高考生物实验详细版(共13页).doc
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1、精选优质文档-倾情为你奉上高考生物实验必修一一、观察核酸在细胞中的分布材料:人的口腔上皮细胞 试剂:甲基绿、吡罗红混合染色剂原理:甲基绿能使DNA呈现绿色,吡罗红能使RNA呈现红色,因此利用这两种染色剂将细胞染色,可以真核生物DNA主要分布在细胞核中,线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA;RNA主要分布在细胞质中。步骤:1、取材 滴:在洁净的载玻片上滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液(保持细胞渗透压); 刮:用消毒牙签在口腔内侧壁上轻轻地刮几下; 涂:将牙签上的碎屑涂抹在载玻片的生理盐水中; 烘:将涂有口腔上皮细胞的载玻片在酒精灯的火焰上烘干。2、水解 解:将烘干的载玻片放入装有30ml质量
2、分数为8%的盐酸(改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色质中的DNA和蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合)的小烧杯中,进行材料的水解; 保:将小烧杯放入装有30温水的大烧杯中保温5分钟。3、冲洗涂片 冲:用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10秒钟; 吸:用吸水纸吸去载玻片上的水分。4、染色 染:用2滴吡罗红甲基绿混合染色剂滴在载玻片上,染色5分钟; 吸:吸去多余染色剂; 盖:盖上盖玻片。5、观察 低:在低倍物镜下,寻找染色均匀,色泽浅的区域,移至视野中央,将物像调节清晰; 高:转到高倍物镜,调节细准焦螺旋,观察细胞核和细胞质的染色情况。实验结果: 细胞核呈绿色,细胞质呈红色注意事项: 盐
3、酸的作用改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色体中的DNA与蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合。二、检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质。1、还原糖(葡萄糖、果糖、麦芽糖)的检测试剂:斐林试剂(甲液:0.1g/ml的NaOH 乙液:0.05g/ml的CuSO4)颜色变化:浅蓝色砖红色沉淀步骤:取样液2mL于试管中加入刚配的斐林试剂1mL(斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入)水浴加热2min左右观察颜色变化(白色浅蓝色砖红色)注意事项: 甲乙液必须等量混合均匀后再加入样液中,现配现用必须用水浴加热2、脂肪的鉴定试剂:苏丹或苏丹染液 颜色变化:橘黄色或红色步骤: 制作切片(切片越
4、薄越好)将最薄的花生切片放在载玻片中央 染色(滴苏丹染液23滴切片上23min后吸去染液滴体积分数50%的酒精洗去浮色吸去多余的酒精) 制作装片(滴12滴清水于材料切片上盖上盖玻片) 镜检鉴定(显微镜对光低倍镜观察高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒)注意事项: 切片要薄,如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰,有的地方模糊。 50%酒精的作用是:洗去浮色 需使用显微镜观察3蛋白质的鉴定颜色变化:变成紫色试剂:双缩脲试剂( A液:0.1g/ml的NaOH B液: 0.01g/ml的CuSO4 )步骤:试管中加样液2mL加双缩脲试剂A液1mL,摇匀加双缩尿试剂B液4滴,摇匀观察颜色变化(紫色)注意事项:
5、 先加A液1ml,再加B液4滴 蛋清要先稀释4淀粉的检测和观察 试剂:碘液 颜色变化:变蓝三、使用显微镜观察多种多样的细胞。高倍镜的使用步骤(1)在低倍镜下找到物像,将物像移至视野中央。(2) 转动转换器,换上高倍镜。(3) 调节光圈和反光镜,使视野亮度适宜。 (4) 调节细准焦螺旋,使物像清晰。显微镜的放大倍数=目镜的放大倍数物镜的放大倍数面积的放大倍数=显微镜放大倍数的平方。 显微镜下的物像与实际上下,左右相反。四、用高倍显微镜观察线粒体和叶绿体。1实验原理(1)叶肉细胞中的叶绿体,呈绿色、扁平的椭球形或球形,散布于细胞质中,可以在高倍显微镜下观察它的形态。(2)线粒体普遍存在于动物细胞和
