子宫内膜癌患者外周血(共5页).doc

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1、精选优质文档-倾情为你奉上子宫内膜癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的变化情况通信作者:张维娜 周芳 麻娜单位地址:河北省望都县皮肤病防治院检验科摘要：目的：研究子宫内膜癌患者外周血CD4+CD25+Treg的数量及与患者临床病理特征的关系。方法：用流式细胞分析方法检测80例子宫内膜癌患者外周血T淋巴细胞亚群及CD4+CD25+Treg比例变化。结果：子宫内膜癌患者外周血CD4+CD25+Treg比例高于对照组（6.631.61%&3.140.73%， P0.05）。子宫内膜癌患者外周血CD4+CD25+Treg比例与年龄、临床分期和有无淋巴结转移有相关性，结论：子宫内膜癌患者CD4+

2、CD25+Treg数量异常与其病程进展和机体的免疫状况有关。关键词:“子宫内膜癌” “外周血” “CD4+CD25+Treg” The change of peripheralblood CD4+CD25+Treg of patients with Endometrial cancer Abstract: Purpose: Investigate the relationship between the quantity of peripheralblood CD4+CD25+Treg of patients with Endometrial cancer and Clinical patho

3、logical features. Method: Detect the proportion changing of peripheralblood T-lymphocyte subsets and CD4+CD25+Treg among 80 patients with Endometrial cancer by Flow cytometry analysis. Result: The proportion of CD4+CD25+Treg of patients with Endometrial cancer are higher than the control group(6.631

4、.61%&3.140.73%，P0.05）. The proportion of CD4+CD25+Treg of patients with Endometrial cancer have correlation with age、clinical stages and lymphatic metastasis. Conclusion: The abnormity of the quantity of CD4+CD25+Treg of patients with Endometrial cancer is related to disease Progression and immune s

5、tatus of the organism.Key Words: Endometrial cance, peripheralblood, Treg肿瘤的发生、与机体的免疫监视机能密切相关， CD4+CD25+Treg能抑制细胞对外源和自体抗原的免疫反应，在维持对自身成分免疫耐受的同时,也可能阻止机体对自体同源肿瘤细胞的免疫。而且肿瘤恶性程度越高，CD4+CD25+Treg水平越高，其预后也越差1.单克隆抗体抗诱导肿瘤免疫近来越来越多的研究致力于将肿瘤疫苗与封闭CD4+CD25+Treg结合起来作为肿瘤免疫治疗新途径。本研究通过流式细胞技术检测子宫内膜癌患者外周血中的CD4+CD25+Treg变

6、化情况，探讨CD4+CD25+Treg在子宫内膜癌患者外周血中的变化规律及临床意义，为子宫内膜癌的早期诊断及免疫治疗提供依据。1、材料及方法 1.1 子宫内膜癌组 患者80例，均为河北大学附属医院妇科2009年1月到2011年1月的住院手术治疗的子宫内膜癌患者，年龄为3967岁，平均年龄53.2岁。实验标本均经病理切片证实。按照1988年国际妇产科联盟（FIGO）的手术病理分期标准，I-期44例，-期36例；病理分级G1级36例，G2级30例，G3级14例。其中14例伴淋巴结转移。对照组 门诊体检者40例（无糖尿病、甲状腺疾病、肾功能不良等疾病），年龄 22-65岁，平均年龄48.39岁。1.

7、3实验步骤1.3.1标本采集和处理 子宫内膜癌组患者在确诊24h内采血2ml EDTA抗凝，对照组采2ml静脉血EDTA抗凝，送检。具体实验步骤： (1) 取静脉全血100 L，分别加入CD4PE标记和CD25FITC标记的mAb试剂20 L，设相应的阴性同型对照，室温闭光反应30 min，然后加2 mL溶血剂，5 min后离去上清，再加0.51.0 mL的PBS液洗涤2次，流式细胞仪（BD公司，FACS Calibur）检测，Cellquest软件分析数据，记录阳性细胞百分率，减去非特异对照值，样品在6 h内检测完毕. PE标记的鼠抗人CD4, FITC标记的鼠抗人CD25 mAb及同型对照

