届高考生物选修1第一轮知识点复习10.ppt

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1、一、一、DNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定1提取原理：提取原理：DNA与杂质的与杂质的 不同，不同，DNA与杂质对酶、与杂质对酶、 高温、洗涤剂的耐受性不同。高温、洗涤剂的耐受性不同。2实验设计实验设计(1)材料的选取：选用材料的选取：选用DNA含量相对含量相对 的生物组织，如鸡的生物组织，如鸡 血、菜花、洋葱等。血、菜花、洋葱等。(2)破碎细胞破碎细胞(以鸡血为例以鸡血为例)：鸡血细胞，加蒸馏水，用玻璃：鸡血细胞，加蒸馏水，用玻璃 棒搅拌，用棒搅拌，用 过滤，收集滤液。过滤，收集滤液。(3)去除杂质：利用去除杂质：利用DNA在不同浓度的在不同浓度的 溶液中溶解度不溶液中溶解度不 同，通过控制

2、同，通过控制 溶液的浓度去除杂质。溶液的浓度去除杂质。溶解度溶解度较高较高纱布纱布NaClNaCl(4)DNA析出：将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等的、析出：将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等的、 冷却的冷却的 (体积分数为体积分数为95%)使使DNA析出。析出。3DNA的鉴定：的鉴定：DNA溶解在溶解在2 mol/L的的NaCl溶液中，加入溶液中，加入4 ml 的的 ，沸水中加热，沸水中加热5 min，溶液变成，溶液变成 。酒精溶液酒精溶液二苯胺试剂二苯胺试剂蓝色蓝色二、多聚酶链式反应扩增二、多聚酶链式反应扩增DNA片段片段1PCR原理原理 在在80100的温度范围内的温度范围内D

3、NA发生发生 ，双螺旋结构，双螺旋结构 解体，在温度缓慢降低后，解体，在温度缓慢降低后，DNA发生发生 ，DNA单链与单链与 引物通过碱基互补配对结合，耐高温的引物通过碱基互补配对结合，耐高温的DNA聚合酶从聚合酶从 开始延伸开始延伸DNA链。链。变性变性复性复性引物的引物的3端端2PCR的条件的条件 缓冲溶液、缓冲溶液、 、两种引物、四种脱氧核苷酸、耐热、两种引物、四种脱氧核苷酸、耐热 的的DNA聚合酶，同时要控制温度。聚合酶，同时要控制温度。3PCR的反应过程的反应过程(1)变性：变性：90以上时，双链以上时，双链DNA解旋为解旋为 。(2)复性：温度下降到复性：温度下降到 左右，两种引物

4、通过碱基互补配对左右，两种引物通过碱基互补配对 与两条单链与两条单链DNA结合。结合。(3)延伸：温度上升到延伸：温度上升到 左右，溶液中四种脱氧核苷酸在左右，溶液中四种脱氧核苷酸在 的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的 DNA链。链。DNA模板模板5572DNA聚合酶聚合酶单链单链4PCR反应的结果反应的结果 DNA聚合酶只能特异地复制处于两个引物之间的聚合酶只能特异地复制处于两个引物之间的 序列，序列， 使这段固定长度的序列呈指数扩增。使这段固定长度的序列呈指数扩增。三、分离蛋白质的常用方法和原理三、分离蛋白质的常用方法和原理1凝胶色谱法凝胶色谱法(

5、1)概念：凝胶色谱法也称分配色谱法，是根据概念：凝胶色谱法也称分配色谱法，是根据 分离蛋白质的有效方法。分离蛋白质的有效方法。(2)原理：原理： 的蛋白质容易进入凝胶内部通的蛋白质容易进入凝胶内部通 道，路程较长，移动速度较慢；而大分子不能进入凝胶道，路程较长，移动速度较慢；而大分子不能进入凝胶 内部，则移动速度较快，从而使相对分子质量不同的蛋白内部，则移动速度较快，从而使相对分子质量不同的蛋白 质得以分离。质得以分离。DNA相对分子质相对分子质量的大小量的大小相对分子质量较小相对分子质量较小2实验操作实验操作(1)样品处理：红细胞的洗涤样品处理：红细胞的洗涤血红蛋白的释放血红蛋白的释放分离血

