微生物的实验室培养教案.docx

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1、精品名师归纳总结资料word 精心总结归纳 - - - - - - - - - - - -学习好资料欢迎下载微生物的试验室培育四川省中江中学校叶秀琼“微生物的试验室培育”是选修1 的专题 2“微生物的培育与应用”中的第1 个课题，它是在传统发酵技术的应用的基础上，进一步全面深化学习微生物培育的基础学问和基本操作技术，同时也为微生物应用奠定基础，具有承上启下的重要作用。在生物技术模块中是同学应当挑选的一个重要的操作试验，但由于该课题试验难度很大，多数中学试验室试验器材不足，试验经费紧急，特殊是该试验具有肯定风险性（微生物本身就是危急生物），多数学校在挑选试验操作课题时都舍弃该专题中这个基础试验。

2、为了使同学更好明白与我们自身关系极为亲密的微生物培育与应用的学问和技能，下面就结合自己的教学实际谈谈对本课题的教学设计。1 教学目标确立依据课程标准中内容标准“进行微生物的分别和培育”和活动建议“用大肠杆菌为材料进行平面培育分别菌落”，结合人教社选修1 教材和本校试验室条件，确立本课题教学目标如下：学问目标：列举培育基的种类等基础学问，说明培育基配方及作用。概述无菌技术。才能目标：尝试培育基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术。娴熟规范的进行无菌操作，胜利的培育微生物。情感态度价值观方面：体验制作牛肉膏蛋白胨培育基，培育纯化大肠杆菌的方法。参加试验过程，体验试验操作领悟试验原理，沟通

3、试验体会。形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神。教学重难点：无菌技术的操作。由于微生物在自然界分布广泛，在试验室培育微生物除了 要为微生物供应合适的养分和环境条件外，仍需要确保其他微生物无法混入。因此，试验 时针对培育基、操作者、用于培育的器皿、接种工具等使用不同的方法进行消毒灭菌处理。在“无菌”的条件下接种和培育，获得纯洁培育物，才能胜利培育微生物。可见无菌技术 是微生物培育过程的关键。教学中可联系医疗和生活实际深化懂得无菌技术2 教学实施建议2 1 拟定试验方案微生物试验室培育需要在无菌条件下进行，试验技术要求高。对本课题教学组织采纳试验探究的模式，留意微生物试验基本操作和技能的训练

4、。采纳课上和课下统筹支配，理论和实践并举，在操作中懂得原理，利用原理指导实践。基于此，对本试验教学支配如下：可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结学习资料 名师精选 - - - - - - - - - -第 1 页，共 5 页 - - - - - - - - - -可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结资料word 精心总结归纳 - - - - - - - - - - - -学习好资料欢迎下载试验方案教学目标老师活动同学活动设计意图可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结第一课时 学习有关培育基的学问和无菌技术供应相关材料，进行基础学问介绍明确试验原理通过讲解，设计

5、表格进行学问归纳可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结其次课时学习有关制备牛肉膏、蛋白胨固供应试验器具，和培育基配方，进行试验培育基和器皿灭菌，倒尝试配制培育基及倒平板体 培 养 基 的 方法。进行制备牛指导同学操作平板操作肉膏、蛋白胨培养基、倒平板操作第三课时进行试验室纯化大肠杆菌操作介绍平板划线和稀释涂布平板原利用各小组自己配制的培育基在尝试利用牛肉膏蛋白胨培育基接理，并指导同学接种操作无菌条件下接种大肠杆菌操作种大肠杆菌并纯化培育第四课时培育观看、展现成果，分析缘由组织沟通和介绍菌种保藏观看记录结果并进行分析观看并分析胜利和失败缘由，拓和课题延长展视野2 2 懂得试验原理试验原

6、理是试验所遵循的科学道理，详细的说它是进行试验设计和操作的理论依据。是为解决某方面生物学问题所应用到的生物学及相关学科中的方法和理论。把握试验原理是试验设计和操作的前提。本课题依据的试验原理是：2 1 1 培育基配制原理：微生物的生长繁衍时需要各种养分物质，一般包括水、无机盐、碳源和氮源，有的仍需要少量特殊养分物质（生长因子）依据微生物的种类和试验目的不同，挑选不同的原料配制不同培育基。本课题使用牛肉膏蛋白胨培育基，它是一种应用最广泛和最普遍的细菌基础培育基，也称一般培育基。它含有牛肉膏、蛋白胨和NaCl ，其中牛肉膏为细菌供应碳源和能源，磷酸盐。蛋白胨主要供应氮源。而NaCl 供应无机盐。在

7、配可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结学习资料 名师精选 - - - - - - - - - -第 2 页，共 5 页 - - - - - - - - - -可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结资料word 精心总结归纳 - - - - - - - - - - - -学习好资料欢迎下载制固体培育基时仍要加入琼脂作凝固剂。在培育细菌时要用稀酸或稀碱将pH 调至中性或微碱性，以利于细菌的生长繁衍。牛肉膏蛋白胨培育基的配方见教材P 15。2 1 2 无菌操作原理：针对不同对象采纳不同的消毒和灭菌的方法，在高温、高压、化学药剂、强酸和强碱作用下，使微生物蛋白质凝固变性，从而达到

