b_罗光明蔓荆子种子生活力测定方法及其与发芽率的相关性研究8 .docx

《b_罗光明蔓荆子种子生活力测定方法及其与发芽率的相关性研究8 .docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《b_罗光明蔓荆子种子生活力测定方法及其与发芽率的相关性研究8 .docx（6页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、精品名师归纳总结蔓荆子种子生活力的测定及其与发芽率的相关性争辩 罗光明 1*，孙荣进 1，朱继孝 1，曾金祥 1 ，方 磊 11 江西中医学院江西南昌 330004， 2 郧阳医学院附属太和医院湖北十堰 442000） 摘要 目的：选择测定蔓荆子种子生活力的正确方法，明确生活力与发芽率之间的相关性。方法：以5 个不同产的的蔓荆子作为试验材料，分别用四氮唑染色法、红墨水染色法、 BTB 指示剂法测定种子的生活力。测定不同培养床滤纸、海绵、沙子、蛭石）和不同温度 15、20、25、30、30/20 、25/15 ）对发芽率的影响，优化种子发芽条件。结果：四氮唑染色法测定种子的生活力是三种测定方法中

2、最精确的，在蛭石培养床、30恒温培养条件下，蔓荆子的发芽率最高。四氮唑染色法测定的蔓荆子生活力与发芽率比值为0.958 ，存在显著的正相关性，进一步求得蔓荆子四氮唑测定生活力X 与发芽率 Y 的回来方程为 Y=0.0078X+0.1709 。结论：四氮唑染色法是蔓荆子种子生活力测定的正确方法，生活力与发芽率呈显著的正相关。 关键词 单叶蔓荆。生活力。发芽率。相关性 中图分类号 S330.3+1 文献标识码 A蔓荆子为马鞭草科植物单叶蔓荆Vitex trifoliaL. var. simplicifoliaCham. 或蔓荆 V. trifoliaL. 的干燥成熟果实 1 。主产于江西、山东、浙

3、江、福建、广东、广西及云南等的。为辛凉解表药 , 具有疏散风热、清利头目、止痛的功效。目前，蔓荆子品种考证、资源2,34 6状况、生物学特性、栽培、化学成分、炮制、药理作用及临床应用等已有争辩，但蔓荆子种子特性方面的争辩尚属空白。蔓荆子种子有休眠特性，目前生产上主要以养分繁殖为主。作者拟通过建立蔓荆子种子生活力测定方法, 进而以其生活力与发芽率的相关性争辩, 找出两者间内在关联 , 以此来评判蔓荆子种子质量, 指导蔓荆子生产。1 试验材料单叶蔓荆子的种子分别采集于江西新建县、山东威海市、福建莆田市、广西防城市、浙 江宁波 市，经 江西中医 学院赖 学文教 授鉴定为 单叶蔓 荆子 V. trif

4、oliaL. var. simplicifoliaCham. 。2 试验方法2.1 发芽试验将解除休眠后的蔓荆子种子，置于光照培养箱中，发芽温度分别设置为15、 20、25、 30恒温存 25/15 、30/20 变温 6 种处理组，发芽床分别接受滤纸、海绵、沙子、蛭石等 4 种。每种处理 3 次重复，每次重复25 粒种子。用SPSS11.0 分析培养床和温度对蔓荆子发芽率的影响。2.2 生活力测定分别用四氮唑染色法 简称 TTC 法）、红墨水染色法、溴麝香草酚蓝法简称 BTB法）测定。2.2.1 TTC 法 将 5批不同产的的种子编号后，在室温下浸泡4小时软化果皮，沿果实顶端约纵 轴长度 1

5、/5处横切，使露出果实的四室，然后沿与纵轴成30角斜切种子以暴露出种胚，放 入盛有四氮唑溶液的离心管中。在20、 30恒温箱中染色，四氮唑的浓度分别为0.1%、1% 两个水平 用磷酸缓冲液配制2， 3， 5- 氯化三苯基四氮唑溶液，pH 6.5-7.5），染色时基金工程： 国家重大科技专项 “中药材种子种苗和种植 养殖）标准平台 ”2021ZX09308-002）作者简介： 罗光明 1958- ），博士，教授。在国内外学术杂志上共发表学术论文50 余篇，出版学术专著 3 部。获省部级科技进步二等奖1 项和三等奖 3 项。争辩方向：中药资源开发与利用争辩。中药材GAP 生产技术争辩。 Tel：

6、0791）7118982E-mail ： jzlgm88可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结间分别为 4、 6、8、10h。染色后依据胚着色程度和部位鉴定种子的生活力，运算有生活力种子的百分率。每个处理设4次重复，每次重复用 50粒。2.2.2 红墨水染色法将 5 批不同产的蔓荆子种子编号，每批随机分为两组，一组用沸水煮 10min，作为空白对比 死种子），一组直接染色。红墨水浓度为5%1ml 的红墨水加19ml的蒸馏水），染色时间分别为30min 、1h、 2h、3h。染色完毕后，用自来水冲洗5次，依据胚着色程度部位和空白对比来鉴定种子的生活力，运算有生活力种子的百分率。每个处理