6、红蛋分离血红蛋 白溶液白溶液透析。透析。(2)凝胶色谱的制作：凝胶色谱柱的制作凝胶色谱的制作：凝胶色谱柱的制作凝胶色谱柱的装填凝胶色谱柱的装填 样品的加入和洗脱。样品的加入和洗脱。(3)蛋白质纯度的鉴定原理蛋白质纯度的鉴定原理(SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳) 利用了待分离样品中各种蛋白质利用了待分离样品中各种蛋白质 的差异的差异 以及蛋以及蛋 白质本身的大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁白质本身的大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁 移速度，从而实现样品中各种蛋白质的分离。移速度，从而实现样品中各种蛋白质的分离。带电性质带电性质考点一考点一DNA、蛋白质的提取与分离、蛋

7、白质的提取与分离命命题题解解读读 本部分在高考中所占的分值不大，近三年来本部分在高考中所占的分值不大，近三年来的考查有下降的趋势。命题以简答题的形式为主，的考查有下降的趋势。命题以简答题的形式为主，DNA的粗提取和鉴定是近年来高考对本部分考查的粗提取和鉴定是近年来高考对本部分考查的重点，预计在的重点，预计在2012年高考仍将有所体现。年高考仍将有所体现。示例示例1现代生物已向两个方面发展，宏观研究的水平为生现代生物已向两个方面发展，宏观研究的水平为生态系统水平，微观研究的水平为分子水平，对于分子的研究，态系统水平，微观研究的水平为分子水平，对于分子的研究，其物质的提取和分离显得尤为重要。下面是

8、物质提取和分离其物质的提取和分离显得尤为重要。下面是物质提取和分离的相关问题，请回答：的相关问题，请回答： (一一)DNA分子的提取和分离分子的提取和分离(1)在提取菜花细胞中的在提取菜花细胞中的DNA时，采用的是研磨法，为什么不时，采用的是研磨法，为什么不能像用鸡血那样，用蒸馏水使其破裂？能像用鸡血那样，用蒸馏水使其破裂？_。(2)在提取实验过程中用到两种浓度的在提取实验过程中用到两种浓度的NaCl溶液，说明其作用：溶液，说明其作用：2 mol/L NaCl溶液：溶液：_； 0.14 mol/L NaCl溶液：溶液：_。(3)在整个操作过程中，每在整个操作过程中，每100 mL 血液中加入血

9、液中加入3 g柠檬酸钠的作柠檬酸钠的作 用是：用是：_。(4)鉴定鉴定DNA所用的试剂：所用的试剂：_。(二二)血红蛋白的提取和分离血红蛋白的提取和分离(1)在血红蛋白的提取和分离过程中：粗分离、纯化和纯度鉴在血红蛋白的提取和分离过程中：粗分离、纯化和纯度鉴 定时，都会用到缓冲溶液，其作用是定时，都会用到缓冲溶液，其作用是_。(2)在洗脱过程中，对洗脱液的流速要求稳定的目的是：在洗脱过程中，对洗脱液的流速要求稳定的目的是： _(三三)不同的化学物质，其理化特性不同，提取方法也有所差异，不同的化学物质，其理化特性不同，提取方法也有所差异， 如胡萝卜素不溶于水，易溶于如胡萝卜素不溶于水，易溶于_，

10、因此可以用，因此可以用_方法方法 进行提取。进行提取。解析解析(一一)(1)DNA分子提取中理想的材料为富含分子提取中理想的材料为富含DNA的细胞，的细胞，动物中鸡血细胞核，放入蒸馏水中会使细胞涨破释放出动物中鸡血细胞核，放入蒸馏水中会使细胞涨破释放出DNA，而植物细胞含有细胞壁不能因吸水而涨破。而植物细胞含有细胞壁不能因吸水而涨破。(2)实验过程中两次实验过程中两次用到用到NaCl溶液，初次为溶液，初次为2 mol/L的的NaCl溶液，用于溶解溶液，用于溶解DNA，而而0.14 mol/L的的NaCl溶液会使溶液会使DNA析出。析出。(3)为了防止凝血现象为了防止凝血现象的发生应加入柠檬酸钠