6、植物细胞中,健那绿染液(活细胞染液)能专一性使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而线粒体周围的细胞质中为无色的状态。通过染色,可以在高倍显微镜下观察到处于生活状态的线粒体的形态有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。2材料 藓类、菠菜或黑藻的叶,人的口腔上皮细胞。3方法步骤:1、观察叶绿体 低倍镜下找到叶片细胞高倍镜下观察。2、观察线粒体 取材染色制片低倍镜下找到口腔上皮细胞高倍镜下观察。五、观察植物细胞质壁分离和复原1原理:植物细胞的吸水和失水细胞内的液体环境主要指的是液泡里面的细胞液。原生质层:细胞膜和液泡膜以及两层膜之间的细胞质(相当于选择透过性膜)外界溶液浓度 细胞 液浓度时,细胞质壁分离外界溶液
7、浓度 细胞液浓度(不断失水)4、材料:紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞(具紫色大液泡),质量浓度0.3g/mL的蔗糖溶液,清水等。5、步骤:制作洋葱鳞片叶外表皮细胞临时装片观察盖玻片一侧滴蔗糖溶液,另一侧用吸水纸吸引观察(液泡由大到小,颜色由浅变深,原生质层与细胞壁分离)盖玻片一侧滴清水, 另一侧用吸水纸吸引观察(质壁分离复原)注意事项:低倍镜下观察填图并写出4、6、7处液体的颜色六、探究影响酶活性的因素1实验原理:淀粉遇碘后,形成紫蓝色的复合物。麦芽糖和葡萄糖遇碘后,不形成紫蓝色的复合物,但能与斐林试剂发生氧化还原反应,生成砖红色的氧化亚铜沉淀。2方法步骤:(1)温度对酶活性的影响编号123可溶性淀
8、粉液2ml2ml2ml温度601000新鲜的淀粉酶溶液1ml1ml1ml碘液,1滴1滴1滴实验结果未变蓝 变蓝 变蓝(2)pH对酶活性的影响编号123新鲜猪肝研磨液两滴两滴两滴pH盐酸蒸馏水氢氧化钠H2O2溶液2mL2 mL2 mL实验结果无气泡很多气泡无气泡3实验结论:(1)在最适宜的温度和最适宜的ph条件下,酶的活性最高。(2)低温导致酶活性下降,高温、过酸、过碱导致酶活性丧失。七、叶绿体色素的提取和分离1、原理:叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂无水乙醇提取色素 各色素在层析液中的溶解度不同,随层析液在滤纸上扩散速度不同分离色素2、步骤: (1)称取5g绿色叶片并剪碎 提取色素 研钵研磨漏斗
9、过滤 (2)加入少量SiO2、CaCO3和10ml无水乙醇 收集到试管内并塞紧管口 (1)将干燥的滤纸剪成10cm长,1cm宽的纸条,剪去一端两角(使层析液同时到制滤纸条 达滤液细线) (2)在距剪角一端1cm处用铅笔画线 (1)用毛细管吸少量的滤液沿铅笔线处小心均匀地划一条滤液细线,均匀,直,细,滤液划线 (2)干燥后重复划2-3次 (1)向烧杯中倒入3ml层析液(不能让滤液细线触及层析液)纸上层析 (2)将滤纸条尖端朝下略微斜靠烧杯内壁,轻轻插入层析液中 (3)用培养皿盖盖上烧杯(防止挥发)观察结果:滤纸条上出现四条宽度、颜色不同的彩带(如下图)最宽:叶绿素a; 最窄:叶绿素b;(含量)相
10、邻色素带最近:叶绿素a和叶绿素b;相邻色素带最远:胡萝卜素和叶黄素。(溶解度)注意事项:(1)二氧化硅:为了使研磨充分;碳酸钙:保护色素免受破坏;无水乙醇:色素的溶剂。(2)过滤时不能用滤纸,用尼龙布。(3)滤纸条要剪去两角:防止两侧层析液扩散过快。(4)滤液细线要直:防止色素带的重叠;干后要重画几次:增加色素量,使色素带的颜色更深一些。(5) 滤液细线不能触到层析液:防止色素溶解到层析液中。八、探究酵母菌的呼吸方式 1、原理:酵母菌是一种单细胞真菌,属于兼性厌氧菌 。在有氧条件下进行有氧呼吸,产生二氧化碳和水:C6H12O6 6O2 6H2O6CO2 12H2O 能量在无氧条件下进行无氧呼吸
11、,产生酒精和少量二氧化碳:C6H12O6 2C2H5OH 2CO2 少量能量2、装置:控制有氧无氧的条件:有氧条件的控制:向盛有酵母菌和葡萄糖溶液的锥形瓶(A瓶)中不断通入空气。通入A瓶前应先通入NaOH溶液是为了除去空气中的CO2,这样才能说明A瓶产生的CO2是酵母菌产生的。无氧条件的控制:密封盛有酵母菌和葡萄糖溶液的锥形瓶(B瓶)。B瓶应封口一段时间后再连通盛有澄清石灰水的锥形瓶,这样做是为了耗尽瓶内的氧气,以证明B瓶产生的CO2是在无氧条件下产生的。3检测:(1)检测CO2的产生:使澄清石灰水变浑浊或使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。(2)检测酒精的产生:橙色的重铬酸钾溶液,在酸性条件
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