7、设 4 次重复，每次重复用50 粒。2.2.3 BTB 法将 5 批不同产的蔓荆子种子编号，每批随机分为两组，一组用沸水煮10min 至灭活，作为空白对比，一组浸泡于蒸馏水中12h。然后分别把蔓荆子种子整齐的包埋于备好的 0.1%的 BTB 琼脂凝胶中，在30恒温条件下， 2h 后观看种子四周显现的黄色晕圈情形，显现晕圈说明有活力。每个浓度水平设4 次重复，每次重复用25 粒。3 结果与分析3.1 发芽试验结果见表1。结果说明：以蛭石培养床30恒温光照培养最优。江西新建县、山东威海市、福建莆田市、广西防城市，浙江宁波市所产蔓荆子的发芽率分别为78.7% ， 80.3% 、81.3% 、 26.

8、7%、45.3% 。表 1 不同发芽介质和温度对蔓荆子发芽率的影响江西新建山东威海福建莆田广西防城浙江宁波可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结培养温度势/%率/%势/%率/%势/%率/%势/%率/%势/%率/%150.04.00.06.00.064.00.02.00.016.0200.070.00.070.00.084.00.010.00.046.02549.366.749.378.082.782.712.012.036.046.73061.377.361.380.573.380.04.014.720.030.7床/ 发芽发芽发芽发芽发芽发芽发芽发芽发芽发芽可编辑资料 - - -

9、欢迎下载精品名师归纳总结25/150.054.70.022.70.080.00.08.00.041.330/2058.777.358.772.758.777.30.016.046.745.3150.08.00.04.00.054.00.00.00.022.0200.076.00.074.00.086.00.012.00.046.02542.768.043.781.369.384.08.010.737.345.33053.378.756.380.378.781.312.026.738.745.325/150.046.70.08.00.086.70.06.70.040.030/2052.077.3

10、56.075.378.784.00.017.344.045.3150.02.00.010.00.036.00.00.00.014.0200.068.00.060.00.084.00.06.00.032.02521.358.723.368.750.773.38.010.725.337.33026.762.728.774.753.370.79.318.721.328.025/150.01.30.02.70.064.00.06.70.020.030/2025.346.725.360.730.744.00.018.718.738.7150.08.00.08.00.056.00.00.00.08.020

11、0.070.00.072.00.086.00.016.00.036.02540.061.340.077.074.776.08.014.734.745.33049.364.049.380.064.073.36.78.041.344.025/150.058.70.076.70.080.00.012.00.036.030/2045.368.047.376.064.072.00.018.738.740.0湿沙蛭石海绵滤纸接受 SPSS11.0 单因素分析江西新建县样品，在温度相同时，不同培养床的发芽率无显著性差异。在蛭石培养床不同温度的SNK 比较的同类子集结果如表2 所示：表 2不同温度的 SNKS

12、tudent-Newman-Keuls ）比较alpha = 0.05的子集可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结温度N123可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结15.0032.000025/15311.666725.00317.000020.00318.666730/20318.666730.00319.6667显著性1.0001.000.1813.2 生活力的测定3.2.1 TTC 法结果见表 3。结果说明，生活力测定正确条件为TTC 浓度为 1%，染色的正确温度为 30，时间为 8h。分别测得各的所产蔓荆子的生活力见表2，蔓荆子生活力的判定标准参考图 1。可编辑资料

13、 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结）江西新建山东威海福建莆田广西防城浙江宁波40000062.04.04.02.03.0812.017.020.07.014.01024.027.035.013.021.0444.038.057.012.08.0666.062.082.018.030.0872.076.082.024.038.01072.076.082.024.038.0TTC浓度染色时间 可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结0.1%1%图 1 TTC 法蔓荆子种子的生活力的判定标准1-6 子叶与胚根都染色 , 为活性种子。 7 子叶染色，胚根未染色，为死种子。8 子叶局部染色胚

14、根未染色为死种子。 9 胚根和子叶只有小部分染色，为死种子。10 完全不着色为死种子。 11 胚根未着色，子叶有小部分染色为死种子。 12 染色反常，胚根未染色为死种子3.2.2 红墨水法结果见表4 和图 2 的 5,6。结果说明，红墨水法正确的染色条件为： 30，染色 2 小时。表 4红墨水法测定蔓荆子的生活力染色染色时间有生活力种子的百分比率 %可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结h）江西新建山东威海福建莆田广西防城浙江宁波0.579.084.084.038.041.0179.084.080.032.041.0278.080.078.032.040.0377.080.078.0

15、30.040.00.579.084.084.038.041.0174.083.080.030.040.0271.072.074.022.036.0370.072.071.022.036.0温度。 3 BTB 法测定的活种子。 4 BTB 法测定的死种子3.2.4 TTC 法和红墨水法所测得生活力和发芽率的对比争辩结果见表 5。结果说明：同一批种子所测得的发芽率均高于两种生活力测定法所得结果，两生活力测定方法中又以TTC 法高于红墨水法。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结表 5 TTC 法和红墨水法测定生活力的对比争辩不同测定方法测定的生活力%）产的TTC法红墨水法发芽率 %）可编

