免疫检验项目标准操作程序(共26页).doc

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1、精选优质文档-倾情为你奉上XXXXXX医院检验项目标准操作程序 ( SOP)责任部门: 免疫室 文件编号: XXXX-JYK-MY-XM 版本/修订号: B/1 ,共 25 页 编 写 者: XXX XXX XXX 审 核 者: XXX 批 准 者: 批准日期: 2012年09月27日 实施日期: 2012年10月01日 科 主 任: XXX 目 录1. 乙肝病毒表面抗原诊断操作规程 12. 乙肝病毒表面抗体诊断操作规程 23. 乙肝病毒e抗原诊断操作规程 34. 乙肝病毒e抗体诊断操作规程 45. 乙肝病毒核心抗体诊断操作规程 56. 甲型肝炎病毒IGM抗体诊断操作规程67. 戊型肝炎病毒I

2、gG抗体诊断操作规程 78. 人类免疫缺陷病毒抗体检测规程 99. 抗双链DNA检测程序 1110.抗核抗体检测程序1211.TORCH-IgM四联检测规程1312. EB病毒抗体检测程序1413.可提取性核抗体原自身抗体操作规程1514.抗精子抗体检测规程1715.抗子宫内膜抗体检测规程1816.HPV抗体检测规程 1917.结核分支杆菌抗诊断试剂2018.梅毒甲苯胺红不加热血清试验2219.流行性出血热IGM2420. 丙型肝炎病毒抗体诊断 25专心-专注-专业乙肝病毒表面抗原诊断操作规程一、操作步骤：1、将试剂盒从冰箱中取出至室温中平衡30分钟后使用。2、将标本对应微孔按顺序编号。3、每

3、孔加入待测标本50微升，设阴、阳性对照各两孔，每孔加入阴性对照（或阳性对照）各1滴，并设空白对照1孔。4、每孔加入酶结合物1滴，（空白对照孔除外）充分混匀，封板，置37度孵育30分钟。5、手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5秒，甩干，重复5次后拍干。 洗板机洗板：选择洗涤5次程序后拍干。6、每孔加显色剂A液、B液各1滴，充分混匀，封板，置37度孵育15分钟。7、每孔加终止液1滴，混匀。8、用酶标仪读数，取波长450nm（建议使用双波长的酶标仪比色，参考波长630nm），先用空白孔校零，然后读取各孔OD值。二、结果判断：样品OD值/阴性对照平均OD值大于等于2.1判断为阳性，否则为阴性

4、。阴性对照OD值低于0.05作0.05计算，高于0.05按实际OD值计算。三、注意事项：1、使用前试剂应摇匀，并弃去12滴后垂直滴加。2、封片不能重复使用。3、结果判断须在反映终止后10分钟内完成。4、不同批号的试剂不可混用。5、待测标本不可用NaN3防腐，如需稀释标本，请用小牛血清稀释。6、试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程处理。乙肝病毒表面抗体诊断操作规程一、操作步骤：1、将试剂盒从冰箱中取出至室温中平衡30分钟后使用。2、将标本对应微孔按顺序编号。3、每孔加入待测标本50微升，设阴、阳性对照各两孔，每孔加入阴性对照（或阳性对照）各1滴，并设空白对照1孔。4、每孔加入酶结合

5、物1滴，（空白对照孔除外）充分混匀，封板，置37度孵育30分钟。5、手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5秒，甩干，重复5次后拍干。 洗板机洗板：选择洗涤5次程序后拍干。6、每孔加显色剂A液、B液各1滴，充分混匀，封板，置37度孵育15分钟。7、每孔加终止液1滴，混匀。8、用酶标仪读数，取波长450nm（建议使用双波长的酶标仪比色，参考波长630nm），先用空白孔校零，然后读取各孔OD值。二、结果判断：样品OD值/阴性对照平均OD值大于等于2.1判断为阳性，否则为阴性。阴性对照OD值低于0.05作0.05计算，高于0.05按实际OD值计算。三、注意事项：1、使用前试剂应摇匀，并弃去12

