紫外可见分光光度计使用方法(共2页).doc

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1、精选优质文档-倾情为你奉上752紫外可见分光光度计一、仪器的工作原理分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下，产生了对光的吸收效应，物质对光的吸收是具有选择性的。各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱，因此当某单色光通过溶液时，其能量就会被吸收而减弱，光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系，也即符合于比色原理一比耳定律。=I/Iolog I/Io=KCLA= KCL从以上公式可以看出，当入射光、吸收系数和溶液的光径长度不变时透过的光是根据溶液的浓度而变化的，752紫外可见分光光度计的基本原理是根据上述物理光学现象而设计的。二、仪器的安装、使用、安装1 仪器在安装使用前应对仪器的安

2、全性进行检查，电源电压是否正常，接地线是否牢固可靠，在得到确认后方和接通电源使用。2 仪器经过运输和搬运等原因，会影响波长准确度，应进行仪器调校后使用。使用：仪器使用前需开机预热30min。本仪器键盘共有4个键，分别为； 1 A /C/F 1SD2 031004 A /C/F键：每按此键来切换A、 、C、F之间的值。A吸光度（Absorbance）T透射比（Trans）C浓度（conc）F斜率（Factor）(2)F值通过按键输入（后面介绍如何设置）5SD键：该键具有2个功能a)用于RS232串行口和计算机传输数据（单向传输数据，仪器发向计算机）。b)当处于F状态时，具有确认的功能，即确认当前

3、的F值，并自动转到C，计算当前的C值（C=F*A）。6 0键：该键具有2个功能a）调零；只有在状态时有效，打开样品室盖，按键后应显示0.000。b）下降键：只有在F状态时有效，按本键F值会自动减1，如果按住本键不放，目动减1会加快速度；如果F值为0后，再按键它会自动变为1999。而按键开始自动减1。7 100键；该键具有2个功能a）只有在A、状态时有效，关闭样品室盖，按键后应显示0.000、100.0。b）上升键：只有在F状态时有效，按本键F值会自动加1，如果按住本键不放，自动加1会加快速度，如果F值为1999后，再按键它会自动变为0，再往键开始自动加l。例如：设置斜率为1500。方法一T）按

4、 ACF键切换到 F状态。b）如果当前F值为1000，则按100%键，直到F值为1500。C）再按 SD键，表示当前的 F值为 1500，然后自动回到 C状态，假如所测的 A值为 0234，则此时显示 C值为 0351。方法二a）按ACF键切换到F状态。b）如果当前的 F值为 1000，则按100%键，直到F值为 1500、再按 ACF键切换到C状态，假如所测的A值为0.224，则此时显示C值为0351。722型分光光度计一、 测量原理 分光光度法测量的理论依据是伯郎比耳定律：当容液中的物质在光的照射和激发下，产生了对光吸收的效应。但物质对光的吸收是有选择性的，各种不同的物质都有其各自的吸收光

5、谱。所以根据定律当一束单色光通过一定浓度范围的稀有色溶液时，溶液对光的吸收程度A与溶液的浓度c（g/l）或液层厚度b(cm)成正比。其定律表达式A=abc （a是比例系数）。当c的单位为mol/l时，比例系数用表示，则A=bc称为摩尔吸光系数。其单位为Lmol-1cm-1它是有色物质在一定波长下的特征常数。 T(透光率)=I/I0 A(吸光度)= -lgT 或 A=KCL(比色皿的厚度) 测定时，入射光I, 吸光系数和溶液的光径长度不变时，透过光是根据溶液的浓度而变化的，即“K”为常数。比色皿厚度一定，“L”、“I0”也一定。只要测出A即可算出“C”。 二、 722型分光光度计的使用 1、将灵

6、敏度旋钮调至“1”档（信号放大倍率最小）。 2、开启电源，指示灯亮 ，选择开关置于“T”，波长调至到测试用波长。仪器预热20分钟。 3、打开试样室（光门自动关闭），调节透光率零点旋钮，使数字显示为000.0。（调节100%T旋钮），盖上试样室盖，将比色皿 架处于蒸馏水校正位置，使光电管受光，调节透光率100%旋钮使数字显示100.0。如显示不到100.0，则可适当增加微电流放大的倍数。（增加灵敏度 的档数同时应重复（3）调节仪器透光率的“0”位）但尽量使倍率置于低档使用。这样仪器会有更高的稳定性。 4、预热后，按（3）连续几次调整透光率的“0”位和“100%”的位置，待稳定后仪器可进行测定工作

7、。 三、 吸光度“A”的测量 将选择开关置于A 。调节吸光度调零旋钮，使得数字显示为零，然后将被测样品移入光路，显示值即为被测样品的吸光度值。 四、 浓度c的测量 将选择开关由“A”旋至“C”将已标定浓度的样品放入光路，调节浓度旋钮，使得数字显示为标定值，将被测样品放入光路即可读出被测样品的浓度值。 注意事项： 1、测量完毕，速将暗盒盖打开，关闭电源开关，将灵敏度旋钮调至最低档，取出比色皿，将装有硅胶的干燥剂袋放入暗盒内，关上盖子，将比色皿中的溶液倒入烧杯中，用蒸馏水洗净后放回比色皿盒内。 2、每台仪器所配套的比色皿不可与其它仪器上的表面皿单个调换。 使用方法 （1）预热仪器 将选择开关置于“

8、T”，打开电源开关，使仪器预热20分钟。为了防止光电管疲劳，不要连续光照，预热仪器时和不测定时应将试样室盖打开，使光路切断。 （2）选定波长 根据实验要求，转动波长手轮，调至所需要的单色波长。 （3）固定灵敏度档 在能使空白溶液很好地调到“100%”的情况下，尽可能采用灵敏度较低的挡，使用时，首先调到“1”挡，灵敏度不够时再逐渐升高。但换挡改变灵敏度后，须重新校正“0%”和“100%”。选好的灵敏度，实验过程中不要再变动。 （4）调节T=0% 轻轻旋动“0%”旋钮，使数字显示为“00.0”，（此时试样室是打开的）。 （5）调节T=100% 将盛蒸馏水（或空白溶液，或纯溶剂）的比色皿放入比色皿座

9、架中的第一格内，并对准光路，把试样室盖子轻轻盖上，调节透过率“100%”旋钮，使数字显示正好为“100.0”。 （6）吸光度的测定 将选择开关置于“A”，盖上试样室盖子，将空白液置于光路中，调节吸光度调节旋钮，使数字显示为“.000”。将盛有待测溶液的比色皿放入比色皿座架中的其它格内，盖上试样室盖，轻轻拉动试样架拉手，使待测溶液进入光路，此时数字显示值即为该待测溶液的吸光度值。读数后，打开试样室盖，切断光路。 重复上述测定操作1-2次，读取相应的吸光度值，取平均值。 （7）浓度的测定 选择开关由“A”旋置“C”，将已标定浓度的样品放入光路，调节浓度旋钮，使得数字显示为标定值，将被测样品放入光路，此时数字显示值即为该待测溶液的浓度值。 （8）关机 实验完毕，切断电源，将比色皿取出洗净，并将比色皿座架用软纸擦净。、。专心-专注-专业