8、PE标记的鼠抗人IgG1, FITC标记的鼠抗人IgG1免疫球蛋白均购自法国A.COULTER公司，溶血剂为实验室自行配制.1.3.2统计学处理实验数据以xs表示，使用SPSS12.0统计软件进行方差分析及两两比较，组内前后比较用配对t检验，P0.05为有统计学意义.2结果2.1.子宫内膜癌患者外周血T淋巴细胞比例的比较：子宫内膜癌患者CD3+CD8+、CD4+CD25+比例比对照组升高差异有显著性，P0.05.（表1）表1 子宫内膜癌患者外周血中淋巴细胞亚群比例（平均百分比）组别nCD3+CD4+CD3+CD8+CD4+CD25+病例组8046.913.9435.164.576.631.61

9、对照组4046.773.2133.165.163.140.73t/t0.1792.17016.603P0.8590.0320.0012.2子宫内膜癌患者外周血CD4+CD25+Treg与患者临床病理特征的关系：子宫内膜癌患者外周血CD4+CD25+Treg水平与患者的FIGO分期、淋巴结转移及年龄的差异有显著性，P0.05.与患者的病理分期差异无显著性，P0.05.（表2） 表2子宫内膜癌患者外周血CD4+CD25+Treg与患者临床病理特征的关系临床病理特征nCD4+CD25+（%）P值FIGO分期期-期期-期病理分期0.001446.301.87368.060.80G1期G2期G3期366

10、.571.831.032306.341.38147.391.32淋巴结转移0.001有转移148.110.68无转移666.311.58年龄（岁）0.0450.05），但与年龄、临床分期关系和有无淋巴结转移有相关性（50岁患者CD4+CD25+Treg数量高于50岁患者，期患者CD4+CD25+Treg高于前三期，而伴有淋巴结转移者CD4+CD25+Treg数量高于无淋巴结转移患者）。证明随着机体免疫状态的下降、肿瘤的进展，肿瘤细胞产生的CD4+CD25+Treg数量增多，使免疫细胞的活性被抑制，子宫内膜癌患者抗肿瘤免疫应答减弱，有利于肿瘤的生长与转移6。 进一步对子宫内膜癌患者外周血CD4+

11、CD25+Treg与性激素水平进行相关性分析发现：子宫内膜癌患者外周血CD4+CD25+Treg与血清中LH水平呈负相关，与E2、P水平呈正相关。说明LH、E2、P对CD4+CD25+Treg的数量变化具有重要的意义. Polanczyk等7将雌二醇（E2）作用于自身免疫性脑脊髓炎的小鼠，发现在小鼠体内外都可以增加CD4+T细胞FOXP3的表达，从而影响调节性T细胞数目及功能。CD4+CD25+Treg具有重要的免疫抑制作用,目前尚有许多问题有待于进一步研究,如肿瘤病人CD4+CD25+Treg升高的机制，多个机制共同参与？哪一个更重要？多个机制参与控制CD4+CD25+Treg免疫调节作用的

12、强度？CD4+CD25+Treg如何在肿瘤免疫逃逸中发挥作用等都需要我们深入的研究。1 Seo N, Hayakawa S, Takigawa M, et al. Interleukin10 express at early tumor sites induces subsequent generation of CD4+ T regulatory cells and systemic collapes of antitumour immunity J. Immunology, 2001,103(4):449-457.2 Wolf AM, Wolf D, Steurer M, et al. I

13、ncrease in regulatory T cells in the peripheral blood of cancer patients J.Clin Cancer Res, 2003,9:606-612.3 Sasada T, Kimuia, Yoshida Y, et al. CD4+CD25+ regulatory T cells in patients with gastrointestinal malignancies: Possible involvement of regulatory T cells in disease progression J. Cancer, 2

14、003,98(5):1089-1099.4 Nakamura K, Kitani A, Fuss I, et al. TGF1 plans an important role in the mechanism of CD4+CD25+ regulatory T cells activity in both humans and mice J. Immunology, 2004,172(2):834-842.5 Rosenberg SA. Progress in human tumor immunology and immunotherapy J. Nature, 2001,411:380-38

15、4.6 Liyange UK, Moore TT, Joo HG, et al. Prevalence of regulatory T cells is increased in peripheral blood and tumor microenvironment of patients with pancreas or breast adenocarcinoma J. Immunology, 2002,169(5):2756-2761.7 Polanczyk MJ, Carson BD, Subramanian S, et al.Cutting edge:estrogen drives expansion of the CD4+CD25+regulatory T cell compartmentJ. J Immunol, 2004, 173(4):2227-2230.专心-专注-专业