6、滴后垂直滴加。2、封片不能重复使用。3、结果判断须在反映终止后10分钟内完成。4、不同批号的试剂不可混用。5、待测标本不可用NaN3防腐，如需稀释标本，请用小牛血清稀释。6、试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程处理。乙肝病毒e抗原诊断操作规程一、操作步骤：1、将试剂盒从冰箱中取出至室温中平衡30分钟后使用。2、将标本对应微孔按顺序编号。3、每孔加入待测标本50微升，设阴、阳性对照各两孔，每孔加入阴性对照（或阳性对照）各1滴，并设空白对照1孔。4、每孔加入酶结合物1滴，（空白对照孔除外）充分混匀，封板，置37度孵育30分钟。5、手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5秒，甩干

7、，重复5次后拍干。 洗板机洗板：选择洗涤5次程序后拍干。6、每孔加显色剂A液、B液各1滴，充分混匀，封板，置37度孵育15分钟。7、每孔加终止液1滴，混匀。8、用酶标仪读数，取波长450nm（建议使用双波长的酶标仪比色，参考波长630nm），先用空白孔校零，然后读取各孔OD值。二、结果判断：样品OD值/阴性对照平均OD值大于等于2.1判断为阳性，否则为阴性。阴性对照OD值低于0.05作0.05计算，高于0.05按实际OD值计算。三、注意事项：1、使用前试剂应摇匀，并弃去12滴后垂直滴加。2、封片不能重复使用。3、结果判断须在反映终止后10分钟内完成。4、不同批号的试剂不可混用。5、待测标本不可

8、用NaN3防腐，如需稀释标本，请用小牛血清稀释。6、试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程处理。乙肝病毒e抗体诊断操作规程一、操作步骤：1、将试剂盒从冰箱中取出至室温中平衡30分钟后使用。2、将标本对应微孔按顺序编号。3、每孔加入待测标本50微升，设阴、阳性对照各两孔，每孔加入阴性对照（或阳性对照）各1滴，并设空白对照1孔。4、每孔加入酶结合物1滴，（空白对照孔除外）充分混匀，封板，置37度孵育30分钟。5、手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5秒，甩干，重复5次后拍干。 洗板机洗板：选择洗涤5次程序后拍干。6、每孔加显色剂A、B液各1滴，充分混匀，封板，置37度孵育15分

9、钟。7、每孔加终止液1滴，混匀。8、用酶标仪读数，取波长450nm（建议使用双波长的酶标仪比色，参考波长630nm），先用空白孔校零，然后读取各孔OD值。二、结果判断：Cutoff Value计算：COV=阴性对照平均OD值+阳性对照平均OD值/2标本OD值大于等于COV为阴性，标本OD值小于COV为阳性。三、注意事项：1、使用前试剂应摇匀，并弃去12滴后垂直滴加。2、封片不能重复使用。3、结果判断须在反映终止后10分钟内完成。4、不同批号的试剂不可混用。5、待测标本不可用NaN3防腐，如需稀释标本，请用小牛血清稀释。6、试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程处理。乙肝病毒核心抗体

10、诊断操作规程一、操作步骤：1、将试剂盒从冰箱中取出至室温中平衡30分钟后使用。2、将标本对应微孔按顺序编号。3、每孔加入待测标本50微升（待测标本用生理盐水1：30稀释，检测结果为临床意义，请用户自行选择），设阴、阳性对照各两孔，每孔加入阴性对照（或阳性对照）各1滴，并设空白对照1孔。4、每孔加入酶结合物1滴，（空白对照孔除外）充分混匀，封板，置37度孵育30分钟。5、手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5秒，甩干，重复5次后拍干。 洗板机洗板：选择洗涤5次程序后拍干。6、每孔加显色剂A液、B液各1滴，充分混匀，封板，置37度孵育15分钟。7、每孔加终止液1滴，混匀。8、用酶标仪读数，

