分子生物学原理--蛋白质的生物合成课件.ppt
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1、2022-5-23分子生物学原理第十二章第十二章 翻译翻译 翻译:翻译:translation translation 即蛋白质生物合成。即蛋白质生物合成。 把核酸中四种符号把核酸中四种符号(AGCT/U)(AGCT/U)组成的遗组成的遗传信息,以遗传密码破读的手段转变传信息,以遗传密码破读的手段转变为蛋白质的氨基酸排列顺序的过程。为蛋白质的氨基酸排列顺序的过程。2022-5-23分子生物学原理第一节、参与蛋白质合成的物质第一节、参与蛋白质合成的物质 各种各种RNARNA、核糖体、氨基酸、酶、核糖体、氨基酸、酶 起始阶段:起始因子起始阶段:起始因子 延长阶段:延长因子延长阶段:延长因子 终止阶
2、段:核糖体释放因子终止阶段:核糖体释放因子2022-5-23分子生物学原理一、一、 mRNAmRNA是翻译的模板是翻译的模板 原核生物的一种原核生物的一种mRNAmRNA往往编码几种功往往编码几种功能相近的蛋白质。能相近的蛋白质。 真核生物的真核生物的mRNAmRNA比原核生物多,但一比原核生物多,但一个个RNARNA分子一般只带有一种蛋白质的编分子一般只带有一种蛋白质的编码信息。码信息。2022-5-23分子生物学原理遗传密码的特点遗传密码的特点 连续性连续性(commaless(commaless) ):密码之间没有间断:密码之间没有间断 简并性简并性(degeneracy)(degene
3、racy): 大多数氨基酸有大多数氨基酸有2626个密码个密码 摆动性摆动性(wobble)(wobble):密码的第三位碱基与反:密码的第三位碱基与反密码的第一位碱基配对不严格密码的第一位碱基配对不严格 通用性通用性(universal)(universal):全世界生物共用:全世界生物共用2022-5-23分子生物学原理连续性连续性G C A G U A C A U G U C不连续的读法:不连续的读法:G C A C A G A G U G U A .密码之间没有密码之间没有核苷酸间断核苷酸间断2022-5-23分子生物学原理简并性简并性 除了色除了色氨酸和氨酸和蛋氨酸蛋氨酸外,其外,其
4、余氨基余氨基酸均有酸均有2 2 -6-6个三个三联体为联体为其编码。其编码。*2022-5-23分子生物学原理摆动性摆动性 密码与反密码配对辨认密码与反密码配对辨认时,有时并不完全按照时,有时并不完全按照碱基互补规律。尤其是碱基互补规律。尤其是密码的第三碱基对反密密码的第三碱基对反密码的第一位碱基,更常码的第一位碱基,更常出现这种摆动现象。出现这种摆动现象。mRNA密码子密码子tRNA 反反密密码码碱碱基基IUCmRNA 密密码码碱碱基基A,C,UA,GC,G,UCGI 反密码子反密码子GCC 密码子密码子2022-5-23分子生物学原理通用性通用性除了动物细胞中的线粒体和植物细胞中的叶绿体外
5、,除了动物细胞中的线粒体和植物细胞中的叶绿体外,从最简单的病毒、原核生物到人类都使用一套遗传密从最简单的病毒、原核生物到人类都使用一套遗传密码。码。2022-5-23分子生物学原理二、核糖体是肽链合成的场所二、核糖体是肽链合成的场所 氨基酸首先在氨基酸首先在核糖体内合成核糖体内合成蛋白质,再输蛋白质,再输送至细胞其它送至细胞其它组分中。组分中。 核糖体由大、核糖体由大、小亚基构成。小亚基构成。亚基中含有不亚基中含有不同的蛋白质和同的蛋白质和RNARNA。2022-5-23分子生物学原理二、核糖体是肽链合成的场所二、核糖体是肽链合成的场所 大亚基:大亚基: tRNAtRNA结合位点:结合位点:
6、P P位位:给出:给出AAAA,释放,释放 tRNA tRNA A A位位:接受:接受tRNA-AAtRNA-AA 转肽酶转肽酶,合成肽键,合成肽键 转位酶转位酶 小亚基:小亚基: 识别起始位点识别起始位点 与与mRNAmRNA形成复合物形成复合物2022-5-23分子生物学原理2022-5-23分子生物学原理三、三、tRNAtRNA和氨基酰和氨基酰tRNAtRNA tRNAtRNA在蛋白质翻译中起接合的作用。在蛋白质翻译中起接合的作用。 tRNAtRNA的氨基酸臂上携带氨基酸。的氨基酸臂上携带氨基酸。 tRNAtRNA分子的反密码环与分子的反密码环与mRNAmRNA上的密码配上的密码配对。对