11、。的发生应加入柠檬酸钠。(4)鉴定鉴定DNA所用的试剂为二苯胺试剂。所用的试剂为二苯胺试剂。(二二)(1)为保持蛋白质的生理活性，防止变性从而用缓冲液保持为保持蛋白质的生理活性，防止变性从而用缓冲液保持pH的恒定。的恒定。(2)洗脱液的液速变化过快，导致分离纯化不充分。洗脱液的液速变化过快，导致分离纯化不充分。(三三)胡萝卜素的化学性质比较稳定，不溶于水，易溶于有机溶剂。胡萝卜素的化学性质比较稳定，不溶于水，易溶于有机溶剂。因此可以用有机溶剂作萃取剂，以萃取的方法来提取。因此可以用有机溶剂作萃取剂，以萃取的方法来提取。答案答案(一一)(1)植物细胞具有细胞壁，不会吸水涨破，只有植物细胞具有细胞

12、壁，不会吸水涨破，只有通过研磨，才能释放出通过研磨，才能释放出DNA。(2)溶解溶解DNA分子，过滤并除去不溶于分子，过滤并除去不溶于NaCl溶液的杂质溶液的杂质使使DNA分子析出，过滤并除去溶于分子析出，过滤并除去溶于NaCl溶液中的杂质溶液中的杂质(3)防止出现凝血防止出现凝血(4)二苯胺试剂二苯胺试剂(二二)(1)维持血红蛋白环境中维持血红蛋白环境中pH的稳定的稳定(2)维持洗脱液加在色谱柱上的压力稳定维持洗脱液加在色谱柱上的压力稳定(三三)有机溶剂有机溶剂萃取有机溶剂有机溶剂萃取DNA与蛋白质提取的比较与蛋白质提取的比较提取提取物质物质提取方提取方法法提取原理提取原理步骤步骤DNA盐析

13、法盐析法在不同浓度的在不同浓度的NaCl溶液中溶解溶液中溶解度不同；度不同；不溶于酒精，不溶于酒精，但某些化合物溶但某些化合物溶于酒精于酒精溶解在溶解在2 mol/L的的NaCl的溶液中；的溶液中；NaCl溶液加水稀释溶液加水稀释0.14 mol/L，使，使DNA 析析出、过滤；出、过滤；加入冷酒精析出加入冷酒精析出提取提取物质物质提取提取方法方法提取原理提取原理步骤步骤血红血红蛋白蛋白凝胶色凝胶色谱法、谱法、电泳法电泳法根据相对分子量的大小；根据相对分子量的大小；各种分子带电性质的差各种分子带电性质的差异以及分子本身大小、性异以及分子本身大小、性状的不同状的不同样品处理；样品处理；粗提取；粗

14、提取；纯化；纯化；纯度鉴定纯度鉴定1蛋白酶能将蛋白质水解而使染色质中的蛋白酶能将蛋白质水解而使染色质中的DNA分离出来，下分离出来，下 列药品可达到上述同一目的的是列药品可达到上述同一目的的是 () A蒸馏水蒸馏水BNaCl溶液溶液 CNaOH溶液溶液 DDNA酶酶解析：解析：染色质中的主要成分是染色质中的主要成分是DNA和蛋白质，我们可以利和蛋白质，我们可以利用蛋白酶水解杂质蛋白质，从而使提取的用蛋白酶水解杂质蛋白质，从而使提取的DNA与蛋白质分与蛋白质分开。也可以利用开。也可以利用DNA和蛋白质在和蛋白质在NaCl溶液中的溶解度不溶液中的溶解度不同，同，DNA在在2 mol/L NaCl溶

