石蜡切片详细步骤(共2页).doc

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1、精选优质文档-倾情为你奉上石蜡切片1. 仪器石蜡切片机、烘箱、显微镜、染色缸、小培养皿、镊子、毛笔、吸水纸、纱布、载玻片、盖玻片等。2. 试剂FAA固定液(70%酒精90ml、冰醋酸5ml、福尔马林5ml)、10%番红水溶液、0.5%固绿（用95%的酒精配制）、酒精（100%、95%、80%、70%、50%）、二甲苯、蒸馏水、甘油、中性树胶等。3.取材幼嫩的油菜植株叶片和茎4.方法与步骤(参照)1固定：FAA固定液固定48小时以上。2脱水：50%酒精70%酒精83%酒精95%酒精100%酒精100%酒精。每级2h。100%酒精中1.5h。其中70%酒精处可长期保存。3透明：1/2二甲苯+1/2

2、无水乙醇 (2h) 纯二甲苯(1.5h) 纯二甲苯(1.5h)4浸蜡：将处理的材料置于1/2石蜡(固体粉末状)+1/2二甲苯中，40烘箱敞口过夜。5包埋：先提升恒温箱的温度至60，换纯蜡3次，每次1-2h，用硬的电光纸、牛皮纸叠纸盒，置于45-60的烫板上，倒入材料，摆放好材料，把标签（正面向外置于底部），补足石蜡，倒好后轻轻的置于冷水盆中，注意底面要接触盆中凉水，待石蜡全部凝固后可取出晾干，也可在凉水盆中放置过夜。6切片对包埋的材料进行修块、粘块、整修后，保证材料四周都有石蜡包围。但不可太多。切面的上、下边平行。用加热的解剖刀蘸取少许石蜡碎屑，并迅速将石蜡块四周的碎屑烫平，使石蜡块牢固地粘在

3、台木上。检查切片机，安装切片刀、调整好刀的角度，调整石蜡块与刀口之间的角度与位置后开始切片。7粘片将粘贴剂置簿玻片上，再取切片浮置粘片剂上，然后置烘片台上，使切片展开烫平，材料不现皱纹为度。最后将切片依次排好，用滤纸吸去多余水分，同时以记号笔在玻片上编号，放入温箱中烘干，温度3040中过夜。8脱蜡 脱蜡用二甲苯，把烤好的载玻片放于盛二甲苯的染缸中：纯二甲苯(10-20min)纯二甲苯(5-10min)9染色将纯二甲苯脱蜡完全的材料，1/2 二甲苯十1/2纯酒精100%酒精95酒精85酒精70酒精50酒精1%番红染色(4h以上) 50酒精70酒精85酒精95酒精0.5%固绿(1min)95酒精100%酒精100酒精(未注明时间各级均为3min) 10胶封 滴加加拿大树胶封藏。11.镜检，拍照专心-专注-专业