紫外分光光度法测定维生素B1片的含量(共6页).doc

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1、精选优质文档-倾情为你奉上紫外分光光度法测定维生素B1片的含量 2011年5月8日星期日摘 要 本试验采用紫外分光光度法对维生素B1片的含量进行测定，对此法进行方法验证，证明了此法具有专属性高，回收率高、精密度高，线性好、测定范围宽的特点，并对数据处理方法进行了比较，发现采用对照品比较法进行数据处理受仪器波动影响较小，测定结果可信度较高。关键词 维生素B1 紫外分光光度法 含量测定 方法验证 对照品比较法维生素B1及其制剂及其制剂常采用的方法有非水滴定法，紫外分光光度法和硫色素荧光法。中国药典用非水溶液滴定法测定原料药，片剂和注射剂采用紫外分光光度法，USP采用硫色素荧光法。采用非水溶液滴定法

2、可能受到氢卤酸盐的干扰，对操作人员要求较高，采用硫色素滴定法不受氧化破坏产物的干扰，测定准确但操作繁琐，且荧光测定受干扰因素较多，本实验采用紫外分光光度法进行含量测定。1 实验装置及试剂1.1 仪器 BS210S型天平，UV751GD型紫外/可见分光光度计。1.2 实验材料 维生素B1片（来源：成都第一制药，规格：1-00片*10mg，批号：），维生素B1标准品（分析纯），维生素B1对照品（200ug/ml，2.0mg/ml），维生素B1标准溶液（0.250mg/ml），空白辅料，盐酸溶液（91000）。2 实验方法 处方分析：组成处方量(g)比例(%)维生素B11016.39淀粉2032.7

3、8糊精3049.18硬脂酸镁1.01.639生产1000片 根据处方量分析，维生素B1含16.39%，辅料含83.61%。平均片重约61mg，取相当于25mg维生素B1的片粉约0.15g。1、测定方法：取供试品20片，精密称定，研细，称取片粉适量（约相当于维生素B125mg），置100ml量瓶中，加盐酸溶液（91000）约70ml，振摇15min使维生素B1溶解，再加盐酸溶液（91000）稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液5ml，置另一100ml量瓶中，加盐酸溶液（91000）稀释至刻度，摇匀，照分光光度法，在246nm的波长处测定吸收度，按C12H17ClN4OS.HCl的吸收

4、系数（）为421计算，即得。2、方法验证2.1.线性和范围精密称取维生素B1对照品约25mg，置100 ml量瓶中，加盐酸溶液（91000）溶解并稀释至刻度，制备成含维生素B1 250g/ml的对照溶液。分别精密量取该溶液3、4、5、6、7ml置100ml量瓶中，加盐酸溶液（91000）稀释至刻度，摇匀，即得系列浓度的对照品溶液，照分光光度法，在246nm的波长处测定吸收度，以吸收度（A）对浓度（C）回归处理，得标准曲线和回归方程。2.2. 回收试验（准确度试验）对照品溶液的制备：对照品溶液的制备，同2.1项下。供试品溶液的制备：精密称取维生素B1精制原料约0.25g，置50ml量瓶中，加入盐

5、酸溶液（91000）稀释至刻度，摇匀，制成5.0mg/m维生素B1溶液储备液；分别精密量取该溶液4、5、6ml置已加入比例量辅料（0.15g，1/100天平）的100ml量瓶中（一式三份），加盐酸溶液（91000）约70ml，振摇使之溶解，再加盐酸溶液（91000）稀释至刻度，滤过，精密量取续滤液5ml，置另一100ml量瓶中，摇匀，得高、中、低三种浓度的试验溶液，照分光光度法，在246nm的波长处测定吸收度，用对照品比较法计算含量。2.3、精密度试验取供试品20片，精密称定，研细，称取片粉适量（约相当于维生素B125mg），一式5份，置100ml量瓶中，加盐酸溶液（91000）适量，振摇15