15、液中溶解度高，而蛋白质则不溶液中溶解度高，而蛋白质则不能溶解在能溶解在2 mol/L NaCl溶液中，通过过滤能除去不能溶解溶液中，通过过滤能除去不能溶解的杂质蛋白质，由此可看出两种方法虽然原理不同，但目的杂质蛋白质，由此可看出两种方法虽然原理不同，但目的是一样的。的是一样的。答案：答案： B2在血红蛋白的提取和分离实验中，下列操作正确的是在血红蛋白的提取和分离实验中，下列操作正确的是 () A分离红细胞时需去除上层透明的黄色血浆分离红细胞时需去除上层透明的黄色血浆 B红细胞释放出血红蛋白时只需加入蒸馏水红细胞释放出血红蛋白时只需加入蒸馏水 C分离血红蛋白溶液时低速短时间离心分离血红蛋白溶液时

16、低速短时间离心 D洗脱时，待红色蛋白质下移即开始收集流出液洗脱时，待红色蛋白质下移即开始收集流出液解析：解析：分离红细胞时要及时除去血浆蛋白，红细胞释放血分离红细胞时要及时除去血浆蛋白，红细胞释放血红蛋白时需要加入蒸馏水和甲苯。分离血细胞时，要短时红蛋白时需要加入蒸馏水和甲苯。分离血细胞时，要短时低速离心，即一般为低速离心，即一般为500 r/min，离心，离心2 min，否则白细胞会，否则白细胞会一同沉淀，达不到分离效果。分离血红蛋白时要高速长时一同沉淀，达不到分离效果。分离血红蛋白时要高速长时间离心，以间离心，以2 000 r/min的速度离心的速度离心10 min。洗脱时待红色的。洗脱时

17、待红色的蛋白质接近色谱柱底端用试管收集流出液。蛋白质接近色谱柱底端用试管收集流出液。答案：答案：A考点二考点二用用PCR技术扩增技术扩增DNA片段片段命命题题解解读读本部分内容在近几年高中命题中极少出现，本部分内容在近几年高中命题中极少出现，但是但是PCR技术作为前沿科技可能为今后高考提技术作为前沿科技可能为今后高考提供命题的材料和情景出现，预计供命题的材料和情景出现，预计2012年高考可年高考可能与基因工程联系考查其原理及主要的操作要能与基因工程联系考查其原理及主要的操作要领。领。示例示例2PCR(多聚酶链式反应多聚酶链式反应)技术是一项在生物体外复制技术是一项在生物体外复制特定的特定的DN

18、A片版的核酸合成技术，下图表示合成过程，请据片版的核酸合成技术，下图表示合成过程，请据图分析回答：图分析回答：(1)A过程高温使过程高温使DNA变性解旋，对该过程的原理叙述正确变性解旋，对该过程的原理叙述正确 的是的是_。 A该过程用到耐高温的解旋酶破坏氢键该过程用到耐高温的解旋酶破坏氢键 B该过程用到限制酶破坏磷酸二酯键该过程用到限制酶破坏磷酸二酯键 C该过程不需要解旋酶的作用该过程不需要解旋酶的作用 D该过程与人体细胞的过程完全相同该过程与人体细胞的过程完全相同(2)C过程要用到的酶是耐高温的过程要用到的酶是耐高温的_。这种酶在高温。这种酶在高温 下仍保持活性，因此在下仍保持活性，因此在P

19、CR扩增时可以扩增时可以_加入，加入， _(需要需要/不需要不需要)再添加。再添加。PCR反应除提反应除提 供酶外，还需要满足的基本条件有：供酶外，还需要满足的基本条件有： _。(3)如果把模板如果把模板DNA的两条链用的两条链用15N标记，游离的脱氧核苷酸不标记，游离的脱氧核苷酸不 做标记，控制做标记，控制“945572”温度循环温度循环3次，则在形成次，则在形成 的子代的子代DNA中含有中含有15N标记的标记的DNA占占_。(4)如果模板如果模板DNA分子共有分子共有a个碱基对，其中胞嘧啶个碱基对，其中胞嘧啶m个，则该个，则该 DNA复制复制10次，需要加入胸腺嘧啶脱氧核苷酸次，需要加入胸

