细胞生物学实验大纲2020（大校）.doc

《细胞生物学实验大纲2020（大校）.doc》由会员分享，可在线阅读，更多相关《细胞生物学实验大纲2020（大校）.doc（8页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、医学细胞生物学实验教学大纲（供五年制本科临床医学、医学检验等专业使用） 前言通过实验课的学习验证理论，从而使学生学到的知识更为巩固；通过亲自动手操作，得到比较全面的细胞生物学基本操作技术的训练；掌握基本操作规范，进行基本实验技能的训练；并熟悉基本的细胞生物学实验方法技术。本大纲适用于五年制本科临床医学、妇产科学、急救医学、法医学、眼耳鼻喉科学、医学美容、医学检验、麻醉学专业（方向）使用，将大纲使用中有关问题说明如下：一 为了使教师和学生更好地掌握教材，大纲每一章节均由教学目的、教学要求和教学内容组成。教学目的注明教学目标，教学要求分掌握、熟悉和了解，教学内容与教学要求对应，并统一标示（核心内容

2、及知识点以下划实线，重点内容以下划虚线，一般内容不标示），便于学生学习重点知识。二 教师在保证教学大纲核心内容的前提下，可根据不同教学手段，坚守重点内容和介绍一般内容。三 总教学参考学时为24学时。四 教材：医学细胞生物学实验教程，王乾兴、路健主编，人民卫生出版社，第二版，2019年。 正文实验一：细胞内DNA、RNA的原位显示细胞内酸性蛋白、碱性蛋白的原位显示一 教学目的通过训练学生自己动手处死动物、制作血涂片、染色、洗涤、晾干、镜检等常规细胞生物学操作，培养学生的基本操作能力，理解细胞化学法的基本原理，掌握酸性蛋白和碱性蛋白以及核酸在细胞中的分布情况。二 教学要求（一）掌握酸性蛋白和碱性蛋

3、白、DNA和RNA在细胞内的分布情况；（二）了解酸性蛋白和碱性蛋白显色反应的一般原理和方法；（三）了解DNA和RNA显色反应的一般原理和方法。三 教学内容（一）细胞内酸性蛋白和碱性蛋白的显示实验原理 实验步骤：1 取材和涂片：动物处死的规范操作 2 固定方法 3 三氯醋酸处理方法及意义 4 浸染的规范操作（二）细胞内DNA和RNA的显示实验原理实验步骤：1 取材和固定方法 2 染色的规范操作 3 冲洗方法4 镜检方法实验二：细胞膜的通透性观察小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动的观察一 教学目的通过本次实验使学生掌握实验的基本技能。训练学生自己动手，观察血细胞在各种液体环境（各种等渗溶液）中是否发生融血

4、现象，以此理解细胞膜对不同性质和不同大小分子量的物质的通透性；通过小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验，观察理解细胞的吞噬运动。二 教学要求（一）掌握细胞膜对不同性质和不同分子量大小的物质的通透性（二）掌握小鼠腹腔剖开方法；腹腔液取材方法（三）熟悉细胞的吞噬运动过程三 教学内容（一）细胞膜通透性的实验观察1、实验原理膜是否选择透过某物质可通过溶血与否观察红细胞溶血：将红细胞悬液置于等渗溶液中，若该溶液中的溶质可通过细胞膜进入红细胞内，则会引起红细胞内渗透压增高，水分子随即进入细胞，细胞膨胀破裂，引起溶血。溶质通透性不同，进入细胞速度不同，引起溶血时间也不相同，借此可判断膜对物质的通透能力的大小2

5、、实验步骤：（1）10鸡红细胞悬液的制备方法（2）将兔红细胞分别放于不同等渗溶液中，观察溶血现象 （3）总结兔红细胞对不同物质的通透性3、注意事项（1）两人一组，一人观察，一人记录,10min 为限；两人3只离心管，1只对照，2只用于观察某种溶质的通透性，请亲自操作、思考并做记录；（2）观察完一种溶质后，将试管洗净，并尽量控干水分；（3）滴管不能混用（二）小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动的观察1、实验原理 巨噬细胞在机体的非特异性免疫作用中具有重要作用，当它接触到病原体等异物时，伸出伪足将其包围并吞入细胞，形成吞噬泡，进而与初级溶酶体融合，将异物消化分解2、实验步骤：3、注意事项（1）小白鼠腹腔注射

6、要点；（2）颈椎脱臼法要点；（3）滴片时细胞悬液不宜过多，1小滴；（4）剖开腹腔时尽量避免剪破血管；（5）镜检时注意区分不同细胞实验三：细胞内脂类的显示 线粒体活体染色与观察一 教学目的使学生了解细胞化学法的原理，并能灵活运用；掌握脂类、线粒体在细胞中的分布情况。二 教学要求（一）掌握线粒体、脂类在细胞内的分布情况（二）熟悉细胞化学法的运用（三）了解线粒体的活体染色方法；了解苏丹进行脂肪细胞染色的方法三 教学内容（一）细胞内脂类的显示1、实验原理：脂类标本制作的特性：不溶于水，易溶于高浓度乙醇、苯、氯仿等；一般常用甲醛类固定剂。苏丹染料的特性：脂溶性染料，易溶于乙醇，更易溶于脂肪。当含有脂肪的

