生物制药工艺学基因工程制药1学习教案.pptx

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1、会计学1生物制药工艺学生物制药工艺学 基因工程基因工程(jyn gngchng)制药制药1第一页，共41页。第1页/共41页第二页，共41页。第2页/共41页第三页，共41页。第3页/共41页第四页，共41页。第4页/共41页第五页，共41页。成本(chngbn)高产量低质量难以保证成本低产量(chnling)高活性强性质优 50具新鲜尸体脑下垂体中提取 基因工程1-2升细菌培养液第5页/共41页第六页，共41页。第6页/共41页第七页，共41页。第7页/共41页第八页，共41页。第8页/共41页第九页，共41页。第9页/共41页第十页，共41页。第10页/共41页第十一页，共41页。第11页

2、/共41页第十二页，共41页。第12页/共41页第十三页，共41页。获得目的(md)基因组建(z jin)重建质粒构建基因工程菌培养工程菌产物分离纯化除菌过滤半成品检定成品检定包装第13页/共41页第十四页，共41页。基因工程(jyn gngchng)的上游和下游目的(md)基因载体(zit)重组DNA分子重组DNA进入宿主细胞转化/转染工程菌大规模培养表达产物分离纯化诱导上游下游实验室工厂化、产业化、商口化第14页/共41页第十五页，共41页。基因工程(jyn gngchng)重组菌构建示意图第15页/共41页第十六页，共41页。第16页/共41页第十七页，共41页。第17页/共41页第十八

3、页，共41页。第18页/共41页第十九页，共41页。筛选(shixun)根据基因决定筛选策略第19页/共41页第二十页，共41页。Notice: Why ?第20页/共41页第二十一页，共41页。真核基因的反转录(zhun l)克隆法第21页/共41页第二十二页，共41页。第22页/共41页第二十三页，共41页。第23页/共41页第二十四页，共41页。mRNA逆转录酶ss-DNA逆转录酶ds-cDNAds-cDNARNaseH酶解除(jich)去mRNADNA聚合酶I核酸酶S1第24页/共41页第二十五页，共41页。第25页/共41页第二十六页，共41页。第26页/共41页第二十七页，共41页

4、。启动子n非表达型载体（pBR322、gt10 ）第27页/共41页第二十八页，共41页。第28页/共41页第二十九页，共41页。第29页/共41页第三十页，共41页。n可从基因组中、载体上扩增基因第30页/共41页第三十一页，共41页。第31页/共41页第三十二页，共41页。第32页/共41页第三十三页，共41页。PCR原理(yunl)示意图第33页/共41页第三十四页，共41页。第34页/共41页第三十五页，共41页。第35页/共41页第三十六页，共41页。设计设计合成合成(hchng)纯化纯化组装组装第36页/共41页第三十七页，共41页。n费用太高。第37页/共41页第三十八页，共41页。第38页/共41页第三十九页，共41页。第39页/共41页第四十页，共41页。三种目的基因提取方法的优缺点三种目的基因提取方法的优缺点仅限于合成核苷酸对较少的仅限于合成核苷酸对较少的简单基因简单基因专一性专一性最强最强化学化学合成法合成法操作过程麻烦，操作过程麻烦，mRNAmRNA很不稳很不稳定，要求的技术条件较高定，要求的技术条件较高专一性强专一性强反转录法反转录法工作量大，盲目，分离出来工作量大，盲目，分离出来的有时并非一个基因的有时并非一个基因操作简便操作简便广泛使用广泛使用基因文库基因文库法法缺缺 点点优优 点点第40页/共41页第四十一页，共41页。