氨基酸的测定(共7页).doc
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1、精选优质文档-倾情为你奉上主题序号13授课班级173烹饪营养授课形式新授教学主题 氨基酸的测定教学目的掌握氨基酸常用测定的方法和原理;培养学生科学素养和严谨的态度和工作作风教学重点氨基酸测定方法和原理教学难点氨基酸测定方法和原理更新、补充、删节内容 无使用教具多媒体、黑板、粉笔课外作业1、简述氨基酸电位法测定原理。教学反思授课主要内容或板书设计 氨基酸的测定一、氨基酸态氮的测定(一) 氨基酸分析仪法(二)柱前衍生高效液相色谱法(三)柱后衍生高效液相色谱法(四)双指示剂甲醛滴定法课 堂 教 学 安 排教学过程主要教学内容及步骤(教师活动、学生活动及活动形式与目的请加以说明)导入新课讲授新课小结作
2、业布置蛋白质组成单位是氨基酸,氨基酸同样由。碳、氢、氧、氮等元素组成,但是蛋白质性质与氨基酸性质有些不同。 一、氨基酸态氮的测定氨基酸态氮:与测定蛋白质相比,氨基酸中的氮可以直接测定。氨基酸中的氮含量称为氨基酸态氮。(一)氨基酸分析仪法1原理基于各种氨基酸的酸碱性、极性和分子大小不同,对阳离子交换树酯的吸附力也不同,在一定的pH和离子强度,从树酯上将这些氨基酸洗脱下来的难易也不同,因此可以控制条件,用不同pH和离子强度的缓冲溶液将逐个分开洗脱下来,然后显色,由分光光度计进行定量比色,测定各个氨基酸的含量。2样品处理用酸水解和碱水解方法酸水解法:用盐酸水解食品中蛋白质,使它转变成氨基酸(允许测出
3、16种氨基酸,其中色氨酸完全被破坏,甘氨酸部分被破坏)。碱水解法:用NaOH水解样品,测色氨酸(二)柱前衍生高效液相色谱法(三)柱后衍生高效液相色谱法(四)双指示剂甲醛滴定法1、原理加入甲醛以固定氨基的碱性,使羧基显示出酸性,用强碱滴定。2、操作:用中性红作指示剂,先测定其它游离酸的含量再用百里酚酞作指示剂测定氨基酸和游离酸的总含量。3、方法适用范围浅色样品4、计算(五)电位滴定法1、原理根据氨基酸的两性作用,加入甲醛以固定氨基的碱性,使羧基显示出酸性,将酸度计的玻璃电极及甘汞电极(或复合电极)插入被测液中构成电池,用碱液滴定,根据酸度计指示的pH值判断和控制滴定终点。2、仪器与试剂仪器酸度计
4、 磁力搅拌器 烧杯(250mL) 微量滴定管试剂pH=6.18标准缓冲溶液20%中性甲醛溶液0.05mol/L左右的NaOH标准溶液3、测定操作样品处理吸取样品液于100mL容量瓶中,加水定容。吸取定容液20.00mL于250mL烧杯中,加水60mL,放入磁力转子,开动磁力搅拌器使转速适当。用标准缓冲液校正好酸度计,然后将电极清洗干净,再插入到上述样品液中,用NaOH标准溶液滴定至酸度计指示pH8.2,记下消耗的NaOH溶液体积。氨基酸的滴定在上述滴定至pH8.2的溶液中加入10.00mL的中性甲醛溶液,再用NaOH标准溶液滴定至pH9.2,记下消耗的NaOH溶液体积。空白滴定吸取80mL蒸馏
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