6、min，再加盐酸溶液（91000）稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置另一100ml量瓶中，加盐酸溶液（91000）稀释至刻度，摇匀，即得约含维生素B112.5ug/ml的供试品溶液。另取维生素B1对照品适量，用盐酸溶液（91000）稀释制成12.5g/ml的对照品溶液。照分光光度法（ChP2005二部附录IVA）在246nm处分别测定供试品溶液和对照品溶液的吸光度，用百分吸光度和对照品比较法分别进行计算，即得。表1 维生素B1标准曲线的制备编号 1 2 3 4 5对照液浓度 7.50 10.00 12.50 15.00 17.50（ug/ml）吸光度A 0.312 0.391 0

7、.480 0.559 0.640图2 维生素B1标准曲线图由图2可得，采用此法进行维生素B1含量的测定，在浓度为8.00-16.00ug/ml范围内线性关系较好（R=0.9997）。表2 维生素B1片回收率实验结果编号加入量（mg）对照液浓度（ug/ml）吸光度A测得对照液浓度（ug/ml）回收率（%）110.0010.000.3709.2692.6210.0010.000.3709.2692.6310.0010.000.3709.2692.6412.5012.500.45511.8494.7512.5012.500.45611.8795.0612.5012.500.45511.8494.77

8、15.0015.000.53914.3895.9815.0015.000.53914.3895.9915.0015.000.54114.4496.3123XRSDRSD高95.9%95.9%96.3%96%0.24%1.6%中94.7%95.0%94.7%94.8%0.18%低92.6%92.6%92.6%92.6%0回收率平均值(%)=94.48%RSD=1.6%由表2可得，采用此法进行维生素B1含量的测定，加入量在10.00-15.00mg范围内，对照液浓度在10.00-15.00ug/ml范围内时，回收率较高。表3 维生素B1片精密度考察实验结果编号加入片粉量（g）吸光度A浓度（ug/m

9、l）百分吸光度法（%）对照品比较法（%）标准曲线%10.17240.43112.5781.4495.8888.3820.17300.42712.6180.4394.6987.1430.17230.42812.6180.6294.9187.3840.17160.42512.5180.7095.0087.3550.17230.43312.5681.8996.4089.03对照品0.44712.50 当m=0.1715g 维B1浓度 12.50ug/mlRSD1（百分吸光度法）=0.8%RSD2（对照品比较法）=0.8%RSD3（标准曲线法）=0.9%表4 维生素B1片含量测定结果测定方法含量为标示

10、量的百分数范围含量为标示量的百分数均值百分吸光度法84.43%-81.89%81.02%对照品比较法标准曲线法94.69%-96.40%87.14%-89.03%95.38%87.86%百分吸光度法：含量不符合规定标准。对照品比较法：含量符合规定标准。标准曲线法：含量符合规定标准。实验讨论本次试验中分别采用百分比吸光度法、标准曲线法和对照品比较法所测定结果精密度均较好，但结果相差较大，可能是由于仪器波长变动所引起的系统误差，由于采用百分吸光度法进行测定极易受到仪器稳定性的影响，因此此次试验中标准曲线法和对照品比较法所测定结果比百分吸光度法所测得结果可信度更高。图1 紫外/可见光区进行全波长扫描图（维生素B1标准品，维生素B1片粉，维生素B1空白辅料） 维生素B1片辅料紫外扫描图 维生素B1片紫外扫描图维生素B1对照品紫外扫描图 维生素B1对照品、片剂和辅料紫外扫描图由上图可得，维生素B1在246nm波长处有最大吸收，且吸收峰受可能干扰组分的干扰较小，专属性强，为理想的测定波长。1 吴勇，成丽等，现代药学实验教程，成都：四川大学华西药学院，20052 李发美，分析化学，北京：人民卫生出版社，20053 刘文英，药物分析，北京：人民卫生出版社，2007专心-专注-专业