遗传实验报告-果蝇唾腺染色体观察(共3页).docx

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1、精选优质文档-倾情为你奉上【实验目的】1. 练习解剖果蝇幼虫的技术2. 掌握果蝇唾腺染色体的制片方法3. 了解果蝇唾腺染色体的形态结构特点【实验原理】果蝇为双翅目完全变态的昆虫，幼虫期分三龄。其幼虫期具有很大的唾腺细胞，其中的染色体是巨大的多线染色体。双翅目昆虫的整个消化管细胞发育至一定阶段后就停止有丝分裂，终止在分裂间期。但随着幼虫整体器官以及这些细胞本身体积的增大，唾液腺细胞核的染色体仍不断地进行自我复制而并不分开。经多次复制后，形成约10004000拷贝的染色体丝，比普通中期相染色体大得多（约100500倍），因此又称为多线染色体。黑腹果蝇染色体数2n=8，存在体联会。各染色体的着丝粒互

2、相靠拢形成染色中心，由染色体中心向外伸出5条很长的染色体臂和一条极短的染色体。（如右图）染色体为端着丝粒染色体，所以它的一端在染色中心上，另一端游离；、染色体为中着丝粒染色体，他们从染色中心呈V字形向外伸展，所以分别能看到2L、2R、3L和3R 4条长而宽的“带状物”；点状的第染色体很短小，为端着丝粒。因此可以见到5条很长的和一条仅靠染色中心的短小的染色体。在雄性幼虫中，唾腺染色体上不见Y染色体，他捕鱼X染色体联会，而且其着丝粒及其附近的异染色质参与染色中心的形成。这可能是雄性幼虫唾腺染色体中的X染色体比其他几对染色体相对狭窄一些的缘故。果蝇唾腺染色体特点：巨大，是多线染色体；有丝分裂停在间期

3、，DNA不断复制，着丝点不分开；同源染色体紧密配对体细胞联会，染色体呈单倍数。整个唾腺染色体上分布着染色深浅不同、粗细各异的横纹，这意味着基因的排列。这些横纹的宽窄、疏密程度以及排列顺序和数目都具有物种的特异性。黑腹果蝇的多线染色体具有大约5000条横纹。染色体各条臂的端部，即远离染色中心的游离端恒定的横纹特征，是准确识别各对染色体的重要依据。在果蝇的特定发育时期，横纹会出现不连续的膨胀，称为疏松区（puff），目前认为这是该部分基因被激活的标志。【实验用具及材料】材料：黑腹果蝇的三龄幼虫器材：双筒解剖镜、显微镜、解剖针（2支）试剂：生理盐水、1N HCl、改良苯酚品红染液【实验步骤】1. 选

4、取幼虫 用解剖针取行动迟缓、肥大、爬上管壁的三龄幼虫，置于载玻片上，并滴加一滴生理盐水。于解剖镜下观察幼虫结构：具有一钝尾和带黑色口器的尖头端。2. 腺体剖取 取两支解剖针，一针压住幼虫身体的近中部，固定幼虫；另一针压住幼虫头部，压点尽可能靠头部口器处。将解剖针平稳前移，使头部和身体拉开，体内各器官从切口拉出，一对唾腺也随之而出。唾腺为透明棒状腺体，外有白色脂肪组织。去除幼虫其他组织部分，并把唾腺周围的白色脂肪剥离干净。3. 腺体解离 加一滴1N HCl，浸23min，使组织疏松，以便压片时细胞分散，染色体散开。用吸水纸吸去HCl，加蒸馏水轻轻冲洗两次。4. 染色与压片 滴加改良苯酚品红染液，

5、染色2030min。染色完成后，盖上干净的盖片，并覆一层滤纸。将玻片放在实验台上，用大拇指均匀用力压片。5. 观察标本 先用低倍镜观察，找到染色体图像后移至视野中央，再用高倍镜观察。【实验结果】2L2R3RX43L在光学显微镜下，可观察到唾腺染色体的5条长臂，1条短臂以及染色体上排列的横纹。(根据各染色体特征进行分辨。图不是很清晰，对臂的辨认可能存在错误）【注意事项】1. 取幼虫时尽量选取肥大、行动迟缓的幼虫。肥大的幼虫唾腺才会发育良好，且较大的幼虫染色体复制次数多，唾腺染色体更粗；行动迟缓便于进行解剖。2. 在解剖过程中务必加生理盐水，以免唾腺干掉。但也不可加多，否则幼虫会漂浮且活跃。3. 尽量将唾腺周围的脂肪组织剖离干净，以免影响染色观察。4. 在用滤纸条吸净腺体周围的液体时，谨防腺体丢失。5. 染色时间不可过长，否则背景也着色。6. 压片时用力要均匀，不要使盖片滑动，可朝一个方向揉动。专心-专注-专业