家禽血液样品采集(共34页).doc
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1、精选优质文档-倾情为你奉上目录-1实验一-2实验二-5实验三-9实验四-12实验五-16实验六-20实验七-23实验八-26实验九-29参考文献-33 实验一 家禽血液样品采集1. 实验目的及要求:1.1 实验目的:了解家畜血样采集的方法1.2 实验要求:学会采血针和注射器的使用方法学会鸡冠采血法学会翼下静脉采血法1.3 实验规定学时:( 1.5学时)1.4 实验性质:综合2. 实验原理:静脉又称容量血管,其内含血量较多且流速较慢,位于腋窝部的翼下静脉具此特点,此静脉易找到,在此可采血1020ml。3. 实验仪器、装置、工具及主要材料鸡、脱脂棉、酒精、采血针、注射器、抗凝剂4. 实验方法与步骤
2、鸡的采血方法(1)鸡冠采血法用于需要少量血液的采血,用采血针或针头刺破鸡冠吸取血液,然后消毒伤口。(2)翼下静脉采血法先将鸡侧卧保定,露出腋窝部,拔去该部羽毛,可见翼下静脉。压迫翼下静脉的近心端,使血管怒张,消毒后,实验者手持有针头的注射器,由翼根向翅膀方向沿静脉平行刺入,见回血后抽出血液。一般,一只成年鸡可采血1020ml血,且注意抽血时一定要缓慢。采完后要压迫止血。5. 注意事项采血的顺序一定要从翼尖端逐渐向翼根处,否则开始就从翼根处采血,易造成淤血,没法继续采血。6. 预习要求复习血液及血管的结构与功能的知识。7.问题讨论翼下静脉采血时抽血为什么要缓慢?实验二 红细胞渗透性实验1. 实验
3、目的及要求:1.1 实验目的:了解红细胞的特性之一渗透脆性1.2 实验要求:学会不同浓度溶液的配制学会测定红细胞的渗透脆性的方法1.3 实验规定学时:( 1.5学时)1.4 实验性质:综合2. 实验原理:正常的红细胞系混悬于等渗的血浆中,若置于高渗溶液内,则红细胞失去内部液体而皱缩;反之,置于低渗溶液内,则水分进入红细胞,使红细胞膨大,继续进入红细胞发生破裂溶解,形成溶血。此实验即是测定红细胞对低于0.9%NaCl溶液(等渗溶液)的耐受性。耐受力高者,红细胞不易破裂,即脆性低;反之,耐受力低者,红细胞易于破裂,即脆性高。3. 实验仪器、装置、工具及主要材料试管、试管架、吸管、鸡或兔新鲜血(或去
4、蛋白血)、1%NaCl溶液、蒸馏水等4. 实验方法与步骤(1)先将试管分别排列在试管架上,按下表把1%NaCl稀释成不同浓度的低渗溶液,每管溶液均为2ml。试管号稀释度123451%NaCl(ml)140130120110100蒸馏水(ml)060070080090100NaCl浓度(%)070065060。055050678910090080070060050110120130140150045040035030025(2)每支试管中加入大小等量的血样1滴,轻轻混匀静止1小时。(3)观察结果:上层清液无色,管底为混浊红色,表示红细胞下沉,没有溶血。上层呈淡红色,管底为混浊红色,表示部分红细胞
5、破裂溶解,为不完全溶解。管内溶液完全呈透明红色,管底无红细胞沉积,为完全溶血。依上述说明,判定出开始溶血及开始完全溶血的NaCl浓度百分率,并记录。5. 注意事项(1)配制NaCl的各种溶液的浓度必须准确。(2)各管中所加入的血滴大小应尽量相等并充分摇匀,且勿用力振荡。6. 预习要求复习有关红细胞的生理特性的有关知识7.问题讨论红细胞溶血的原因是什么?实验三 血红蛋白的测定1. 实验目的及要求:1.1 实验目的:熟悉用比色法测定血红蛋白的方法1.2 实验要求:学会正确使用血红蛋白计。学会测定血红蛋白含量的方法1.3 实验规定学时:( 1学时)1.4 实验性质:验证2. 实验原理:血红蛋白的颜色
