品红亚硫酸钠培养基(共3页).doc

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1、精选优质文档-倾情为你奉上编号：中文名称： 品红亚硫酸钠培养基(远藤琼脂培养基)英文名称:Endo Agar用 途：用于水中大肠菌群的分离或确证试验。 (GB/T8538-2008和GB5750.122006)。原 理：乳糖发酵的细菌产生乙醛，在存在碱性品红的情况下乙醛与亚硫酸钠结合形成红色菌落，快速发酵乳糖的细菌产生金属光泽，不发酵乳糖的细菌形成无色透明的菌落。蛋白胨、酵母膏粉、牛肉膏粉提供碳氮源、维生素和矿物质;乳糖为可发酵的糖类;琼脂是培养基的凝固剂;磷酸氢二钾为缓冲剂;亚硫酸钠能将碱性品红还原，使其褪色，发酵乳糖的细菌产生乙醛，与亚硫酸钠和碱性品红生成红色菌落。环凯培养基图鉴：配方(每

2、升)：蛋白胨10g酵母膏粉5g牛肉膏粉5g乳糖10g琼脂15g磷酸氢二钾3.5g无水亚硫酸钠5g碱性品红 1g最终pH 7.20.2使用方法：1、 称取本品54.5g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，115高压灭菌20min，冷至50左右，倾注无菌平皿，备用。2、 滤膜灭菌：将孔径为0.45m的滤膜放入烧杯中，加入蒸馏水或去离子水，置于沸水浴中煮沸灭菌三次，每次15min。前两次煮沸后需更换水洗涤2-3次，以除去残留溶剂。3、 滤器灭菌：用点燃的酒精棉球，火焰灭菌。也可用121高压灭菌20min。4、 过滤水样：用无菌镊子夹取灭菌滤膜边缘部分，将粗糙面向上，贴放

3、在已灭菌的滤床上，固定好滤器，将100mL水样(如水样含菌较多，可减少过滤水样量，或将水样稀释)注入滤器中，打开滤器阀门，负0.5大气压下抽滤。5、 培养：水样抽滤完后，再抽气约5S，关上滤器阀门，取下滤器，用灭菌镊子夹取滤膜边缘部分，移放在品红亚硫酸钠培养基上，滤膜截留面向上，滤膜应与培养基完全贴紧，两者间不得留有气泡，然后将平皿倒置，放入361恒温箱内培养22-24h。6、 观察结果：挑出符合下列特征菌落进行革兰氏染色、镜检。紫红色，具有金属光泽的菌落。深红色，不带或略带金属光泽的菌落。淡红色，中心色较深的菌落。质量控制：本培养基倾注平皿待冷却后呈浅红色。质控菌株接种后。361培养2224h， 观察结果如下表：菌 名 菌 号生长状况菌落特征ATCC25922 良好红色，有金属光泽鼠伤寒沙门氏菌CMCC(B)50115良好无色至淡粉红色金黄色葡萄球菌ATCC6538 不长或差 贮 存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。规格：250g专心-专注-专业