实验前教学课件.ppt

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1、实验前：,资料准备 多查文献，查足文献 国外为主，掌握动态 国内为辅，词汇学习 成竹在胸,实验前：,实验技术准备 勤学好问，不耻上问多向已 掌握该技术的人学习和请教 书山有路勤为径多认真阅读 经典的实验技术指南，如分子 克隆实验指南,实验前：,实验技术准备 前人栽树，后人乘凉查找相 关文献 查找PCR引物（注意核对序列） 查找核酸探针序列（AP-1） 查找实验步骤（EMSA）,实验前：,实验设计：磨刀不误砍柴功 实验组、对照组设置完整合理,实验前：,实验设计 绘出实验加样草图，具体到每 个孔加什么、何时加、加多少,实验中:,预实验 同一批次小鼠，先每组选择 2-3只摸索致死剂量 不同批次的试剂

2、 随机化原则 实验结果稳定的保证 不等于随便和随手抓,实验中：,该繁则繁 抽提RNA时戴手套 该简则简 无须无菌操作的步骤 无需防止RNA酶污染的步骤,实验中：,该快则快 开始调节pH值 该慢则慢 细胞培养时的无菌操作 RT-PCR时的加样,实验中：,出现加样错误时 及时弥补（如调换加样孔 ） 做好记录 充分利用好时间 实验间隙写实验记录,实验中：,注意自我防护 细菌 致癌物质：EB、DEPC 辐射：-32P 具有腐蚀作用的试剂：强酸 有毒物质：丙烯酰胺,实验后：,及时记录，防止遗忘 （好记性不如烂笔头） 及时总结，不要盲目向下进行 （欲速则不达） 调整实验思路 更换细胞（THP-1、U937、PBMC） 重新配试剂 （EMSA溶液A、乙酸铵）,实验后：,向高手请教和复习文献资料 （三人行，必有我师 ） 相信自己的实验结果 鼠CpG-N ODN人CpG-S ODN 抗TLR9抗体并不减少CpG-S ODN 诱导的TNF-a 释放,谢谢！,