流式细胞术检测细胞周期(共3页).docx

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1、精选优质文档-倾情为你奉上流式细胞术检测细胞周期流式细胞术在许多题中常用到，但对其结果的分析却不是很清楚。在此收集点相关资料并以实验中的一张图片为例，大家共同学习。图中白色箭头及尾部G1,G2,S是我用PS加上去的，方便讨论。首先来认识下图：1. 纵坐标Cell Number：即计数到的有效细胞数；2. 横坐标DNA Content：即DNA量，为什么用DNA量来区别各周期我们等下再讲；3. G1、G2、S三期在上图已经用箭头标示；4. 右侧数字含义：Mean G1=195.4即G1期DNA含量平均值为195.4；%G1=73.6即G1期细胞数占总数的73.6%；以此类推下面从细胞周期的角度看

2、各参数的意义：1、细胞周期指由细胞分裂结束到下一次细胞分裂结束所经历的过程，所需的时间叫细胞周期时间。可分为四个阶段（见图）： G1期(gap1)，指从有丝分裂完成到期DNA复制之前的间隙时间； S期(synthesis phase)，指DNA复制的时期； G2期(gap2)，指DNA复制完成到有丝分裂开始之前的一段时间； M期又称D期(mitosis or division)，细胞分裂开始到结束。2、从增殖的角度来看，可将高等动物的细胞分为三类： 连续分裂细胞，在细胞周期中连续运转因而又称为周期细胞，如表皮生发层细胞、部分骨髓细胞。 休眠细胞暂不分裂，但在适当的刺激下可重新进入细胞周期，称G

3、0期细胞，如淋巴细胞、肝、肾细胞等。 不分裂细胞，指不可逆地脱离细胞周期，不再分裂的细胞，又称终端细胞，如神经、肌肉、多形核细胞等等。细胞周期的时间长短与物种的细胞类型有关，如：小鼠十二指肠上皮细胞的周期为10小时，人类胃上皮细胞24小时，骨髓细胞18小时，培养的人了成纤维细胞18小时，CHO细胞14小时，HeLa细胞21小时。不同类型细胞的G1长短不同，是造成细胞周期差异的主要原因。3、流式细胞结果图各参数的意义：前面讲过，常用的流式细胞术分析细胞周期的方法是依据细胞DNA含量（横坐标）来分析的：G1期：细胞DNA复制还没有开始，也是DNA含量最少的，即流式检测结果图的第一个峰；S 期：细胞开始复制，到完成复制，是一个一倍DNA到二倍DNA的过程，在流式结果图中显示期跨度特别大（第二个不高但很宽的峰）；G2期：DNA复制完成至分裂的一段时间，此时细胞内含二倍DNA，在流式结果图中的第二个峰；M期：细胞分裂过程，此时细胞内也是二倍DNA，用DNA含量的方法是无法与G2期分开，所以有第三峰明显升高时报告：G2/M期阻滞。专心-专注-专业