳、

38、沉淀4精制结晶、枯燥5.简述生物活性物质别离纯化的主要原理？生物大分子别离纯化的主要原理是：1根据分子形状和大小不同进展别离，如差速离心与超离心、膜别离、凝胶过滤等；2根据分子电离性质带电性差异进展别离，如离子交换法、电泳法、等电聚焦法；3根据分子极性大小及溶解度不同进展别离，如溶剂提取法、逆流分配法、分配层析法、盐析法、等电点沉淀及有机溶剂分级沉淀等；4根据物质吸附性质的不同进展别离，如选择性吸附与吸附层析等；5根据配体特异性进展别离，如亲和层析法等6.生物别离工程别离效率可以从别离的方法和设备以及别离的过程和产品两个1别离的方法和设备：a别离容量单位体积别离设备处理料液或者目标产物浓度b别

39、离速率批次处理所需时间c分辨率目标产物别离效果或去除杂质的能力目的：研发别离容量高，别离速率高，分辨率高的新技术，新介质，新设备2别离过程和产品a浓缩程度衡量以浓缩为目的的别离过程b别离系数目标产品别离纯化程度c回收率产品回收程度目的：设计和优化别离过程，提高别离效率b减少别离步骤，缩短别离时间c提高产品回收率和活性，降低生产本钱2. 凝集与絮凝过程有何区别？如何将两者结合使用？常用的絮凝剂有哪些？1a凝聚：指在投加电解质作用下，胶体粒子间双电层排斥电位降低，并使粒子相互聚集成 1mm大小块状凝聚体的过程。b絮凝：指在某些高分子絮凝剂存在下，基于桥架作用，使胶体粒子交联成网，形成10mm大小絮

40、凝团的过程。2先用凝集剂将小粒子变大颗粒，再用絮凝剂产生粗大絮凝团3无机絮凝剂，高分子无极聚合物，有机絮凝剂6. 密度梯度区带离心法中差速区带离心法和等密度区带离心法的异同？区带离心种类差速区带离心等密度区带离心共同点事先在离心管用低分子量溶质调配好密度梯度梯度介质常用蔗糖常用氯化锌密度梯度较大密度梯度低于较大密度的沉降样品较大密度梯度大于较大密度的沉降样品区带形成条件根据各个组分沉淀系数的差异，形成各自区带根据组分密度差形成区带离心条件在较快的沉降物质到达管底前停顿，短时间、低速度组分沉降到其平衡的密度区，长时间、高速度1. 细胞破碎的方法包括哪几类？工业上常用的方法有哪些？机械破碎法珠磨法

41、、高压匀浆法、超声波破碎法物理破碎法冻融法、低温玻璃化法化学渗透法加酸、碱、盐、外表活性剂、有机溶剂、变性剂、螯合剂等酶溶法各种酶对细胞壁的降解工业常用：高压匀浆法、珠磨法2. 简述基因工程产品包涵体的别离过程？并简单说明每个步骤的目的，方法？a收集菌体细胞b细胞破碎c包涵体的洗涤d目标蛋白的变性溶解e目标蛋白的复性a目的：密集菌体，以得到更多产物，方便后续操作。方法：凝聚法，别离法，膜过滤法b目的：使包涵体释放方法：机械破碎法高压匀浆、珠磨、超声波、撞击破碎c目的：去除除包涵体外的杂质，防止复性时杂质与目标蛋白一起复性为纯化带来困难。方法：采用洗涤剂温和的外表活性剂Tritonx-100，蔗

42、糖、低浓度的弱变性剂如尿素或脱氧胆酸等，能溶解去除膜蛋白和脂类杂质。 d目的：不溶性的目标蛋白必须溶解到液相中，才能进一步纯化。水溶液很难溶解，采用蛋白质变性使其形成可溶性。方法：参加变性剂尿素、增容剂SDS、参加中强碱PH9或者有机溶剂每支少使用e目的：包涵体在变性剂溶液如盐酸胍、豚中溶解，造成溶解的蛋白质呈变性状态，即所有氢键、疏水键全被破坏，疏水侧链完全暴露，但一级构造和共价键不被破坏。当除去变性剂时，一局部蛋白质可以自动折叠，恢复成具有活性的天然构型的过程。方法：稀释法除变性剂参加大量水或缓冲液膜别离法除变性剂透析、电滤、电渗透层析法凝胶层析、高效疏水层析5. 简述细胞破碎法选择的依据

43、？细胞处理量：规模角度出发细胞壁的构造和强度：破碎细胞的种类：细菌、酵母和真菌细胞的形状和大小目标产物对破碎产物的敏感性：生物质的稳定性为出发点破碎程度：后续操作1.常用的蛋白质沉淀方法有哪些？为什么很少单独使用等电点沉淀法1盐析法、机溶剂沉淀法、等电点沉淀法、非离子多聚物沉淀法、生成盐复合物法、选择性的变性沉淀、亲和沉淀及SIS聚合物与亲和沉淀等2PH=PI时，两性电解质仍有溶解度，沉淀不完全，加上许多生物分子的等电点比拟接近，难区别。3. 何谓盐溶和盐析？产生的原因？盐析法沉淀蛋白质的机理？1盐析：一般指溶液中参加无机盐类而使某种物质溶解度降低而析出的过程。盐溶：低盐浓度下，增加分子间静电斥力，使溶解度增