20、腺嘧啶脱氧核苷酸_个。个。(5)PCR中由碱基错配引起的变异属于中由碱基错配引起的变异属于 _。 假设对一个假设对一个DNA进行扩增，第一次循环时某一条模板链上发进行扩增，第一次循环时某一条模板链上发 生碱基错配，则扩增若干次后检测所有生碱基错配，则扩增若干次后检测所有DNA的扩增片段，与的扩增片段，与 DNA相应片段相同的占相应片段相同的占_。解析解析(1)高温所起的作用类似于解旋酶，使双链高温所起的作用类似于解旋酶，使双链DNA变为变为单链。单链。(2)C过程中过程中PCR技术的延伸阶段，当系统温度上升到技术的延伸阶段，当系统温度上升到72左右，溶液中的四种脱氧核苷酸在耐高温的左右，溶液中

21、的四种脱氧核苷酸在耐高温的DNA聚合聚合酶的作用下合成新的酶的作用下合成新的DNA链。这种链。这种DNA聚合酶在高温下不聚合酶在高温下不变性，所以一次性加入即可。变性，所以一次性加入即可。(3)PCR技术遵循半保留复制的技术遵循半保留复制的特点。经过三次循环，共产生特点。经过三次循环，共产生23个个DNA分子，其中有分子，其中有2个个DNA分子含有分子含有15N标记。标记。(4)在一个双链在一个双链DNA分子中，分子中，CT占占碱基总数的一半，故碱基总数的一半，故T的数目为的数目为(am)，复制，复制10次，相当于次，相当于新增加了新增加了(2101)个个DNA分子。故需补充分子。故需补充T的

22、数目为的数目为(2101)(am)。(5)基因中的碱基对改变属于基因突变。对一个基因中的碱基对改变属于基因突变。对一个DNA进行扩增，第一次循环时某一条模板链上发生碱基错配，进行扩增，第一次循环时某一条模板链上发生碱基错配，以后按正常配对方式进行扩增，错配链作为模板扩增都是错以后按正常配对方式进行扩增，错配链作为模板扩增都是错误的误的DNA分子，原正常链扩增得到的分子，原正常链扩增得到的DNA分子都是正分子都是正常常DNA分子，故若干次后检测所有分子，故若干次后检测所有DNA的扩增片段，与原的扩增片段，与原DNA相应片段相同的占相应片段相同的占1/2。答案答案(1)C(2)DNA聚合酶一次不需

23、要聚合酶一次不需要DNA模板、模板、两种引物、四种脱氧核苷酸，通过控制温度使两种引物、四种脱氧核苷酸，通过控制温度使DNA复制在复制在体外反复进行体外反复进行(3)25%(4)(2101)(am)(5)基因突变基因突变50%PCR扩增技术和扩增技术和DNA复制的比较复制的比较细胞内细胞内DNA复制复制PCR不不同同点点解旋解旋解旋酶，边解旋边复制解旋酶，边解旋边复制80高温解旋，高温解旋，双链完全分开双链完全分开酶酶解旋酶，解旋酶，DNA聚合酶，聚合酶，DNA连接酶连接酶Taq DNA聚合酶聚合酶引物引物RNADNA或或RNA能量能量ATP不加不加温度温度体内温和条件体内温和条件高温高温细胞内

24、细胞内DNA复制复制PCR不不同同点点子链合成子链合成一条链连续一条链连续(先导链先导链)，另，另一条链不连续，先合成一条链不连续，先合成片段，再由片段，再由DNA连接酶连接酶连接连接(滞后链滞后链)两条子链均两条子链均连续合成连续合成相同点相同点提供提供DNA模板；模板；四种脱氧核苷酸做原料；四种脱氧核苷酸做原料；子链延伸的方向都是从子链延伸的方向都是从5端到端到3端端3多聚酶链式反应多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。片段的技术。 请回答下列有关请回答下列有关PCR技术的基本原理及应用问题。技术的基本原理及应用问题。 (1)DNA的两条链是反向平行

25、的，通常将的两条链是反向平行的，通常将 _ 的末端称的末端称 为为5端，当引物与端，当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后，母链通过碱基互补配对结合后， DNA聚合酶就能从引物的聚合酶就能从引物的_开始延伸开始延伸DNA链。链。 (2)PCR利用利用DNA的热变性原理解决了打开的热变性原理解决了打开DNA双链的问题，双链的问题， 但又导致了但又导致了DNA聚合酶失活的新问题。到聚合酶失活的新问题。到20世纪世纪80年代，年代， 科学家从一种科学家从一种Taq细胞中分离到细胞中分离到_，它的发现和应，它的发现和应 用解决了上述问题。要将用解决了上述问题。要将Taq细菌从其他普通的微生物中分细菌