11、取波长450nm（建议使用双波长的酶标仪比色，参考波长630nm），先用空白孔校零，然后读取各孔OD值。二、结果判断：Cutoff Value计算：原倍血清COV=阴性对照平均OD值乘以0.3。1：30稀释血清COV=阴性对照平均OD值乘以0.5。标本OD值大于等于COV为阴性，标本OD值小于COV为阳性。三、注意事项：1、使用前试剂应摇匀，并弃去12滴后垂直滴加。2、封片不能重复使用。3、结果判断须在反映终止后10分钟内完成。4、不同批号的试剂不可混用。5、待测标本不可用NaN3防腐，如需稀释标本，请用小牛血清稀释。6、试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程处理。甲型肝炎病毒IG

12、M抗体诊断操作规程一、操作步骤：1、将试剂盒从冰箱中取出，至室温中平衡30分钟后使用。2、将标本对应微孔按顺序编号。3、代待测标本用生理盐水作1：1000稀释，每孔加入稀释标本100微升，设阴，阳性对照各2孔，每孔加入阴性对照（或阳性对照）各2滴，并设空白对照1孔，封板，置37度孵育20分钟。4、手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5秒，甩干，重复3次后拍干。 洗板机洗板：选择洗涤3次程序后拍干。5、每孔加入HAVAg1滴，酶结合物1滴（空白对照孔不加），充分混匀，封板，置37度孵育20分钟。6、手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5秒，甩干，重复5次后拍干。 洗板机洗板：选择

13、洗涤5次程序后拍干。7、每孔加显色剂A液、B液各1滴，充分混匀，封板，置37度孵育10分钟。8、每孔加终止液1滴，混匀。9、用酶标仪读数，取波长450nm（建议使用双波长的酶标仪比色，参考波长630nm），先用空白孔校零，然后读取各孔OD值。二、结果判断：COV=样品OD值/阴性对照平均OD值大于等于2.1判断为阳性，否则为阴性。阴性对照OD值低于0.05作0.05计高于0.05按实际OD值计。三、注意事项：1、使用前试剂应摇匀，并弃去12滴后垂直滴加。2、封片不能重复使用。3、结果判断须在反映终止后10分钟内完成。4、不同批号的试剂不可混用。5、使用试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室

14、检查规程处理。戊型肝炎病毒IGg抗体诊断操作规程一、测定步骤：1、将试剂盒从冰箱中取出，至室温中平衡30分钟后使用。2、将标本对应微孔按顺序编号。3、每次实验均需设立空白对照2孔，阳性对照2孔，阴性对照2孔。4、每孔加样品稀释液100微升。（阳性对照孔、阴性对照孔除外）空白对照直接加入样品稀释液100微升。5、加待测标本，每孔10微升。阳性对照、阴性对照不需稀释，直接加入100微升于各相应孔内。震荡混匀，封板，置37度孵育30分钟。6、手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5秒，甩干，重复5次后拍干。 洗板机洗板：选择洗涤5次程序后拍干。7、每孔加入酶结合物100微升（或两滴），封板，置

15、37度孵育30分钟。8、手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5秒，甩干，重复5次后拍干。 洗板机洗板：选择洗涤5次程序后拍干。9、每孔加显色剂A液、B液各50微升（或一滴），充分混匀，封板，置37度孵育10分钟。10、每孔加终止液1滴，混匀。11、用酶标仪读数，取波长450nm（建议使用双波长的酶标仪比色，参考波长630nm），先用空白孔校零，然后读取各孔OD值。二、结果判断：Cutoff Value的计算：COV=阴性对照平均OD值+0.22标本OD值大于等于Cut off Value为阳性标本OD值小于Cut off Value为阴性阴性对照平均OD值小于0.05，按实际计，若阴性

16、对照平均OD大于等于0.05，按0.05计。三、注意事项：1、使用前试剂应摇匀。2、封片不能重复使用。3、结果判断须在反映终止后10分钟内完成。4、若试验结果阴阳性对照有疑问，该试验视为无效，需重做。5、洗涤液用前需25倍稀释，若洗涤液出现结晶，可置37度使之溶解。6、不同批号的试剂不可混用。7、使用试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程处理。人类免疫缺陷病毒抗体检测规程一、操作步骤：1、将试剂盒从冰箱中取出，至室温中平衡30分钟后使用。2、将标本对应微孔按顺序编号。3、配液：将50ml浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水20倍稀释至1000ml备用。4、编号：将样品对应微孔按序编号，每板

