【高二生物选修三基因工程知识点】-高二生物会考知识点.docx

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1、【高二生物选修三基因工程知识点】 高二生物会考知识点 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。接下来小编为你整理高二生物选修三基因工程知识点，一起看看吧! 高二生物选修三基因工程知识点【一】 基因工程的基本操作程序 1.目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。 (1)获取方法：从基因文库中获取目的基因 (2)人工合成法：化学方法合成DNA片段(反转录法、直接合成法) (3)PCR反应扩增DNA 2.PCR技术扩增目的基因 (1)PCR的含义：聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA片段的

2、核酸合成技术。 (2)目的：获取大量的目的基因 (3)原理：DNA双链复制 (4)过程：第一步：加热至9095DNA解链为单链; 第二步：冷却到5560，引物与两条单链DNA结合; 第三步：加热至7075，热稳定DNA聚合酶从引物起始进行互补链的合成。 高二生物选修三基因工程知识点【二】 基因表达载体的构建(核心) 1.目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。 2.组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因 (1)启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。

3、 (2)终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。 (3)标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。 3.重组质粒形成过程: (1)用一定的限制酶切割质粒，使其出现一个切口，露出黏性末端。 (2)用同一种限制酶切断目的基因，使其产生相同的黏性末端。 (3)将切下的目的基因片段插入质粒的切口处，再加入适量DNA连接酶，形成了一个重组DNA分子(重组质粒) 高二生物选修三基因工程知识点【三】 将目的基因导入受体细胞转化 1.转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2.常用的转

4、化方法： 将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。 将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术。方法的受体细胞多是受精卵。 将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌，其转化方法是：先用Ca2+处理细胞，使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。 3.重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。 高二生物选修三基因工程知识点【四】 目的基因的检测和表达 1.首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交(DNA-DNA)技术。 2.其次还要检测目的基因是否转录出mRNA，方法是采用分子杂交(DNA-RNA)技术。 3.最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是采用抗原抗体杂交技术。 4.有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如生物抗虫或抗病的鉴定等。 第 4 页 共 4 页