26、从其他普通的微生物中分 离出来，所用的培养基叫离出来，所用的培养基叫_ 。(3)PCR的每次循环可以分为的每次循环可以分为_ 三步。假设在三步。假设在PCR反应中，只有一个反应中，只有一个DNA片段作为模板，请片段作为模板，请计算在计算在5次循环后，反应物中大约有次循环后，反应物中大约有_个这样的个这样的DNA片段。片段。解析：解析：(1)DNA聚合酶作用时必须要有一个引物，它只能把新聚合酶作用时必须要有一个引物，它只能把新的核苷酸加到已经存在的核酸的的核苷酸加到已经存在的核酸的3羟基上，与羟基上，与DNA母链结合母链结合的的RNA引物就提供这个羟基。引物就提供这个羟基。(2)因因PCR利用了

27、利用了DNA的热变性原的热变性原理解决了打开理解决了打开DNA双链的问题，所以用于催化双链的问题，所以用于催化DNA复制过程复制过程的的DNA聚合酶要具有耐高温的特性。用选择培养基可将聚合酶要具有耐高温的特性。用选择培养基可将Taq细细菌从其他普通的微生物中分离出来。菌从其他普通的微生物中分离出来。(3)DNA复制两条链均作复制两条链均作为模板，进行半保留式复制，所以复制为模板，进行半保留式复制，所以复制5次后得到的子代次后得到的子代DNA分子数为分子数为2532个。个。答案：答案：(1)磷酸基团磷酸基团3端端(2)耐高温的耐高温的Taq DNA聚合酶选聚合酶选择培养基择培养基(3)变性、复性

28、和延伸变性、复性和延伸32示例示例回答下列回答下列有关有关“DNA的粗提取与的粗提取与鉴定鉴定”实实验的问题。验的问题。(1)下列有关下列有关“DNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定”实实验原理的叙述正确的验原理的叙述正确的 是是 () ADNA在在NaCl溶液中的溶解度，随溶液中的溶解度，随NaCl溶液浓度的降低溶液浓度的降低 而减小而减小 B利用利用DNA不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精 的物质而得到较纯的的物质而得到较纯的DNA CDNA是大分子有机物，不溶于水而溶于某些有机溶剂是大分子有机物，不溶于水而溶于某些有机溶剂 D在沸水中，在沸水中，DN

29、A遇二苯胺会出现紫色反应遇二苯胺会出现紫色反应(2)由于鸡血较难找到，某学生试图用人血代替，结果没有成由于鸡血较难找到，某学生试图用人血代替，结果没有成 功，其原因最可能是功，其原因最可能是 () A操作方法不对操作方法不对 B人血含人血含DNA太少太少 CNaCI溶液浓度太高溶液浓度太高 D加二苯胺太少加二苯胺太少(3)下图为该实验过程中的一些重要操作示意图：下图为该实验过程中的一些重要操作示意图：正确的操作顺序是正确的操作顺序是_。上图上图C、E步骤都加入蒸馏水，但其目的不同，分别是步骤都加入蒸馏水，但其目的不同，分别是_和和_。上图上图A步骤中所用酒精必须是经过步骤中所用酒精必须是经过_

30、才能使用，才能使用，该步骤的目的是该步骤的目的是_。为鉴定为鉴定A中所得到的丝状物的主要成分为中所得到的丝状物的主要成分为DNA，可滴加，可滴加_试剂，沸水浴，如果出现试剂，沸水浴，如果出现_则该丝状物的则该丝状物的主要成分为主要成分为DNA。解析解析(1)DNA在在NaCl溶液中的溶解规溶液中的溶解规律如图：律如图：DNA不溶于酒精等有机溶剂，在沸水不溶于酒精等有机溶剂，在沸水浴条件下，浴条件下，DNA遇二苯胺后呈现蓝色。遇二苯胺后呈现蓝色。(2)由于人属于哺乳动物，成熟的红细由于人属于哺乳动物，成熟的红细胞中不含细胞核、线粒体，所以几乎不胞中不含细胞核、线粒体，所以几乎不含含DNA，很难提