17、应设阴性对照3孔，阳性对照一型、二型各一孔，空白对照一孔。5、加样：分别在相应孔中加入待测样品或阴、阳性对照100ul。6、温育：覆盖黏胶纸，置37度孵育30分钟。7、取出已孵育完毕的反应板，弃去粘胶纸，吸干板内液体，将洗涤液注满各孔（约300微升/孔），吸干，反复5次，在干净纱布上将板拍干。8、每孔加酶结合物100微升，取新粘胶纸覆盖放映板，置37度孵育30分钟。9、取出已孵育完毕的反应板，弃去粘胶纸，吸干板内液体，将洗涤液注满各孔（约300微升/孔），吸干，反复5次，在干净纱布上将板拍干。10、每孔加入底物缓冲液50微升，TMB50微升，混匀，置37度显色10分钟。11、加终止液50微升震

18、荡反应板5秒钟，使之充分混匀。12、在酶标度数仪上，取波长450nm（建议使用双波长酶标仪比色，参考波长630nm），仪空白对照孔校零，读取每孔吸收值（加终止液后，务必在15分钟内读数完毕）二、结果判断：抗HIV阳性对照OD值大于0.8，抗HIV阴性对照OD值小于0.08。Cutoff Value=阳性对照值乘以10%（若阳性对照OD值大于2.5按2.5计算）标本OD值小于等于Cutoff Value为阴性。标本OD值大于Cutoff Value为阳性。三、注意事项：1、在试剂的使用单位必须使当地卫生行政部门标准的HIV初筛试验室。2、整个检测工作必须符合HIV试验室管理范围和生物安全守则规定

19、，严格防止交叉感染。操作时必须带手套，穿工作服，严格健全和执行消毒隔离制度。3、HIV检测结果的判定不许以酶标仪的读数为准。4、标本和酶结合物均应用加样器加注，并经常校对其准确性。5、所有样品、洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。6、洗涤液若出现结晶，可置37度溶解。7、粘胶纸不能反复使用。8、微孔条从冷藏环境中取出时，应在室温平衡至无潮气方可使用，未用完的须放入有干燥剂的密封袋中保存。抗双链DNA检测程序一、操作步骤：1、将试剂盒从冰箱中取出，至室温中平衡30分钟后使用。2、将标本对应微孔按顺序编号。3、滴入2滴试剂一（洗涤液）于反应板中央孔中，待完全渗入。4、滴入100ul血清于反应板孔中

20、待完全渗入。5、滴加3滴试剂二（金标液）于反应板孔中，待完全渗入。6、滴入三滴试剂一于反应板孔中，待完全渗入。二、结果判断阳性：反应板孔中央出现2个红色圆斑，为阳性。阴性：反应板孔中央出现1个红色圆斑，为阴性。三、注意事项：1、若遇冬天室内温度较低时（16度左右），可在37度水浴箱内操作。2、陈旧血清盒高脂血症血清一般不宜使用。3、如果质控斑点太浅请多加2滴市集二。若膜的背景较深，可多滴几滴试剂二。若膜的背景较深，可多滴加几滴试剂一充分洗涤。阳性斑点较弱时，可延长至20分钟观察结果。4、检测一旦开始操作，应按操作步骤连续进行，直至结束。抗核抗体检测程序一、操作步骤：1、将试剂盒从冰箱中取出，至