16、辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结江西新建72.070.078.7山东威海76.072.080.5福建莆田82.081.081.3广西防城24.022.026.7浙江宁波38.036.045.33.3生活力和发芽力的相关性 TTC 法测得的蔓荆子生活力和发芽力的相关系数用 SPSS11.0分析得 0.992 ， *P0.05 ，两者存在显著线性关系。相关与回来分析得到方程为 Y=0.967X+6.038 。红墨水法测得的蔓荆子生活力和发芽力的相关系数用 SPSS11.0分析得 0.989， * P0.05，两者存在显著线性关系。用相关与回来得到方程为 Y=0.967X+8.153 。

17、4 争辩4.1 TTC 法 、 红 墨 水 法 测 定 蔓 荆 子 生 活 力 和 发 芽 力 的 相 关 系 数 分 别 为 0.992* P0.05 ）、 0.989 ，* P0.05）。两者所测定的生活力与发芽率均呈显著正相关。但红墨水法易受操作过程中种子切口平整度等因素干扰造成假阳性而致结果误差较大，如附图22的 5， 6，而 TTC 法可以防止这一点，故宜接受TTC 法。 BTB 法测定生活力的原理是种子组 织活细胞进行呼吸作用，吸取O2，放出 CO 2，当 CO 2溶于水中生成为 H 2C03，可解离成 H+和可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结HCO-，使种子胚四周环

18、境的酸度增加，利用溴麝草酚蓝试剂测定酸度的变化，从而测定可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结种子的生活力。由于蔓荆子为核果，分为外、中、内三层果皮，对种子呼吸作用影响比较大，导致 BTB 的灵敏度降低而难于判定。戴铮、沈宇峰等7,8 争辩玉 M 和白术种子的生活力和发芽率的相关性时，发觉两者存在显著相关，借助回来方程利用生活力快速推断种子的发芽率，可解决生产实践中快速评判种子质量的问题，与本试验的结论一样。4.2 蔓荆子的发芽试验中，不同温度的SNK 比较结果说明，20、 25、30、30/20 四者之间无显著性差异，但与15、25/15 之间均存在显著性差异，说明20以下的温度不

19、适合蔓荆子的萌发。发芽势以 30最高，因此接受30恒温光照培养。参考文献1 国家药典委员会中华人民共和国药典M 2005 年版一部 S 北京：化学工业出版社，20O5：252- 253.2 牟宗慧 , 彭艳丽 , 刘红燕 , 等近 10 年蔓荆子的争辩进展 J 食品与药品， 2007，910）， 57-59.3 靳光乾 , 张卉 , 刘善新 , 等不同产的蔓荆子种子质量争辩J.种子， 2007，26,83-85.5 蒋允贤 , 何光荣 .汶上蔓荆子栽培与治理 J.山东医业 ,1989,83:32-33.6 陈奇，连晓嫒，毕明，等蔓荆子开发争辩J 江西中医药， 1991， 221 ：42-43.

20、7 戴铮.玉M种子发芽率与生活力的相关性争辩J 种子， 2004， 239:68-70.8 沈宇峰，王志安，俞旭平 , 等.白术种子生活力测定方法及其与发芽率的相关性争辩J 中国中药杂志， 2021，333:248-250.Measurement of Seed Viability and Correlation with Germination Rate for Vitex trifolia L. var. simplicifolia Cham.可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结LUO Guang-ming1*1,SUN Rong-jin,可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名

21、师归纳总结1JiangxiUniversity of TraditionalChinesemedicines,Nanchang 330004,2TaiHeAffliated Hospital of Yun Yang college, Shiyan 442000,China可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结Abstract Objectives: To screen the optimized seed viability test methods forVitex trifolia L.var. simplicifoliaCham, and then measure the co

22、rrelationbetween the germinationrateand seed viability. Methods: TTC 2,3,5-triphynel tetrazolilum chroride staining, red ink staining and BTB stainingwere used respectivelytoevaluate seed viabilityofV. trifoliaL.var. simplicifolia Cham.fromfivehabitats.Conditionsforseed germinationcontainedfour kind

23、s ofculture beds filter paper, sponge, sand and vermiculite and six temperature 15 , 20 , 25 , 30 , 30 then shift to 20 , 25 then shift to 15 . Results: Compared with the other two methods,TTC staining was the best one for the seed viability test. The seeds canreach to the highest germination rate o

24、n vermiculite culture bed in 30.There was a significant relationship between germination rateand seed viability tested by TTC staining, and the correlation coefficient can reached to 0.958.Theregression equationwas provedtobeY =0.0078X+0.1709X:seedsviability 。 Y: germination rate. Conclusions: TTC staining was the optimal method to determine seed viabilityof V. trifoliaL. var. simplicifoliaCham.Seed viability tested by this method was significant related with germination rate .Key words Vitex trifoliaL. var. simplicifoliaCham。 viability 。 germination rate 。 correlation可编辑资料 - - - 欢迎下载