猪胸膜肺炎放线杆菌ApxIV-ELISA抗体检测试剂盒说明书.doc

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1、猪链球菌猪链球菌 2 型型 ELISA 抗体检测试剂盒说明书抗体检测试剂盒说明书 【兽用名称兽用名称】通用名：猪链球菌 2 型 ELISA 抗体检测试剂盒商品名：无英文名：ELISA Kit to Detect the Antibodies against Streptococcus suis type 2汉语拼音：Zhu Lianqiujun 2xing ELISA Kangtijiance Shijihe【主要成分与含量主要成分与含量】(1) 抗原包被板2 块（96 孔/块）(2) 阴性对照血清1 管（1ml/管）(3) 阳性对照血清1 管（1ml/管）(4) 羊抗猪酶标二抗1 瓶（20m

2、l/瓶）(5) 脱脂奶粉1 管（1g/管）(6) 稀释液 A1 瓶（50ml/瓶）(7) 底物液 A1 瓶（10ml/瓶）(8) 底物液 B1 瓶（10ml/瓶）(9) 终止液1 瓶（10ml/瓶）(10) 20 倍浓缩洗涤液1 瓶（30ml/瓶）(11) 血清稀释板2 块(12) 说明书1 份【作用与用途作用与用途】 适用于检测猪链球菌 2 型血清抗体。【用法与判定用法与判定】1 用法1.1 样品准备 取动物全血，待血液凝固后、4000r/min 离心 10 分钟，收集上清。也可采集血液，待凝固后自然析出血清，要求血清清亮，无溶血。1.2 洗涤液配制 使用前，浓缩的洗涤液应恢复至室温（202

3、5） ，并摇动使沉淀溶解（最好在 37水浴锅中加热 510 分钟） ，然后用蒸馏水作 20 倍稀释（例如：每两块板用 30ml 的 20 倍浓缩洗涤液加上 570ml 蒸馏水） ，混匀，稀释好的洗涤液在 28可以存放 7 日。1.3 样品稀释液的配制 将 1g 脱脂奶粉溶于 50ml 稀释液 A 瓶中，作为待检血清和对照血清的稀释液。兽用兽用1.4 待检血清和对照稀释 将待检血清在血清稀释板中用样品稀释液按 1:40 的比例稀释（例如：195l 样品稀释液中加 5l 待检血清或对照血清） 。注意：阳性和阴性对照用样品稀释液按 1:4 稀释（例如：180l 样品稀释液中加 60l对照血清，吹打均

4、匀） 。1.5 操作步骤 1.5.1 取抗原包被板（根据样品多少，可拆开分次使用） ，先用稀释好的洗涤液洗板 2次 ，再将稀释好的待检血清、阴性对照血清和阳性对照血清各取 100l 加入到抗原包被板孔中。阴性对照和阳性对照各设 2 孔。轻轻振匀孔中样品（勿溢出） ，置 37温育 30 分钟。1.5.2 甩掉板孔中的溶液，每孔加入稀释好的洗涤液 200l，静置 3 分钟后倒掉，并在吸水纸上拍干，共计洗涤 5 次。1.5.3 每孔加羊抗猪酶标二抗 100l，置 37温育 30 分钟。1.5.4 甩掉板孔中的溶液，洗涤方法同 1.5.2，共计洗涤 5 次。1.5.5 每个反应孔先加底物液 A 一滴（

5、50l） 、再加底物液 B 一滴（50l） ，混匀，室温（1825）避光显色 10 分钟。1.5.6 待显色完成后每个反应孔加终止液一滴（50l） ，10 分钟内测定结果。2 判定判定：在酶标仪上测各孔 OD630nm值，试验成立的条件是阳性对照孔 OD630nm值均应0.8；阴性对照孔 OD630nm值均应0.3。如果样品 OD630nm值0.35，判为阳性；如果样品 OD630nm值0.35，则判为阴性。【注意事项注意事项】 （1） 试剂盒使用前各试剂应平衡至室温，使用后放回 28。（2） 不同批号试剂盒的试剂组分不得混用，使用试剂时应防止试剂污染。（3） 底物液 B 不要暴露于强光和避免

6、接触氧化剂。.（4） 未使用的抗原包被板封口膜切记不要撕开。（5） 待检血清样品数量较多时，应先使用血清稀释板稀释完所有要检测血清，再将稀释好的血清转移到反应板，使反应时间一致。（6） 浓缩洗涤液用蒸馏水稀释，如果发现有结晶加热使其溶解后再使用。（7） 在操作过程中移液时，切忌将气泡加入抗原包被板孔中。（8） 严格按照操作说明书可以获得最好的结果。【贮藏与有效期贮藏与有效期】 28保存，有效期 9 个月。【规格规格】 192 孔/盒。【批准文号批准文号】 兽药生字（2012）170048113【生产企业生产企业】 武汉科前动物生物制品有限责任公司地址：湖北省武汉市洪山区狮子山街 1 号 邮编：430070电话（传真）：027-87284425 网址：http:/仅供兽医诊断使用仅供兽医诊断使用