7、。 密码密码- -反密码反密码- -氨基酸三联体保证了翻译的氨基酸三联体保证了翻译的准确性。准确性。2022-5-23分子生物学原理氨基酰氨基酰-tRNA-tRNA的生成的生成 氨基酰氨基酰- -AMP-E + tRNAAMP-E + tRNA 氨基酰氨基酰-tRNA-tRNA + AMP + E + AMP + E 氨基酸氨基酸ATPATPE E 氨基酰氨基酰AMP-E + PPiAMP-E + PPi E : E : 氨基酰氨基酰-tRNA-tRNA合成酶,具高度专一性合成酶,具高度专一性 1 . 1 . 存在于胞质中存在于胞质中 2 . 2 . 需需ATPATP供能供能, , 需需MgM
8、g+, Mn, Mn+ + 3 . 3 . 有二个识别位点有二个识别位点 2022-5-23分子生物学原理氨基酰氨基酰- -tRNAtRNA的书写的书写 Arg-tRNAarg Met-tRNAmetm fMet-tRNAmetf 原核生物起始密码子需要在原核生物起始密码子需要在Met-tRNAmetf上进行甲酰化,上进行甲酰化,而真核生物不需要。而真核生物不需要。 Met-tRNAmetf+FH4-CHO 转甲酰基酶转甲酰基酶 fMet-tRNAmetf 2022-5-23分子生物学原理第二节、蛋白质生物合成过程第二节、蛋白质生物合成过程 起始起始 延长延长 终止终止2022-5-23分子生
9、物学原理原核生物的翻译起始原核生物的翻译起始 起始因子起始因子(IF)(IF):胞液中的可溶性因子。:胞液中的可溶性因子。 已知有三种:已知有三种: IF-1IF-1:促进:促进IF-3IF-3与小亚基结合与小亚基结合 IF-2IF-2:使:使 fMet-tRNAmetf 与小亚基结合与小亚基结合 IF-3IF-3:使大小亚基分离:使大小亚基分离 核糖体结合序列核糖体结合序列:原核生物的:原核生物的mRNAmRNA有一有一非常保守的序列,与核糖体的非常保守的序列,与核糖体的1616S-rRNAS-rRNA结结合,引导合,引导mRNAmRNA进入核糖体,这样的序列进入核糖体,这样的序列称为称为S
10、-DS-D序列,也叫核糖体结合序列。序列,也叫核糖体结合序列。2022-5-23分子生物学原理核糖体结合序列核糖体结合序列2022-5-23分子生物学原理原核生物起始过程原核生物起始过程 7070S S核糖体核糖体IF3IF3IF1IF1 30S 30S小亚基小亚基 IF3 IF3 IF1 + 50SIF1 + 50S大亚基大亚基 fmet-tRNAfmet先形成先形成fmet tRNAfmet IF2 GTP,再与,再与小亚基和小亚基和mRNA形成复合物形成复合物 ,最后形成,最后形成70S起始复合物。起始复合物。 P位为位为mRNA上的上的AUG及及fmet tRNAfmet 所占据所占据
11、 , A位空缺。位空缺。70S 70S mRNA mRNA fmet fmet tRNAtRNAf fmetmet 70S 70S起始复合物起始复合物fmet-tRNAfmet+GTP+IF2 fmet tRNAfmet IF2 GTP +mRNA30S mRNA fmet tRNAfmet GTP IF1 IF2 IF350S IF1,IF2,IF3,GDP+Pi2022-5-23分子生物学原理原核生物起始过程原核生物起始过程2022-5-23分子生物学原理真核生物的翻译起始真核生物的翻译起始 起始因子起始因子(eIFeIF):有):有1010种种 起始甲硫氨酰起始甲硫氨酰tRNAmet无甲
12、酰化无甲酰化 mRNAmRNA结构有所不同结构有所不同 核糖体有所不同核糖体有所不同 原核生物与真核生物的翻译起始比较原核生物与真核生物的翻译起始比较2022-5-23分子生物学原理真核生物的翻译起始真核生物的翻译起始2022-5-23分子生物学原理二、肽链的延长二、肽链的延长 核糖体循环:核糖体循环:翻译过程中的肽链延长,翻译过程中的肽链延长, 延长因子:延长因子:延长过程所需的蛋白质因子延长过程所需的蛋白质因子称称 ( (EF)EF)。 核糖体循环核糖体循环分为分为注册注册、成肽成肽和和转位转位三个三个步骤。步骤。2022-5-23分子生物学原理二、肽链的延长二、肽链的延长原原核核生生物物
13、功功能能真真核核生生物物EF-TuEF-Ts协协助助氨氨基基酰酰- -t tR RN NA A 进进入入 A A 位位, 结结合合 G GT TP P EF-1 EF-G转转位位酶酶, 协协助助 m mR RN NA A前前移移,由由 A A 位位进进至至 P P位位; ; 释释放放 t tR RN NA A EF-22022-5-23分子生物学原理注册注册 注册:氨注册:氨基酰基酰- -tRNAtRNA根据遗传根据遗传密码的指密码的指引,进入引,进入核糖体的核糖体的A A位。位。mRNA2022-5-23分子生物学原理成肽和转位成肽和转位 成肽由成肽由转肽酶转肽酶催化,反应在催化,反应在A
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