31、取到，很难提取到DNA。(3)DNA粗提取的过程为：红细胞加蒸馏水，胀破后过滤粗提取的过程为：红细胞加蒸馏水，胀破后过滤用用2 mol/L NaCl溶解溶解过滤除去不溶杂质加蒸馏水，析出含过滤除去不溶杂质加蒸馏水，析出含DNA的的黏稠物黏稠物过滤过滤黏稠物溶解在黏稠物溶解在2 mol/L NaCl中中过滤过滤溶于溶于95%酒精进一步提纯，所以根据图示及以上分析，正确操作顺序为酒精进一步提纯，所以根据图示及以上分析，正确操作顺序为CBEDA。答案答案(1)B(2)B(3)CBEDA加速血细胞的破裂降低加速血细胞的破裂降低NaCl溶液的浓度，使溶液的浓度，使DNA析出析出充分预冷提取含杂质较少充分

32、预冷提取含杂质较少(或较纯净或较纯净)的的DNA二苯胺二苯胺(或甲基绿或甲基绿)蓝色蓝色(蓝绿色蓝绿色)1实验步骤中实验步骤中3次加入次加入NaCl溶液的浓度和作用：溶液的浓度和作用：浓度均为浓度均为2 mol/L，作用均为溶解，作用均为溶解DNA。2实验步骤中实验步骤中2次加入蒸馏水的目的：次加入蒸馏水的目的：第一次加入是使鸡第一次加入是使鸡 血细胞吸水涨破，第二次是稀释血细胞吸水涨破，第二次是稀释NaCl溶液至溶液至0.14 mol/L， 从而析出从而析出DNA。3实验中实验中4次过滤的比较次过滤的比较第一次过滤第一次过滤第二次过滤第二次过滤第三次过滤第三次过滤第四次过滤第四次过滤滤液滤液

33、中中含含DNA的核的核物质物质DNA溶于溶于0.14 mol/L NaCl溶溶液的杂质液的杂质DNA 第一次过滤第一次过滤 第二次过滤第二次过滤第三次过滤第三次过滤第四次过滤第四次过滤纱布上纱布上细胞膜、核细胞膜、核膜等残片膜等残片溶于溶于2 mol/L NaCl溶液的溶液的杂质杂质DNA不溶于不溶于2 mol/LNaCl溶溶液的杂质液的杂质过滤前过滤前加入的加入的物质物质蒸馏水蒸馏水NaCl溶液溶液蒸馏水蒸馏水NaCl溶液溶液过滤的过滤的目的目的去除细胞膜、去除细胞膜、核膜等杂质核膜等杂质去除不溶于去除不溶于2mol/L NaCl的杂质的杂质去除溶于去除溶于0.14 mol/L NaCl溶液

34、的溶液的杂质杂质去除不溶于去除不溶于2 mol/L NaCl溶液的杂质溶液的杂质4其他注意事项其他注意事项(1)甲基绿可将甲基绿可将DNA染成绿色且不需水浴加热，二苯胺鉴定染成绿色且不需水浴加热，二苯胺鉴定 DNA属于颜色反应，需要沸水浴加热属于颜色反应，需要沸水浴加热5min，可使，可使DNA呈呈 蓝色。蓝色。(2)二苯胺试剂要现配现用，否则二苯胺会变成浅蓝色，影二苯胺试剂要现配现用，否则二苯胺会变成浅蓝色，影 响鉴定效果。响鉴定效果。(3)DNA进一步提纯进一步提纯(第四次过滤的滤液第四次过滤的滤液)时要选用预冷的时要选用预冷的95% 的酒精，作用如下：的酒精，作用如下： 抑制核酸水解酶活性，防止抑制核酸水解酶活性，防止DNA降解；降解； 降低分子运动，易于形成沉淀析出；降低分子运动，易于形成沉淀析出； 低温有利于增加低温有利于增加DNA分子柔韧性，减少断裂。分子柔韧性，减少断裂。