21、室温中平衡30分钟后使用。2、将标本对应微孔按顺序编号。3、滴入2滴试剂一（洗涤液）于反应板中央孔中，待完全渗入。4、滴入100ul血清于反应板孔中待完全渗入。5、滴加3滴试剂二（金标液）于反应板孔中，待完全渗入。6、滴入三滴试剂一于反应板孔中，待完全渗入。二、结果判断阳性：反应板孔中央出现2个红色圆斑，为阳性。阴性：反应板孔中央出现1个红色圆斑，为阴性。三、注意事项：1、若遇冬天室内温度较低时（16度左右），可在37度水浴箱内操作。2、陈旧血清盒高脂血症血清一般不宜使用。3、如果质控斑点太浅请多加2滴试剂2。若膜的背景较深，可多滴几滴试剂2。若膜的背景较深，可多滴加几滴试剂1充分洗涤。阳性斑

22、点较弱时，可延长至20分钟观察结果。4、检测一旦开始操作，应按操作步骤连续进行，直至结束。TORCH-IgM四联检测规程一、操作步骤：1、取出试剂盒，室温放置510分钟。2、取出检测板，在中央孔加A液200ul（四滴），待渗入。3、加待测血清200ul（四滴），待渗入。4、加A液洗涤液100ul（2滴），待渗入。5、加B液检测液200ul（四滴），待渗入。6、在加A液150ul（3滴），然后直接观察结果。二、结果判断：阴性：仅质控点出现红色斑点为阴性反应。阳性：除质控点出现红色斑点外，四角的检测点也有红色或浅红色斑点出现。哪一个检测点出现红色斑点即为相应的IgM抗体阳性。如左上角检测点TOX出

23、现红色斑点即为弓形体IgM抗体阳性；左上角TOX和左下角CMV出现红色斑点为弓形虫和巨细胞病毒检测双阳性；左上角TOX和左下角CMV，和右上角RUV出现红色斑点为弓形虫、巨细胞病毒和风疹病毒三项阳性；左上角TOX，左下角CMV、右上角RUV、和右下角HSV二出现红色斑点即为弓形虫、巨细胞病毒、风疹病毒和单纯疱疹病毒二型检测阳性。EB病毒抗体检测程序一、操作步骤：1、将试剂盒从冰箱中取出，至室温中平衡30分钟后使用。2、将标本对应微孔按顺序编号。3、滴入2滴试剂一（洗涤液）于反应板中央孔中，待完全渗入。4、滴入100ul血清于反应板孔中待完全渗入。5、滴加3滴试剂二（金标液）于反应板孔中，待完全

24、渗入。6、滴入三滴试剂一于反应板孔中，待完全渗入。二、结果判断阳性：反应板孔中央出现2个红色圆斑，为阳性。阴性：反应板孔中央出现1个红色圆斑，为阴性。三、注意事项：1、若遇冬天室内温度较低时（16度左右），可在37度水浴箱内操作。2、陈旧血清盒高脂血症血清一般不宜使用。3、如果质控斑点太浅请多加2滴试剂2。若膜的背景较深，可多滴几滴试剂2。若膜的背景较深，可多滴加几滴试剂1充分洗涤。阳性斑点较弱时，可延长至20分钟观察结果。4、检测一旦开始操作，应按操作步骤连续进行，直至结束。可提取性核抗体原自身抗体操作规程一、操作步骤：1、将试剂盒从冰箱中取出，至室温中平衡30分钟后使用。2、将标本对应微孔

25、按顺序编号。3、按所需量将浓缩洗涤液用蒸馏水1：10稀释。4、取出反应槽，每槽加入0.5ml洗涤液然后加入待检血清10ul，充分混匀，缓慢摇动于37度孵育30分钟。5、弃去槽内液体，再吸水纸上拍干，用洗涤液洗涤4次，每次每槽1ml洗涤一分钟。6、每槽加入洗涤液0.5ml，酶标抗体20ul，混匀，缓慢摇动于37度孵育30分钟。7、弃去槽内液体，再吸水纸上拍干，用洗涤液洗涤4次，每次每槽1ml洗涤一分钟。8、加入显色液A液B液各0.5ml，室温反应10分钟。9、每槽加入0.5ml终止液，终止反应，1分钟后弃去液体，用自来水洗涤数次，取出膜条，用吸水纸吸干后即可进行结果判断。二、结果判断：1、结果判

