生物制药期末复习答案及题目(共5页).doc

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1、精选优质文档-倾情为你奉上1.生物技术药物（Biotech drugs)指采用DNA重组技术、单克隆抗体技术或其它生物新技术研制的蛋白质、抗体或核酸类药物。2.按生物技术药物的功能用途可以分为三类：治疗药物；预防药物；诊断药物3.生物技术制药的特征：高技术；高投入；长周期；高风险；高收益4.制备基因工程药物的基本过程（p16页）：目的基因的获得：反转录法，反转录-PCR法、化学合成法、筛选基因新方法、对已发现基因改造。组建重组质粒；构建基因工程菌；培养工程菌；产物分离纯化；除菌过滤；半成品检定；成品检定；包装。5.基因工程技术：将所要重组的目的基因插入载体、拼接、转入新的宿主细胞，构建成工程菌

2、（或细胞），实现遗传物质的重新组合，并使目的基因在工程菌内进行复制和表达的技术。6.目的基因的获得方法 反转录法mRNA的纯化 cDNA第一链的合成 DNA第二链的合成 cDNA 克隆 将重组体导入宿主细胞 cDNA文库的鉴定 目的cDNA克隆的分离和鉴定 反转录-PCR法cDNA第一链合成 PCR扩增（高温变性低温退火适温延生循环扩增）克隆重组分离 化学合成法 筛选基因新方法 对已发现基因的改造7.真核基因在大肠杆菌中的表达方式1） 以融合蛋白的形式表达药物基因2） 以非融合蛋白的形式表达药物基因3） 分泌型表达蛋白药物基因8.质粒不稳定分为分裂不稳定和结构不稳定9.提高质粒稳定性的方法：1

3、、分阶段培养法2、在培养基中加入抗生素，形成选择性压力3、通过温度、PH值、培养基组分、溶解氧的综合调节措施10.基因工程菌的培养方式:（1）补料分批培养（2）连续培养（3）透析培养（4）固定化培养11.细胞融合的方法:（1）病毒诱导融合（2）PEG诱导融合（3）电场诱导融合4）其它诱导融合12.细胞融合：两个或两个以上的细胞合并成一个细胞的过程。13.器材的清洗：一般来说，需经浸泡、刷洗、泡酸和冲洗四个步骤14.动物细胞的大规模培养主要可分为悬浮培养、贴壁培养和贴壁-悬浮培养（假悬浮培养）。15.动物细胞培养的操作方式: 分批式操作；半连续式操作；灌流式操作。16.细胞计数的方法自动细胞计数

4、器计数血球计数板计数 4大格中细胞总数 每毫升细胞数= 410000稀释倍数结晶紫染色细胞核计数MTT染色计数17.动物细胞工程制药前景与展望改进表达载体，提高表达水平和产量利用代谢工程，改进培养工艺，降低生产成本抑制细胞凋亡，延长培养周期采用糖基化工程，提高产品质量转基因动物的研究组织工程的研究18.单克隆抗体：由单一杂交瘤细胞克隆分泌的只能识别一种表位（抗原决定簇）的高纯度抗体。（百科）19.单克隆抗体及其制备步骤：抗原与动物免疫细胞融合与杂交瘤细胞的选择性培养筛选阳性克隆与克隆化杂交瘤细胞与抗体性状的鉴定单克隆抗体的大量制备单克隆抗体的纯化20.基因工程抗体类型人-鼠嵌合抗体 改形抗体

5、Fab与Fv抗体 单链抗体 单域抗体和分子识别单位21.噬菌体抗体库技术的基本方法获得目的基因 抗体库技术的载体 淘筛 表达与鉴定22.植物细胞工程制药的进展与展望诱导子的应用 植物抗毒素是在植物防御系统内能对抗微生物进攻的某些次级代谢产物，有些时候连续合成，有些时候在被刺激下才会产生抗毒素，或仅在被诱导下其产量才能增加。 诱导子是触发形成植物抗毒素信号的物质，根据在细胞内或细胞外形成而将其分为内源性诱导子和外源性诱导子，根据其来源分为生物诱导子和非生物诱导子 前体喂养 两相培养法 转基因技术应用 植物生物转化技术23.对生产菌种的要求（1）产酶量高（2）不是致病菌（3）性能稳定，不容易变异、

6、退化、不易感染噬菌体。（4）能够利用廉价的原料，发酵周期短、易于培养24.固定化酶：指限制或者固定于特定空间位置的酶，具体来说，就是指经过物理、化学方法处理，使酶变成不易随水流失的固定化催化剂。25.制备固定化酶的过程称为酶的固定化。26.酶固定化的方法1、载体结合法2、交联法3、包埋法27.印迹酶：通过分子印迹技术可以产生类似于酶的活性中心的空腔，对底物产生有效的结合作用，而且还能可以在结合部位的空腔内诱导产生催化基团，并与底物定向排列。28.酶的化学修饰：就是在分子水平上，采用化学方法对酶进行改造，通过添加一些化学基团，或者采用具有生物相容性的大分子进行共价键联接，从而改变酶分子性质的一种

7、技术。29.酶工程与药用酶研究进展用分子生物学方法酶的催化特性及设计新酶构建新酶抗体酶、核酶、模拟酶、印迹酶开辟酶或微生物转化合成的新途径开发极端环境条件下的新酶种药用酶研究30.菌种选育方法: 自然选育；诱变育种；杂交育种31.发酵的基本过程为： 菌种 种子制备 发酵 发酵液预 处理 提取精制 32.发酵方式: 分批(间歇)发酵； 补料分批发酵； 连续发酵33.发酵产物的提取方法: 吸附法；沉淀法；溶剂萃取法；离子交换法34.青霉素发酵工艺（青霉素发酵过程）种子制备：以生产丰富的孢子或大量健壮的菌丝体为目的发酵培养：影响青霉素发酵产率的因素有环境因素，有生理变量因素，对它们都要进行严格控制。

8、发酵后处理：过滤，采用鼓式真空过滤器，过滤前加去乳化剂并降温；提炼用溶媒萃取法脱色：在二次B A提取液中加活性炭150 一300g10亿单位，脱色、过滤。结晶：用丁醇共沸结晶法。35.大肠杆菌、酵母菌、动物细胞在基因工程制药的区别大肠杆菌酵母菌动物细胞产物多肽、蛋白、融合蛋白多肽、蛋白、糖基化蛋白完整糖基化蛋白产生部位菌体内菌体内，分泌出细胞分泌出细胞培养方式容易，部分高产容易，可高产较难，成本高，可高产提纯一般菌体内复杂简单产物活性对原核好真核接近天然几乎可为天然产物潜在危险不大不大可能又致癌因素36.基因表达：结构基因在生物体中的转录、翻译以及所有加工过程。37.基因高效表达：外源基因在某种细胞中的表达活动，即剪切下一个外源基因片段，拼接到另一个基因表达体系中，使能获得既有原生物活性和表达产物的分离纯化。38.人工模拟酶：根据酶的作用原理，用各种方法人为制造的具有酶性质的催化剂。39.发酵工程:又称微生物工程，是利用微生物制造工业原料与工业产品并提供服务的技术。专心-专注-专业