8、杀菌的目的。本试验采用酒精对试验者双手消毒，紫外线对操作环境照耀消毒，对培育基采纳高压蒸汽灭菌，对玻璃器皿进行干热灭菌和接种环灼烧灭菌等。2 1 3 纯化大肠杆菌的原理：为了获得某种微生物的纯培育，选用平板划线法或稀释涂布平板法，在牛肉膏蛋白胨培育基上操作，经培育后可分别得到有单个细胞繁衍而来的子细胞群，即菌落。2 3 预备试验材料微生物试验涉及的试验仪器较多，完成本课题所用材料、仪器及药品列表如下：试验材料试验仪器和设备试验试剂或药品培育皿、试管、试管架、锥形瓶、量筒、 烧杯（ 100mL ）、酒精灯、石棉网、高压蒸汽可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结大肠杆菌或金黄色葡萄菌等细

9、菌灭菌锅、移液管、胶头滴管、托盘天平（或电子秤） 、接种环、涂布器、恒温箱、干热 灭菌箱、玻璃棒、称量纸、 棉花、牛皮纸（或旧报纸）、橡皮筋牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、盐酸、氢氧化钠、琼脂、蒸馏水等可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结就目前中同学物试验室条件来说，多数学校都没有单独设立无菌室，一些试验器材也不全，这是制约微生物试验顺当进行的瓶颈。教学中为了满意试验要求，积极制造条件开展好微生物培育试验，详细做法是： 通过自制无菌操作箱（即接种箱见图1）可解决没有无菌室的问题。高压蒸汽灭菌锅可用家用高压锅代替，也可用铝锅隔水蒸煮 30 60 分钟，温度100，隔 24 小时再照样蒸煮，连

10、煮三次，就可以杀死全部细菌和芽孢。接种环可用废电炉丝或细钢丝做针环，用玻璃棒做柄，自己动手制作。培育时假如没有恒温箱，冬季可用电暖风或暖气邻近保持温度在20 30即可。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结学习资料 名师精选 - - - - - - - - - -第 3 页，共 5 页 - - - - - - - - - -可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结资料word 精心总结归纳 - - - - - - - - - - - -学习好资料欢迎下载2 4 指导试验操作本课题试验可依据下面试验流程进行操作：配制合适的培育基是培育、观看和争论微生物的基础。组织同学配制牛肉膏

11、蛋白胨培育基操作时留意： （1）溶化琼脂时要掌握火力的大小并不断搅拌，以免培育基溢出或糊底引起烧杯破裂。（ 2）加热过程中部分水分蒸发，待琼脂完全溶化后应补加蒸馏水，以保持溶液的浓度。（ 3）培育基各种成分溶化后灭菌前要依据培育微生物需要调剂pH （4）一般是培 养基先灭菌再倒平板，倒平板操作必需在酒精灯火焰旁进行，并且不要将皿盖完全打开。 （ 5）冷却后的平板要倒置，以确保拿放便利，同时防止水分蒸发，以利微生物生长。2 4 2 接种操作（一）平板划线接种微生物接种方法有两种，一是平板划线接种（图2），即用接种环划线将菌体沾在斜面培育基或平板培育基上。微生物的生长和繁衍快速，一段时间后，就会在

12、培育基表面形成长满菌落的细线。划线法的作用是纯化微生物，通过划线将微生物单个的分别，并最终形成标准的菌落。划线操作时留意：（ 1）用接种环取菌种之前、每次划线之前和划线终止 都要进行灼烧灭菌，灼烧后要在酒精灯邻近冷却后再操作。（ 2）划线时不要划破培育基，假如采纳分段划线法操作从其次次操作应总在上一次划线末端开头，首尾区不能相连。（ 3）操作必需始终在酒精灯火焰旁进行。（二）稀释涂布平板接种二是稀释涂布平板接种（图3），即先将菌液进行一系列梯度稀释，用涂布器将不同稀释度的菌液匀称的涂布在平板上进行培育。在稀释度足够高的菌液里，集合在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培育基表面形成单个的菌

13、落。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结学习资料 名师精选 - - - - - - - - - -第 4 页，共 5 页 - - - - - - - - - -可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结资料word 精心总结归纳 - - - - - - - - - - - -学习好资料欢迎下载涂布操作时留意： （ 1）配制系列梯度稀释液必需用无菌水配制。（ 2）配制系列梯度稀释液和转移菌液以及涂布过程等必需都在 酒精灯火焰旁进行。教学中，要求同学仔细领悟无菌接种的技术原理，反复练习操步骤作。通过练习达到娴熟程度，并培育严谨仔细的科学精神和一丝不苟的试验态度。2 4 3 培育操

14、作将接种后的培育基和一个未接种的培育基放入37恒温箱中培育12h 和 24h 后，观看并记录。这期间可支配生物科代表或试验小组进步行定期观看，并做好计录，以便准时让其他同学观看到自己的试验成果。特殊需要说明的是，假如同学不能准时观看，培育的时间过长，许多菌落就会联成一片，就不能观看到单个菌落了。3 学问小结及作业4 教后反思本节课可以通过生产实例入手，引导同学熟识在微生物的培育过程中，保持培育物纯洁的重要性。在试验中充分发挥同学的主动性，让同学多练习相应操作，从中体会纯洁培育过程中“无菌”操作的重要性。要让同学熟识试验原理再进行操作试验，利用培育结果指导同学回忆试验中的成败并相互争论总结，深化懂得学问。当然由于微生物的微观性和危害性，肯定要训练同学培育良好的卫生习惯。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结学习资料 名师精选 - - - - - - - - - -第 5 页，共 5 页 - - - - - - - - - -可编辑资料 - - - 欢迎下载