26、断请参看标准谱带图，零位线下约2mm出的第一条显色带为试剂质控线，此显色带若不出现，说明试剂失效。2、判断结果时，要注意将谱带定位与带型结合起来。带型指一种抗体有多条区带时，区带间相对不变的位置关系构成的图形。如抗Scl-70常出现2-3条；抗DE（抗Liu）常出现5-6条等等。谱带定位时与标准带相差1mm内属允许范围。3、本试剂盒也可做DM-53、抗RA-54检测，类风关病人除有54KD抗体外。也可出现36KD。三、注意事项：1、浓缩洗涤液需临用前稀释，整个操作中，洗涤液用量大约为每人份10ml，可参照此量稀释。未用完的洗涤液弃之，不可留作下次用。2、全部操作最好再生化平台上摆动进行，改用手

27、工间隙晃动也可检测，但敏感性会有所下降。3、显色液A、B需恢复至室温放可使用。显色液有棕色颗粒时。不影响检测结果。4、标准带谱为根据相应标准血清定位后，用电脑制作，每个试剂盒对应一张标准带谱，进行结果判断时，不同试剂盒间的标准带谱不能混用，要注意膜条铝塑带上批号与标准带谱下方批号一致。5、不同血清标本，不同带型，显色强度会不一致。遇到弱阳性结果时，请仔细观察。6、诊断不应该只建立在单个检测基础上，所有检测结果必须考虑病人的临床病史和（或）其他检测结果。抗精子抗体检测规程一、操作步骤：1、将试剂盒从冰箱中取出，至室温中平衡30分钟后使用。2、将标本对应微孔按顺序编号。3、滴加2滴标本稀释液于各标

28、本得反应孔中（空白及阴、阳对照孔不加）4、取5ul血清加于反应孔内，用移液器反复吹打几次，直至孔内液体由绿色变为兰色，阴性、阳性对照孔各加一滴阴性阳性对照。5、将反应板震荡使样品充分混允（震荡30秒）后，置37度水浴20分钟。6、先用蒸馏水将40倍得浓缩洗涤液稀释，（1）手洗：甩去孔内液体用洗涤液注满各孔，放置20秒后用力甩去，重复5次后拍干。（2）机洗：5次，每孔注满洗涤液，停留20秒后尽力拍干。7、每孔加酶结合物1滴，置37度水浴10分钟。8、每孔加底物A液、B液各一滴，置37度水浴10分钟。9、自水浴箱取出后马上自测或立即加一滴终止液，混匀后用酶标仪读取结果。二、结果判断：1、目测法：无

29、色为阴性，兰色为阳性。2、比色法：在450nm波长下用空白孔调零读取各孔OD值。标本孔OD值大于等于0.3为阳性。标本孔OD值小于0.3为阴性。三、注意事项：1、不同批号的试剂请勿混用，操作时反应板置把白色背景下加样变色更明显。2、洗涤时各孔须加满，防止孔中有游历酶不能洗净。3、试剂凭用前应摇匀。标本不可反复冻融，避免用溶血浑浊标本。4、请将拆封后未用完的板条，放入自封口袋内封紧保存。抗子宫内膜抗体检测规程一、操作步骤：1、将试剂盒从冰箱中取出，至室温中平衡30分钟后使用。2、将标本对应微孔按顺序编号。3、滴加2滴标本稀释液于各标本得反应孔中（空白及阴、阳对照孔不加）4、取5ul血清加于反应孔

30、内，用移液器反复吹打几次，直至孔内液体由绿色变为兰色，阴性、阳性对照孔各加一滴阴性阳性对照。5、将反应板震荡使样品充分混允（震荡30秒）后，置37度水浴20分钟。6、先用蒸馏水将40倍得浓缩洗涤液稀释，（1）手洗：甩去孔内液体用洗涤液注满各孔，放置20秒后用力甩去，重复5次后拍干。（2）机洗：5次，每孔注满洗涤液，停留20秒后尽力拍干。7、每孔加酶结合物1滴，置37度水浴10分钟。8、每孔加底物A液、B液各一滴，置37度水浴10分钟。9、自水浴箱取出后马上自测或立即加一滴终止液，混匀后用酶标仪读取结果。二、结果判断：1、目测法：无色为阴性，兰色为阳性。2、比色法：在450nm波长下用空白孔调零

