(完整版)ABI7500仪器验证方案.pdf

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1、编号：ABI 7500ABI 7500 验证方案验证方案方案制定：日期：方案审核：日期：方案批准：日期：上海上海*生物技术有限责任公司生物技术有限责任公司1、简介ABI7500 实时荧光定量 PCR 仪，是美国应用生物系统公司推出的基于微孔板的高通量实时定量 PCR 系统，其反应速度及准确性、操作实用性和使用灵活性均有较好的提高，能满足科研工作者对于定量 PCR 系统高通量方面的要求，是特异性靶基因检测与定量的一体化平台。它主要有一台 ABI 7500 Block kit96 和 PC 计算机及显示器组成。2、验证内容 ABI7500 实时荧光定量 PCR 仪的验证，主要从以下几个方面进行：P

2、C 计算机运行环境的确认、ABI7500 运行软件及分析软件的确认、ABI7500 PCR 扩增及荧光检测系统的确认。3、验证目的通过用 HBV 荧光 PCR 检测试剂盒来确认 ABI7500 实时荧光定量 PCR 仪的扩增和检测体系精密度、线性、准确度等，验证仪器能否正常准确运行，给出可靠的分析结果，以及 96 孔孔间差异是否在允许范围内。4、验证内容4.1 PC 计算机运行环境确认4.1.1 运行环境确认内容检查配套计算机能否正常开机运行，是否有中病毒等现象，能否为ABI7500 运行软件和分析软件提供安装平台和运行平台。4.1.1.2 结果记录4.2 ABI7500 运行软件及分析软件的

3、确认4.2.1 软件确认内容双击电脑桌面上的 ABI7500 运行软件及分析软件的图标，看应用软件能否打开，能否正常使用。4.2.2 结果记录4.3 ABI7500 PCR 扩增及荧光检测系统的确认4.3.1 灵敏度和线性4.3.1.1 方法利用 HBV 荧光 PCR 检测试剂盒，配制 20 支 HBV-PCR Mix，并分别加入 HBV企业灵敏度质控品（3.0E2,3.0E3,3.0E4，3.0E5，3.0E6，3.0E7）、阴性对照、空白对照，均做复管，按照说明书的操作步骤进行。4.3.1.2 合格标准（1）空白对照和阴性对照无起跳（2）经标化的企业灵敏度质线性相关系数 R0.98，复管重

4、复性良好。4.3.1.3 数据记录4.3.2 孔间差异4.3.2.1 方法利用 HBV 荧光 PCR 检测试剂盒，配制 96 支 HBV-PCR Mix，88 支分别加入相同的模板 HBV standard(3.0E4)，另有 3 支加入不同浓度的 HBV standard3.0E7（管号 91）、HBV standard 3.0E6（管号 90）、HBV standard 3.0E5（管号 89），剩余 5 支分别为临界对照（管号 92）、阳性对照（管号 93）、阴性对照（管号 94，管号 96）、空白对照（管号 95），同时进行实时扩增检测。4.3.2.2 合格标准（1）空白、阳性对照无起

5、跳（2）每孔相对偏差值不大于 8%4.3.2.3 数据记录4.3.2.4 数据分析孔间差计算方法： CTi100% (CT1 +CT2 +CT3 +CTn)/n5 异常情况处理在验证的过程中，应严格按照验证方案操作，若出现个别项目不合格，应查明原因后重新进行验证。如果属于仪器设备原因，则由验证小组和质量部负责人协同处理或联系厂家进行维修，并填写相应记录。6 验证最终结果分析和评定评定人：评定时间：7 再验证周期7.1 在一般情况下每一年验证一次。7.2 如更更换仪器零部件或重大维修，完成后均要再次验证，以证明更换零部件及维修对仪器的正常使用没有影响。7.3 再验证启动时，按照完整程序进行。8 验证批准批准人：批准时间：