6、随结合氧量多少而改变,不利于比色,但血红蛋白与作用稀盐酸生成棕色的高铁血红蛋白较稳定,可与标准比色板比色,从而测得血红蛋白的含量。通常以每100ml血液中含血红蛋白的克数表示。3. 实验仪器、装置、工具及主要材料血红蛋白计、采血针、酒精、脱脂棉、0.1mol/L盐酸、蒸馏水等4. 实验方法与步骤(1)加盐酸 将0.1mol/L盐酸加入测定管中至刻度“2”处。(2)采血并加入测定管 用酒精棉球消毒动物的采血部位后,用采血针刺破皮肤,用干棉球擦去第一滴血,待第二滴血流出一大滴时,用吸血管插入流出的血滴深处,吸血至刻度20mm3处,用干棉球擦净吸血管周围的血液,将血液吹入测定管的0.1mol/L盐酸
7、中。用玻璃棒将盐酸和血液混匀,放置10min.(3)稀释、比色 向测定管中加蒸馏水,逐滴加,每次加蒸馏水后,都要摇匀,再插入比色箱中进行比色。这样,测定管中的颜色逐渐变淡,直至与比色箱中的标准比色板相同为止。(4)读数 从比色箱中取出测定管,读出液体表面的刻度。两面均有刻度。一边的刻度表示克数,如液体表面刻度为15处,表示100ml血液中含有15g血红蛋白;另一边的刻度表示百分率。(可参照使用说明书进行克数与百分率的换算)。(5)清洗 实验完毕应立即清洗洗涤干净使用过的仪器。5. 注意事项(1)血液和盐酸作用的时间不可少于10min,否则反应不彻底,结果不准确。(2)加蒸馏水时要逐滴,以防稀释
8、过头。(3)比色最好在自然光下,并避免至射的阳光。6. 预习要求复习有关血红蛋白的有关知识7.问题讨论血红蛋白的生理功能实验四 血液凝固1. 实验目的及要求:1.1 实验目的:了解血液凝固的基本过程及影响血凝的一些因素1.2 实验要求:了解血液凝固的基本过程了解影响血凝的一些因素1.3 实验规定学时:( 1学时)1.4 实验性质:验证2. 实验原理:血液流出血管后,迅速发生凝固。血液凝固是一系列复杂的生化过程,大致可分为三个主要步骤,即凝血酶原激活物的形成;凝血酶原激活物催化凝血酶原转变为凝血酶凝血酶催化纤维蛋白原转变为纤维蛋白,从而形成血块。在这三个主要步骤中都需要Ca2+的参与。3. 实验
9、仪器、装置、工具及主要材料鸡新鲜血、试管、试管架、吸管、烧杯、恒温水浴箱、秒表、3.8%柠檬酸钠溶液、5%草酸钾溶液、肝素、液体石蜡、1%氯化钙溶液、干棉球4. 实验方法与步骤(1)影响血凝的物理因素:取试管3支,一支管内加少量棉花,一支管内涂少许液体石蜡,一支空白管作对照。将以上三管分别加入新鲜血2ml,每30s轻轻地倾斜试管一次,分别纪录三管的凝血时间,分析凝血时间不同的原因。(2)温度对血凝的影响:取试管2支,分别加入新鲜血2ml。一管置于37水浴中,一管放在盛有冰块的水杯中,比较两管凝血时间。为什么不同?(3)钙离子对血凝的影响:取试管3支,一支放入3.8%柠檬酸钠溶液6滴,一支加入5
10、%草酸钾溶液6滴,一支空白对照。然后,再向各管分别加入新鲜血液2ml,混合后观察血凝情况,纪录之。加入柠檬酸钠和草酸钾的试管分别再加入1%氯化钙溶液2-4滴,结果如何?为什么?(4)肝素的作用:取1支试管放肝素16单位,再加入新鲜血液2ml,摇匀后观察其结 果。(5)割断动物的血管,将血液放入烧杯中,同时,用试管刷迅速搅动,以除去血中的纤维蛋白;将除去纤维蛋白的血液静置后,观察其能否凝固。5. 注意事项加柠檬酸钠和草酸钾的量要等同,否则现象不明显。6. 预习要求复习有关血液凝固的相关知识7.问题讨论血液凝固的三个过程实验五 血型鉴定1. 实验目的及要求:1.1 实验目的:掌握ABO血型的鉴定方
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