31、读取各孔OD值。标本孔OD值大于等于0.3为阳性。标本孔OD值小于0.3为阴性。三、注意事项：1、不同批号的试剂请勿混用，操作时反应板置把白色背景下加样变色更明显。2、洗涤时各孔须加满，防止孔中有游历酶不能洗净。3、试剂凭用前应摇匀。标本不可反复冻融，避免用溶血浑浊标本。4、请将拆封后未用完的板条，放入自封口袋内封紧保存。HPV抗体检测规程一、操作步骤：1、将试剂盒从冰箱中取出，至室温中平衡30分钟后使用。2、将标本对应微孔按顺序编号。3、将10样本稀释液和20洗涤液用蒸馏水分别稀释成1应用液。4、样本血清按1：100稀释。5、阳性对照、阴性对照、标准血清孔，每孔先加100ul生理盐水，再分别

32、取相应血清10ul加入孔中。6、将已稀释的样本血清分别加入到酶标板中，每孔100ul。放置37度，20分钟后弃去孔内液体。7、洗板：酶标板每孔加入洗涤液250ul、30秒后弃去孔中液体，重复洗板3次，拍干。8、加酶结合物：每孔两滴，37度20分钟后弃去孔中液体，洗板4次，拍干。9、显色与终止：分别加底物A、底物B各一滴，室温避光显色，见标准血清出现浅兰色时（约十分钟），目测判定结果；或每孔加终止液1滴，测OD值。二、结果判断：1、目测：颜色深于或等于标准血清者为阳性，否则为阴性。2、以酶标仪450nm波长测定各孔OD值，样品OD值大于或等于标准血清为阳性，否则为阴性。三、注意事项：1、不同批试

33、剂不得混用。2、再有效期内使用。结核分支杆菌抗诊断试剂 本品采用纯化的结核分支杆菌特异性外膜抗原，利用斑点免疫金渗滤试验原理，检测人血清中结核分支杆菌抗体，用于结核病的辅助诊断。试剂盒组成1.反应板 20人份 4.金标液 1x3.0ml2.封闭液 1x4.0ml 5.阴性对照 1x0.1ml3.洗涤液 2x7.0ml 6.阳性对照 1x0.1ml使用方法1.在检测板的反应孔中间，加入两滴封闭液，等待薄膜吸入；2.取40微生新鲜的血清标本，加入反应孔中间，等待薄膜吸入；3.在反应孔中间加入6滴洗涤液，等待薄膜吸入；4.在反应孔中间加入2滴金标液，等待薄膜吸入；5.在反应孔中间加入6滴洗涤液，等待

34、薄膜吸入，目测结果。结果判定阳性质控点显示红色，反应孔中间有色斑点出现。阴性质控点显示红色，反应孔中间无有色斑点出现或仅为痕迹。注意事项1.必须使用新鲜血清标本。血浆标本必须用玻璃棒剥离纤维蛋白，保证血清无混浊沉淀，以免吸取导致反应膜孔阻塞。2.必须以单人份操作，严禁多标本同时检测，每个标本的操作步骤需要连续进行，不宜停顿过长。3.质控点显示红色表明药盒有效；阴阳性对照仅供系统显色反应检定，临床阳性标本显色深浅可以与阳性对照不同。4.少数标本（急性感染.高血脂.溶血等）可出现背景偏红，一般不影响结果判断。可通过将标本用封闭液1：3稀释，加样80微生背景将获得改善。5.各滴瓶溶液，使用后应立即旋