7、标本与苏丹染料接触时，苏丹染料即脱离乙醇而溶于含脂肪的结构中使其显色。2、实验步骤： 3、注意事项（1）冲洗的方法；（2）找肠系膜时避免扯破；（3）制作装片时尽量用盖玻片撑开肠系膜，避免折叠（二）线粒体的活体染色与观察1、实验原理：活体染色：应用无毒或毒性较小的染色剂，真实显示生活有机体的组织或活细胞内某些结构，是对细胞生命活动影响较小的一种染色方法。针对线粒体的活体染色：线粒体上的细胞色素氧化酶系可保持詹纳斯绿B染料始终处于氧化状态而呈绿色2、实验步骤：3、注意事项（1）取材的力度和准确性；（2）染色剂干涸的处理实验四：细胞核的分离与鉴定 细胞内过氧化物酶的显示一 教学目的使学生掌握细胞核的

8、分离过程及鉴定方法；学会使用离心机和匀浆器；掌握细胞化学法在过氧化物酶显示中的应用二 教学要求（一）掌握分离细胞核的原理；过氧化物酶原位显示的原理（二）熟悉细胞核的鉴定方法（三）了解过氧化物酶体的原位分布三 教学内容（一）细胞核的分离与鉴定1、实验原理细胞内各种结构在同一离心场沉降系数不同，常用不同介质或不同转速的离心技术分离不同细胞结构细胞组分分离的基本过程包括组织匀浆、分离、鉴定三个步骤2、实验步骤3、注意事项（1）尽量剪碎肝组织；（2）尽量低温操作，以抑制酶活性（二）细胞内过氧化物酶的显示1、实验原理用联苯胺混合液(含H2O2 ）处理标本，细胞内的过氧化物酶能将H2O2分解，产生的氧把联

9、苯胺氧化成蓝色或棕色产物，由此显示细胞内过氧化物酶的存在和分布。2、实验步骤：3、注意事项（1）做好载玻片的标记；（2）眼眶取血的技巧；（3）注意联苯胺的使用安全；（4）洗涤时间不宜过长实验五：设计性实验讨论课一 教学目的通过讨论，使学生了解科研工作的基本程序，培养学生的综合能力。二 教学要求（一）通过讨论，帮助学生解决实验设计过程中的疑惑（二）通过讨论，使学生明白科研实验的基本思维（三）通过讨论，使学生得到全方位的综合训练三 教学内容学生进行讨论，进行设计性实验报告的撰写实验六：设计性实验操作课一 教学目的学生根据自己设计的方案进行实验操作，以验证实验设计的可行性，验证对理论知识的理解及掌握

10、程度。二 教学要求（一）掌握科学研究的基本思维方法（二）熟悉细胞生物学基本操作技能，并能够灵活应用（二）了解科学研究的基本流程三 教学内容根据学生讨论后确定的实验方案进行实验操作，注意在带教过程中进行规范性操作的指导，注意解答学生在实验操作过程中所出现的理论或实践问题。基本技能：1 正确使用显微镜的方法2 培养学生在光学显微镜下区分细胞与非细胞的能力，认识不同细胞种类的形态结构特征3 要求学生明白什么情况下才能看到细胞和细胞结构4 正确处死动物的方法5 正确的取材方法，如眼眶取血、取股骨、取腹腔液等6 正确的制片方法7 线粒体活体染色的方法8 规范的组织匀浆方法 教学组织与方法一 实施机构：由

11、基础医学院细胞生物学教研室执行。二 组织内容：组织进行教案讲义审核、听理论课、实验教学观摩、试讲、集体教学备课、教学方法研究、教学手段改进等。三 教学方法：1实验教学：采用启发式、讨论式等教学方式，辅助传统教学手段。2教学地点：形态学实验室。3辅导形式：课堂提问答疑、讨论、小结、实验报告讲评等形式结合。四 考核办法：本学期细胞生物学实验共计六次，每次实验成绩包括参与度占70%，实验报告占30%，期末实验总评成绩为六次实验平均值。实验考核不合格者不能参加理论课考试 教学时数分配表实验内容教学时数实验类型细胞内DNA、RNA的原位显示；细胞内酸性蛋白、碱性蛋白的原位显示4验证型细胞膜的通透性观察小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动的观察4验证型细胞内脂类的显示线粒体活体染色与观察4验证型细胞核的分离与鉴定细胞内过氧化物酶的显示4验证型设计性实验讨论课4设计型设计性实验操作课4设计型合计24/8