35、紧瓶盖，尽量避免与外界空气接触，以保证溶液免受污染，影响检测质量。6.特殊情况下，因标本无法及时检测，应放置于-20摄适度以下保存，临用前溶解，离心去除沉淀。保存于2-8干燥处保存梅毒甲苯胺红不加热血清试验 本试剂采用VDRL抗原重悬于含有特制的甲苯胺红溶液中制成。仅在白色卡片上进行实验，以检测血清或血浆中反应素用。可作为梅毒病人的诊断和疗效之参考。试剂盒的组成1.TRUST抗原悬液 2.5mlx1瓶 10mlx1瓶2.阳性对照血清 1mx1支 1mx1支 3.阴性对照血清 1mx1支 1mx1支4.试验专用卡片 120人份 480人份5.专用滴管及针头 1套 1套使用方法一.定性试验1.分别

36、吸取50微生梅毒阳性对照和阴性对照均匀铺加在纸卡的两个圆圈中。2.取待检血清或血浆50微生（不需灭活）置于纸卡的另一圆圈中。3.用专用滴管及针头垂直分别滴加TRUST试剂一滴于上述血清中。4.按每分钟100转摇动8分钟，肉眼观察结果。二.定量试验 将待检血清用生理盐水作倍比稀释，然后按上述定性方法进行试验，以呈现明显凝集反应的最高稀释度作为该血清的凝集效价。结果判断1.阳性反应（+-+）：可见中等或较大的红色凝聚物。2.弱阳性反应（+-+）：可见较小的红色凝聚物。3.阴性反应（-）：可见均匀的抗原颗粒而无凝聚物。注意事项1.本实验在23-29摄适度条件下进行。2.TRUST试剂使用前应充分摇匀

37、。3.本试验系非特异性反应，需结合临床进行综合分析，必要时需作梅毒螺旋体抗体特异性试验。储存条件应保存于2-8摄适度.流行性出血热IGM本试剂盒采用酶免疫捕获法，检测流行性出血热IGM抗体，可用于EHF的早期诊断。采用可拆式板条，用于单份或多分标本检测，经反复试验证明，无前滞漏检，能方便，快速检测患者血清内的EHF-IgM抗体。试剂盒组成1.包被板条 48孔2.底物液A 1瓶 3.5ml3.底物液B 1瓶 2ml4.酶结合物 1瓶 3.5ml 5.阳性对照 1瓶 0.25ml操作步骤1.取酶标条3孔，用生理盐水洗3次，空干。2.加样；取病人血清（用生理盐水作1：100稀释）阳性对照（临用前用生

38、理盐水作1：10稀释）及阴性对照（可用正常人血清用生理盐水作1：100稀释）各100微升，分别加入酶标孔内，37摄适度水浴30分钟，取出后，每孔直接加入酶结合物一滴充分混匀，37摄适度水浴1小时，取出，用生理盐水洗5次（每次静至0.5-1分钟）空干。3.加底物：每孔加入底物液A、B各1滴，混匀，置室温闭光显色10-30分钟观察结果。结果判断目测法：无色为阴性，兰色为阳性。注意事项1.在运输或储存过程中，酶标条孔内的液体如有外溢，不影响使用。2.对个别怀疑EHF病人，一次阴性，可隔日在查。3.每次试验均须设阴性，阳性对照，以免造成错误结果。储存条件底物液A.底物液B，放4摄适度保存，不能冰冻，酶结合物、阳性对照及酶标条-20摄适度保存。丙型肝炎病毒抗体诊断一、测定原理： 所用包被抗原为合成多胎抗原和基因工程抗原（包括HCV病毒结构区核心抗原和非结构区抗原）。待测样品加入已包被抗原的反应孔内孵育，若标本中含有抗-HCV抗体，则该抗体与微孔内抗原形成抗原抗体复合物，加入酶结合物，经孵育后酶结合物连接至抗原抗体复合物上，在TMB底物参与反应的情况下，产生显色反应。试剂盒组成：二、测定步骤： 1.将100微升样品稀释液加入各个反应孔中（预留空白对照孔一孔.阳性对照孔阴性对照孔两孔） 2.将10微升待测样品加入加有样品稀释液的反应孔中，混匀。